Kisspeptin在牛卵巢颗粒细胞的表达及功能研究

为明确kisspeptin在牛卵巢颗粒细胞的表达和功能,本试验首先利用免疫荧光技术研究了kisspeptin在牛卵巢颗粒细胞的表达,随后利用MTT和ELISA技术研究了不同浓度的kisspeptin-10(Kp10)对牛卵巢颗粒细胞增殖和孕酮分泌的影响。结果表明,kisspeptin在牛卵巢颗粒细胞有表达,10、100、1 000nmol/L的Kp10处理24h,均可以极显著提高牛卵巢颗粒细胞活力(P0.01);100nmol/L的Kp10处理24、72h,可极显著提高牛卵巢颗粒细胞的活力(P0.01),但处理48h未能显著提高细胞活力(P0.05)。100nmol/L的Kp10处理24h,可显著提高牛卵巢颗粒细胞孕酮的分泌水平(P0.05),而10、1 000nmol/L的Kp10对孕酮分泌无显著影响(P0.05)。研究结果提示kisspeptin可促进牛卵巢颗粒细胞增殖和孕酮分泌。     

延边黄牛SREBP1和SCD1基因表达的发育性变化及与肌间脂肪含量的关联分析

文章旨在研究延边黄牛不同生长阶段固醇调节元件结合蛋白1(Sterol regulatory ele-ment binding factor 1,SREBP1)和硬脂酰辅酶A去饱和酶1(Stearoyl Co A desaturease 1,SCD1)基因表达的发育性变化与IMF含量的相关性以及这两个基因表达水平的关联性。试验选取12月龄的延边黄牛公牛(去势)8头,利用微量微创活体采样枪(韩国忠北大学提供),分别在12月龄,16月龄,20月龄,采集肌肉组织(臀肌);利用实时荧光定量PCR方法分析SREBP1和SCD1基因在延边黄牛不同生长阶段肌肉组织中的m RNA发育性变化。结果表明:1延边黄牛SREBP1基因相对表达水平在12、16、20月龄具有极其显著差异(P0.01),其中20月龄时SREBP1基因表达量相对最高;SCD1基因相对表达水平在12、16、20月龄具有显著差异(P0.05),其中20月龄时SCD1基因表达量相对最高。2肌肉组织中SREBP1基因的表达量在12~20月龄期间与IMF含量具有正向相关性,相关系数为0.910(P0.05);SCD1基因的表达量在12~20月龄期间与IMF含量具有正向相关性,相关系数为0.934(P0.05)。结果表明,SREBP1和SCD1基因在延边黄牛不同生长阶段存在显著或极显著差异,SREBP1和SCD1基因的协同表达对延边黄牛不同生长阶段肌内脂肪的沉积有一定的正向调控作用。     

东北林蛙卵油脂肪酸成分分析及其氧化稳定性研究

为研究林蛙卵油的脂肪酸成分、多不饱和脂肪酸的富集工艺及氧化稳定性,将提取得到的东北林蛙卵油中的脂肪酸进行GC-MS检测,对尿素包合法分离纯化多不饱和脂肪酸进行正交试验,并将林蛙卵油在不同条件下储存0,6,12,18,24,30 d,测定各组的过氧化值。结果表明:林蛙卵油中含有18种脂肪酸,不饱和脂肪酸总含量为76.76%,多不饱和脂肪酸含量为40.25%;多不饱和脂肪酸富集工艺的最优条件:脲脂比为2、包合温度为-20℃、包合时间为15 h;林蛙卵油在-20℃、避光条件下保存,过氧化值变化最小。     

海兰褐蛋鸡卵巢与输卵管ESR基因定量研究

为了研究海兰褐蛋鸡卵巢、输卵管漏斗部(以下简称漏斗部)与输卵管子宫部(以下简称子宫部)雌激素受体基因表达水平,试验采用荧光定量PCR技术检测蛋鸡的卵巢、漏斗部与子宫部的雌激素受体表达情况。结果表明:漏斗部组织ESR1 mRNA表达水平与其他两组相比差异极显著(P0.01);子宫部、卵巢组织ESR1 mRNA表达水平差异不显著(P0.05)。说明雌激素受体与漏斗部功能可能存在着密切的关系。     

大鼠β微管蛋白在大肠杆菌中的表达及其抗体制备

在获得重组质粒pMD-18T—BTUB的基础上，成功地构建了重组表达质粒pET-28a—BTUB，并将其转化入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中，经IPTG诱导表达，该诱导菌经SDS上样缓冲液进行处理后，SDS—PAGE电泳检测到相对分子质量约为14400的目的蛋白带，薄层扫描分析表明目的蛋白占总蛋白的41．8％。目的蛋白经透析袋电洗脱法纯化后，采用常规方法制备家兔多克隆抗体，ELISA检测表明此蛋白具有良好的抗原性。     

