转天麻抗真菌蛋白基因彩色棉新品系抗枯黄萎病研究

将天麻抗真菌蛋白基因(Gastrodia Antifargal Protein，GAFP)用花粉管通道法转化天然彩色棉主栽品种和高代系，转化后代经卡那霉素初筛、分子检测、综合农艺性状选择，获得整合了GAFP的彩色棉花新品系。对其进行了室内抗枯萎病性鉴定和田间人工病圃抗黄萎病性鉴定。结果表明：彩B5—8相对病指4．93，为高抗枯萎病类型，彩B5—3相对病指7．75、彩B5—9相对病指8．09，为抗枯萎病类型；彩B5—7枯萎病、黄萎病相对病指分别为9．95和19．13，既抗枯萎病又抗黄萎病，是一个兼抗类型，彩B5—2相对病指19．69为抗黄萎病类型。     

转NDR1基因烟草对赤星病和晚疫病的抗性增强

 NDR1(nonrace-specific disease resistance)基因在植物系统获得性抗性的信号传导途径中起着重要的作用,过量表达该基因的拟南芥对不同病原菌的抗性都有提高。利用PCR技术首次克隆了拟南芥Wassilewskija生态型的NDR1基因,与Columbia生态型相比,该基因共有7处碱基不同,引起编码氨基酸变化4处。构建了植物高效表达载体,利用农杆菌介导法转化烟草,经PCR和Southern鉴定,外源基因已整合到植物基因组中。随机挑选10个转基因株系进行抗病性分析,其中3个株系对赤星病和晚疫病的抗性明显增强。     

转基因抗虫彩色棉对棉蚜抗性的初步鉴定

将已获得的抗棉铃虫、蚜虫转基因 (Bt GNA)彩色棉纯合品 (株 )系进行了棉蚜抗性评价 ,包括罩笼接蚜试验和田间自然感蚜。结果表明 ,在天彩科技园 ,罩笼内抗虫转基因彩色棉蚜害指数减退率分别比受体对照品种减少 2 1 7%～ 30 43%,蚜体变小 ,蚜重减轻 ;罩笼外有蚜株率和卷叶株率比对照略有下降 ,蚜害指数减退率在 - 1 4 2 9%～ 5 4 1 6%之间。在卡尔墩彩色棉试验基地 ,在罩笼内抗虫转基因彩色棉蚜害指数减退率为 - 33 33%～ 5 8 34%;罩笼外有蚜株率和卷叶株率比对照略有下降 ,蚜害指数减退率在 - 2 7 76%～ 40 0 0 %之间。不同品种间棉蚜抗性有差异。     

新疆陆地棉抗病转基因棉花的初步筛选

通过花粉管通道法将天麻抗真菌蛋白基因导入新疆陆地棉3个品种(系),经过标记基因阳性试验和病圃生物学检测,得到初步的筛选结果.     

新疆彩色棉抗病转基因植株的病圃筛选

将用天麻抗真菌蛋白基因(GAFP)转化的天然彩色棉(棕色、绿色)R0代种子种植在黄、枯萎病混生的病圃中.根据标记基因的不同,分别用卡那霉素和除草剂(Basta)对9个筛选材料的R1代1.9253×104株进行了筛选,入选133株.入选的133个植株经过四次抗病性鉴定、筛选,获得了抗病植株16株.进一步进行分子检测,转化植株出现了杂交信号,证明了抗病基因的整合和表达.同时也说明了病圃鉴定是正确的.     

用基因枪法转化新疆陆地棉新陆早4号

报道了用基因枪轰击转化方法将兔防御素基因NP-1导入新疆陆地棉栽培品种新陆早4号的转化培养过程,在诱导继代分化过程中对不同培养基进行了比较,发现对于该品种经A1→A3→K3→K10培养过程得到了转化芽的形成.     

新疆甜瓜、西瓜原生质体融合及融合愈伤的获得

分别用碘乙酸脂（ＩＯＡ）与若丹明染料（Ｒ６Ｇ）处理纯化的新疆甜瓜（ＣｕｃｕｍｉｓｍｅｌｏＬ．）和西瓜（Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓｖｕｌｇａｒｉｃ）无菌苗子叶叶肉原生质体，ＰＥＧ介导，高Ｃａ２＋－ｐＨ条件下融合，得到了远缘属间体细胞杂种，用含Ｐ５培养基的琼脂糖珠包理杂种细胞并培养，获得了融合愈伤。     

转GAFP基因对彩色棉性状的影响

新疆天然彩色棉花研究所和中科院遗传与发育生物学研究所通过合作,将天麻抗真菌蛋白基因(GAFP)导入了彩色棉主栽品种“新彩棉1号”,在提高彩色棉对枯、黄萎病的抗性上取得了显著效果,并已成功地获得了抗枯、黄萎病转基因彩棉新品系。由于外源基因的导入也可能打破棉花受体品种自身固有的基因连锁群和遗传结构,除了能达到对某些性状改良目的,同时也可能对受体品种的其它性状产生了一些预料之外的影响。近两年来作者对转GAFP基因彩色棉抗病品系与受体品种在主要的农艺性状、经济性状及纤维品质方面进行了对比研究,对试验研究的结果进行报…     

甜瓜抗CMV转基因植株的分子生物学研究

本研究建立了转目的基因植物基因整台及表达的分子生物学鉴定系统，并用报告基因检测、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ特异扩增、Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ等方法，研究了用叶盘法经Ｔｉ质粒转化的甜瓜再生植株ＣＭＶ－ＣＰ基因的整合与表达。结果表明：再生植株基因组中整合了ＣＭＶ－ＣＰ基因，长度为１ｋｂ，并能有效表达。表达产物分子量为２４Ｋｄ，确为ＣＭＶ的外壳蛋白，其表达量占细胞总蛋白约５％。