小反刍兽疫的研究进展

本文阐述了小反刍兽疫的地理分布、病原学、流行病学、症状、诊断方法、疫苗的研制现状及与其他疾病的鉴别诊断．以便更好的防制本病。     

牛分枝杆菌胞浆特异蛋白质抗原的制备和检测

将牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)S_(10)株苏通培养基培养物经低温高速离心、超声波裂解、Sephadex G200柱层析,获得三个峰,制备了三种胞浆蛋白抗原,经以ELISA与牛分枝杆菌阳性牛血清、阴性血清及各种分枝杆菌高免牛血清检测、并与牛PPD、聚合OT等抗原作比较证明,以第二峰的胞浆蛋白抗原的特异性为最好。     

F一Ⅶ型鹅源禽副黏病毒的分离及其特性研究

从辽宁省某鹅场雏鹅体内分离到1株副黏病毒，该分离毒株具有血凝活性且血凝活性能被NDV标准阳性血清和鹅副黏病毒阳性血清所抑制，能使SPF鸡胚、非免疫鸭胚和鹅胚100％死亡；电镜观察见病毒颗粒呈多形性，多为圆形，有囊膜，直径200nm左右；ELD500为10^8.6／mL，MDT为56h，ICPI为1．94。通过RT—PCR扩增出F基因，鉴定为基因Ⅶ型强毒株，测序结果为HBS209，与CH2000的同源率为91．8％，从而确定分离毒株属于禽副黏病毒Ⅰ型(APMV—Ⅰ)的基因变异强毒株。动物接种试验表明，该毒株对鸭无致病性，对鹅、鸡、鸽的致病率和致死率均达100％。     

猪伪狂犬病病毒LA株的分离鉴定

从辽宁省某猪场大批死亡的新生仔猪脑及内脏中分离到多株病毒 ,通过初步验证后选择其中一代表毒株进行了鉴定。该病毒株在PK -1 5细胞上连续传 1 2代均出现典型的细胞病变 ,用适应PK -1 5细胞的病毒接种Vero细胞、猪肾传代细胞IBRS -2及SPF鸡胚成纤维细胞均出现典型的细胞病变。在电镜下可见到典型的伪狂犬病病毒粒子。该病毒对氯仿、乙醚敏感 ,在pH5 0～ 9 0下稳定 ,5 6℃ 3 0分钟即可灭活该病毒。该病毒能被伪狂犬病病毒标准阳性血清中和。取处理后的病料上清液和传代病毒接种家兔均出现典型的伪狂犬病症状。用所分离病毒提取的DNA及培养病毒液经简单的预处理后作为模板 ,应用特异性引物进行PCR能扩增出伪狂犬病病毒 1 2 40bp的gD基因的特异性片段。结果表明 ,所分离病毒为伪狂犬病病毒 ,并将该毒株命名为猪伪狂犬病病毒LA株。     

鸡大肠杆菌中草药佐剂多价灭活苗的研究

选用免疫原性良好的鸡致病性大肠埃希氏菌（Ｅ．Ｃｏｌｉ）菌株，以发酵罐深层培养，其菌液可甲醛溶液灭活后，加入药佐剂制成Ｅ．Ｃｏｌｉ中草药佐剂多价灭活疫苗，通过实验室检测和现场应用证明具有良好的物理稳定性和安全性，免疫后１～３个月保护率为１００％，３～６个月为９５％～９８％。     

仔猪大肠杆菌K88ac-ST1-LTB三价基因工程灭活苗的研究Ⅱ.安全性试验和最小免疫剂量的测定

由产肠毒素性大肠杆菌引起的新生仔猪黄、白痢 ,在我国乃至世界许多国家的广大养猪地区流行十分严重 ,有较高的发病率和死亡率 ,即使是病愈存活的仔猪 ,其生长发育和生产性能也会受到严重的影响 ,给养猪业造成了巨大的经济损失。仔猪黄、白痢的药物治疗不但价格昂贵、费工费力 ,而且效果不好 ,更因致病菌的抗药菌株日趋增多 ,用药往往无效 ,因而免疫预防是控制这类疫病的最佳选择[1,2 ] 。我们在原来研究ＳＴ1-ＬＴＢ 双价基因工程灭活苗的基础上[3 ] ,进一步利用基因工程技术将大肠杆菌菌毛Ｋ88ａｃ抗原基因与肠毒素ＳＴ1突变基因和ＬＴＢ …     

表达大肠杆菌K88ac-ST1-LTB融合蛋白工程菌株的免疫原性研究

已构建的能表达大肠杆菌K88ac-ST1-LTB融合蛋白的工程菌株BL21（DE3）（pXKST3LT5)及其表达产物经动物试验证实没有毒性反应。用从IPTG诱导的工程菌中提取的包涵体或经甲醛灭活的工程菌制成抗原，免疫小鼠，结果免疫小鼠至少能抵抗2MLD的大肠杆菌强毒株C83902（K88ac,ST^ ,L^ )的攻击，用提取的包涵体免疫家兔后，采集的血清能够中和天然ST1的毒性，这表明构建的工程菌株BL21（DE3）（pXKST3LT5)可以作为预防幼畜大肠杆菌性腹泻基因工程菌苗的候选株。     

马立克氏病疫苗保护与免疫增强复合剂的研究

本项研究通过科学组方 ,成功地研制出了鸡马立克氏病疫苗保护与免疫增强复合剂。用该复合剂稀释鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒活疫苗 (HVT)较原稀释液 (SPG)能提高活疫苗效价 3 0 %以上 ;与马立克氏病火鸡疱疹病毒活疫苗同时免疫 1日龄雏鸡能显著提高免疫鸡的细胞免疫水平 (T淋巴细胞数 ,P <0 0 1 )和体液免疫水平 (B淋巴细胞数、血清中和抗体水平 ,P <0 0 5 ) ,提高免疫接种鸡的攻毒保护率 (P <0 0 5 )。     

应用致敏SPA菌体提高CAV/CPV PCR检出率的研究

为消除粪便等病料中的PCR干扰物质 ,提高犬腺病毒与细小病毒 (CAV CPV)联合PCR检出率。根据免疫吸附的原理 ,应用CAV CPV高免血清致敏含A蛋白的金黄色葡萄球菌 ,制成致敏SPA菌体免疫吸附剂 ;以此免疫吸附提取粪便等病料中的CAV/CPV ,然后直接或经 3 5mol/LMgCl2 将所吸附病毒洗脱后再做PCR。结果 8份经电镜负染或HA/HI试验验证为阳性的粪便样品 ,如此处理后进行PCR检测 ,结果均为阳性 ;而直接取粪便离心后用上清进行PCR检测 ,结果均为阴性。表明该法可有效去除待检样品中的PCR干扰物质 ,提高PCR的检出率。