饲喂不同相对分子质量缩合单宁对延边黄牛蛋白质消化吸收的影响

试验选用3头年龄和体质量相近的、健康无病的且安装永久小肠瘘管的延边黄牛,采用3×3拉丁方设计,随机分成3组即对照组(A组)、大相对分子质量单宁组(B组)和小相对分子质量单宁组(C组)。A组饲喂基础日粮,B组饲喂基础日粮+2%大相对分子质量缩合单宁,C组饲喂基础日粮+2%小相对分子质量缩合单宁。在试验期内测定其消化道p H、消化道氮利用及十二指肠食糜氨基酸流量。结果表明:饲喂缩合单宁组的p H都显著升高(P0.05);消化道氮利用分析中,B组的粪氮和尿氮的含量都极显著低于A组(P0.01),B组的沉积氮与A和C组相比差异极显著(P0.01)。十二指肠食糜氨基酸流量分析中,添加缩合单宁显著增加其蛋氨酸(Met)、丙氨酸(Ala)、谷氨酸(Glu)、脯氨酸(Pro)和赖氨酸(Lys)的流量(P0.05),但是除Glu,不同相对分子质量间差异都不显著(P0.05),B组Glu流量显著高于其他组(P0.05)。     

脂滴的生物物理学和细胞生物学研究

最早对脂滴的研究可以追溯到19 世纪,Richard Altmann 和E.B. Wilson 都描述了细胞 中的脂肪滴,并推测了它们的起源(Altmann, 1890;威尔逊,1896)。早期,脂滴的高衍射特性为其 鉴定提供了便利的光学条件。20 世纪初,由于它们被认为是大多数细胞的组成部分,这种细胞 器被称为脂质体。然而,在20 世纪60 年代末,人造脂质体被发明出来,并很快取代了这个名 字。从那时起,这种细胞器被有过许多名称,包括脂滴、脂体、脂体、脂滴和脂质体。在植物中, 它们通常被称为油体。随着这一领域的迅速发展,它似乎已经定名为“脂滴”。几十年来,除了 形态学研究,脂滴的其他方面几乎没有受到关注。1991 年,脂肪细胞中与脂滴相关的磷酸蛋白 perilipin 的发现,引起人们对这种细胞器的新关注。从那时起,关于脂滴的论文数量急剧增加, 关于脂滴的功能也逐渐被重视起来。     

基于RNA-Seq数据分析环格列酮和胰岛素诱导延边黄牛前脂肪细胞分化的差异表达基因

试验旨在探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferators-activated receptors，PPARγ）激动因子（环格列酮）和胰岛素对延边黄牛前脂肪细胞脂质代谢的影响及可能的调控机制。试验分为对照组（CON，5% FBS）、胰岛素处理组（I组，5% FBS+10 mg/L胰岛素）、环格列酮处理组（C组，5% FBS+10 mg/L环格列酮）、胰岛素+环格列酮处理组（IC组，5% FBS+10 mg/L胰岛素+10 mg/L环格列酮）。各组处理144 h，通过RNA-Seq技术对其进行转录本测序，差异表达基因进行GO功能注释和KEGG富集分析。差异表达基因分析结果显示，与对照组相比，IC组差异表达基因数量为1 764个，比I和C组分别多276和569个，3个试验组间共有371个差异基因；IC组上调基因数量为974个，分别比I和C组多140和249个，IC组下调基因为790个，I和C组下调基因分别为654和470个。差异基因的GO分析表明，各处理组的差异基因参与了细胞过程、代谢过程以及生物过程的调节；在分子功能上，主要是分子功能调节剂、转运活性、转录调节活性等；在细胞成分上，大多数差异基因被富集到细胞器、细胞膜及胞外区等。KEGG通路分析发现，差异表达基因主要富集在FoxO、PPAR、TGF-β、p53等信号通路。综上所述，胰岛素和环格列酮单独处理与二者共同处理对延边黄牛前脂肪细胞分化的调控机制有所差别，其中二者共同处理对分化的促进作用更加明显。本研究结果为研究环格列酮与胰岛素在调节脂肪生成中的功能和分子机制提供了依据。     

应用超声检测仪及人用妊娠诊断盒对母熊早期妊娠诊断试验

早期妊娠诊断在母熊的繁殖规律的研究中是一个难题。母熊交配、受孕后，生理、行为、外观没有明显的变化。受孕后，受精卵一直游离到5个月左右开始附植，附植后生长发育时间短，为6～8周。腹围在临产前1个月左右才有增大，但也不甚明显。鉴于上述情况，我们采用MCD—Ⅰ型检测仪和妊娠诊断盒     

外源性激素对母熊发情受胎效果的研究

采用外源性激素调控母熊的发情效果比较明显，可提高受胎率，该法简便易行，成本低，经济效益显著，有推广实用价值。