水貂出血性肺炎二联四价灭活疫苗的研制

为预防水貂出血性肺炎的发生,制备了水貂二联四价灭活疫苗,并进行了评估。对强致病性E、G和D型铜绿假单胞菌及H11基因型大肠杆菌进行了菌株的灭活,制备疫苗,对疫苗进行安全性检查、超剂量检查、最小免疫剂量确定、水貂攻毒保护试验及初步临床应用。结果表明,菌株灭活完全,平板上未见单一菌落出现,疫苗初步制备完成且安全检查试验中试管内未出现浑浊,超剂量检查试验中接种水貂未见不良反应。最小免疫剂量为0.5mL(5.0×108CFU)时对水貂起到完全保护,此时感染剂量为10 LD50个细菌,初步临床应用效果较好。本研究针对由铜绿假单胞菌和大肠杆菌感染引起的水貂出血性肺炎的预防和二联四价灭活疫苗的使用提供参考依据。     

某种鹅场大肠杆菌病的实验室诊断及其防治

1发病情况及临床症状 2014年4月初，某种鹅场饲养的2万只种鹅，开产后一段时间，产蛋率升到86％，随后就开始发病，产蛋量下降，下降大约15％，以为是消化不良，场内兽医投给酵母粉，又投给土霉素进行治疗，不见好转，而且还发生死亡现象，3d内死亡鹅58只，特别是阴雨天较为明显。     

可供选择的替代型产蛋系统

1现代多层式蛋鸡级饲养系统大荷兰人国际公司(Big Dutchman's International)生产的Natura-Nova双层式(Natura-NovaTwin)散养系统(图1)是一个经过试用和考验的大型鸡舍饲养系统,此系统已经在生产中成功应用了多年.此饲养系统由两个层面组成,系统本身和两层式产蛋箱之间实现完美连接,使母鸡可以直接进入产蛋箱内,从而使母鸡对产蛋箱的接受率超过99％.     

冬季猪腹泻的临床症状以及几种防治措施

正近年来,猪流行性腹泻的发病率呈上升趋势,尤其是集约化猪场。猪流行性腹泻是由冠状病毒感染引起的。它是一种急性传染性肠道传染病。冬季猪生产中,腹泻对仔猪的影响较大,死亡率较高。即使猪有抵抗力,但还是避免不了会被感染,预防和控制仔猪腹泻是养猪场的难点。冬季腹泻的主要原因可能是"低温胁迫"。病猪的主要特征是严重腹泻、呕吐、严重脱水和身体消瘦。该病发病率高,死亡率高,严重危害养猪业的发展。因此,必须加强对疾病的日常预防和控制。作者根据     

大肠杆菌和绿脓杆菌混合感染引起的水貂出血性肺炎的鉴定

为了鉴定引起水貂发生出血性肺炎的病原体,试验采用病原分离鉴定、分离株16S rRNA扩增与序列分析、分离株对小鼠致病力试验、分离株血清分型鉴定、大肠杆菌H基因型鉴定、分离株药敏试验和分离株动物感染试验对来自山东省、辽宁省、河北省和黑龙江省的28份具有典型出血性肺炎症状死亡水貂的病料进行鉴定。结果表明:混合感染12例,单一病原菌感染16例,镜检可见短小的阴性杆菌和两端钝圆的阴性长杆菌; 16S rRNA扩增与序列分析共分离出22株绿脓杆菌和18株大肠杆菌,其中有4株对小鼠致死率达到50%以上,9株对小鼠致死率在10%～40%;从22株绿脓杆菌中共分离出8株G型、7株E型和7株D型,未检测出大肠杆菌血清型,大肠杆菌H基因型为H11;绿脓杆菌分离株对环丙沙星、妥布霉素、阿米卡星等6种药物敏感,大肠杆菌分离株对环丙沙星、妥布霉素、阿米卡星等10种药物均耐药;大肠杆菌和绿脓杆菌分离株均可导致水貂死亡并造成肺泡壁毛细血管瘀血、脾脏淋巴细胞数量减少、肺脏上皮细胞坏死、红髓内巨噬细胞数量增多等明显病理变化。说明目前引起水貂出血性肺炎的病原体已由传统的绿脓杆菌单一感染逐渐转变为大肠杆菌和绿脓杆菌的混合感染。     

牛瘤胃植物乳杆菌的分离鉴定与生物学特性分析

牛瘤胃中栖息着复杂多样的微生物,这些微生物种群一般会受饲粮、宿主基因型、健康状况、生活环境以及环境中的共生微生物之间的群体效应等的影响,进而又影响着饲料的利用率和牛群的健康,因此弄清牛瘤胃微生物群是十分必要的。利用厌养分离技术从成年牛瘤胃中分离出一株细菌,命名为Y-A-1。结合细菌形态学、生理生化特性和16Sr RNA序列同源性分析鉴定,结果表明Y-A-1菌株为植物乳杆菌。对该菌的生长特性包括最适生长温度、生长曲线、耐酸能力、耐盐等进行测定,结果表明菌株在30℃,pH 5.5~7.5范围内,盐离子浓度在7.5以下的环境中生长最好,该菌株的分离和生物特性研究对牛瘤胃微生物生存状态有了初步的了解,为进一步了解牛瘤胃微生物群奠定了一定的基础。     

牛分枝杆菌MPB70蛋白单克隆抗体的制备及检测

为了制备牛分枝杆菌的单克隆抗体,本试验利用制备的原核表达的牛分枝杆菌重要抗原蛋白MPB70作为免疫原皮下多点注射免疫BALB/c小鼠。利用细胞融合技术,经过5次亚克隆与筛选,取已免疫好的小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞在PEG3500的作用下进行细胞融合。筛选得到了2株分泌抗牛分枝杆菌MPB70蛋白的杂交瘤细胞,分别命名为Anti-B-MPB70:8和Anti-B-MPB70:12。采用间接ELISA方法对获得的单克隆抗体进行亲和常数检测、效价分析及亚类鉴定,通过SDS-PAGE凝胶试验对单克隆抗体进行纯度分析,并检测其浓度,通过Western blotting方法对单克隆抗体的反应特性进行鉴定。结果显示,纯化后的MPB70蛋白分子质量大小为20 ku,浓度为0.5 mg/mL。两株单克隆抗体的亲和常数分别为9.95×10~9和9.53×10~8;抗体效价分别为1∶102 400和1∶12 800;抗体亚类分别为IgG_(2b)和IgG_1,轻链类型均为κ型;纯度90%;浓度分别为3.0和2.2 mg/mL;且具有良好的反应特性。以上研究结果表明,本试验成功制备了抗MPB70蛋白单克隆抗体,可为牛结核病病原和抗体检测技术研究奠定基础。     

家禽饲喂器的选择

1建立完全个性化饲喂系统Valco公司推出的FuzeProline饲喂器,可以让用户混合使用和找到可互换使用的各种通用配件,从而定做适合用户特定家禽生产要求的饲喂系统(图1).(1)选择直径为33 cm(13 in)或13 in盘用13格的辐条栅或14 in盘用14格的辐条栅.另外14 in盘还可选用5格辐条栅.