| 猪瘟病毒E2基因自杀性DNA疫苗的构建及动物免疫试验 |
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| 引用本文： | 郭抗抗,温肖会,汤智慧,侯勃,张彦明,谢林红,王晶钰.猪瘟病毒E2基因自杀性DNA疫苗的构建及动物免疫试验[J].中国兽医学报,2011,31(5). |
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| 作者姓名： | 郭抗抗 温肖会 汤智慧 侯勃 张彦明 谢林红 王晶钰 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌,712100 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划("863"计划)资助项目 |
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| 摘 要： | 从含有猪瘟病毒(CSFV)Shimen株E2全长基因的重组质粒pMD18-T-E2上扩增得到带有BamHⅠ酶切位点的E2基因片段,构建重组克隆质粒pMD19-T-E2.用BamH Ⅰ酶切pMD19-T-E2和"自杀性"DNA疫苗表达载体pSCA1,构建"自杀性"DNA疫苗重组质粒pSCA1-E2.对目的基因E2的大小、插入位置、方向和读码框经PCR、酶切和序列测定进行鉴定.用纯化的阳性质粒pSCA1-E2转染PK-15细胞,转染后48 h荧光抗体法检测E2蛋白的表达;纯化的pSCA1-E2质粒分别免疫小鼠(10 μg/只)和试验猪(600μg/头),二免后分别检测小鼠脾淋巴细胞刺激指数和猪血清抗猪瘟特异性抗体水平.结果表明,构建的重组质粒中E2基因的大小、插入位置、方向和读码框均正确,获得了重组表达质粒pSCA1-E2;转染后48 h可检测到转染的PK-15细胞中E2蛋白的表达.免疫小鼠产生较高水平的淋巴细胞刺激指数,免疫猪可检测到抗CSFV特异性血清抗体;表明构建的pSCA1-E2重组质粒能激发实验动物的免疫反应.
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| 关 键 词： | 猪瘟病毒 E2基因 "自杀性"DNA疫苗 动物免疫试验 |
Construction of suicidal DNA vaccine of CSFV E2 gene and immunity induction in animals |
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| GUO Kang-kang,WEN Xiao-hui,TANG Zhi-hui,HOU Bo,ZHANG Yan-ming,XIE Lin-hong,WANG Jing-yu.Construction of suicidal DNA vaccine of CSFV E2 gene and immunity induction in animals[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2011,31(5). |
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| Authors: | GUO Kang-kang WEN Xiao-hui TANG Zhi-hui HOU Bo ZHANG Yan-ming XIE Lin-hong WANG Jing-yu |
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