甜瓜抗CMV转基因植株的分子生物学研究

本研究建立了转目的基因植物基因整台及表达的分子生物学鉴定系统，并用报告基因检测、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ特异扩增、Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ等方法，研究了用叶盘法经Ｔｉ质粒转化的甜瓜再生植株ＣＭＶ－ＣＰ基因的整合与表达。结果表明：再生植株基因组中整合了ＣＭＶ－ＣＰ基因，长度为１ｋｂ，并能有效表达。表达产物分子量为２４Ｋｄ，确为ＣＭＶ的外壳蛋白，其表达量占细胞总蛋白约５％。     

新疆甜瓜、西瓜原生质体融合及融合愈伤的获得

分别用碘乙酸脂（ＩＯＡ）与若丹明染料（Ｒ６Ｇ）处理纯化的新疆甜瓜（ＣｕｃｕｍｉｓｍｅｌｏＬ．）和西瓜（Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓｖｕｌｇａｒｉｃ）无菌苗子叶叶肉原生质体，ＰＥＧ介导，高Ｃａ２＋－ｐＨ条件下融合，得到了远缘属间体细胞杂种，用含Ｐ５培养基的琼脂糖珠包理杂种细胞并培养，获得了融合愈伤。     

新疆长绒棉胚性悬浮细胞原生质体培养

新疆长绒棉胚性悬浮细胞原生质体培养＠李仁敬＠孟庆玉＠李淑君＠孙严岳＠建雄￥新疆农科院核技术生物技术研究所￥山西农科院棉花所新疆长绒棉胚性悬浮细胞原生质体培养李仁敬孟庆玉李淑君①孙严岳建雄①新疆农科院核技术生物技术研究所８３００００新疆是我国长绒棉的唯一产...     

农业部西北农作物细胞工程重点开放实验室

研究方向新疆特产作物棉花、哈密瓜、甜菜、小麦等抗性细胞工程育种方法、技术研究及应用.用细胞工程方法将抗(病、虫等)性基因导入引渗到上述作物优良栽培品种,对其进行改造,创造新种质,培育高产优质、抗逆新品种(系).研究内容新疆陆地棉抗枯、黄萎病的细胞工程育种,抗病棉花的培育;新疆陆地棉抗棉蚜、棉铃虫、棉叶螨等害虫的细胞工程育种,抗虫棉花的培育;新疆哈密瓜抗疫霉病、霜霉病的细胞工程育种,抗病哈密瓜的培育;新疆甜菜抗丛根病的细胞工程育种,抗病甜菜的培育;小麦外源基固、大赖草DNA转化技术,创造超大穗特殊小麦种质.     

新疆彩色棉体细胞胚状体的发生及植株再生

以彩色棉栽培品种“新彩 3号”、“新彩 4号”等无菌苗下胚轴为诱导材料进行了组织培养 ,研究了不同基因型及诱导培养基中添加多种激素 2 ,4-D、NAA、IAA、ZT与 KT组合时 ,对愈伤组织诱导及体细胞胚胎发生的影响。实验结果表明在培养基中 2 ,4- D0 .0 5～ 0 .1 mg·L-1,KT0 .1～ 0 .2 mg· L-1时诱导效果最佳 ,产生了颗粒状、分散性好、淡黄色的胚性愈伤 ,胚性愈伤经分化培养基继代 2～ 3次后获得萌发胚 ,萌发胚在生根培养基培养数日后 ,形成了根、子叶、真叶完整的再生植株。并且不同基因型品种愈伤组织和胚胎发生能力表现有所差异。这是国内首次报道利用体细胞胚胎发生获得彩色棉再生植株。     

转抗虫基因彩色棉的获得

彩色棉以其绿色环保特性，深受人们的喜爱，但彩色棉的抗虫性差将影响到彩色棉品种的大面积种植推广，因此选育抗虫新品种，具有重要的意义。本研究采用改造的全长雪花莲凝集素基因GNAmm与合成的带有分泌信号肽编码序列的Bt crylAc基因，分别与韧皮部特异表达启动子SPP2P和组成型     

海岛棉子叶原生质体游离和再生愈伤的获得

对１０个海岛棉品种的子叶进行了原生质体的游离和培养。培养３～５天的无菌苗子叶经１２～１６小时的酶解，获得了一定数量的原生质体。不同的酶液浓度组成对原生质体的产量有较大的影响。纯化的原生质体在修改的Ｋ３培养基上进行培养，３～５天后再生细胞开始分裂，２个星期后形成小细胞团，ｌ个月后获得了小愈伤组织。     

通过根癌农杆菌介导法获得新疆甜瓜抗病优质新品系

用新疆甜瓜无菌苗子叶块,通过根癌农杆菌介导法,将黄瓜花叶病毒外壳蛋白ｃＤＮＡ基因导入“新红心脆”等６个品种（系）,经卡那霉素筛选,获得大量Ｋｍ抗性植株,其中部分Ｋｍ抗性植株经Ｌｕｉｓ法检测,表达了胭脂碱合成酶活性。进一步经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ,ＤＯＴ－Ｅｌｉｓａ,ＰＣＲ特异扩增。Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ等方法检测,结果证明了Ｋｍ抗性植株基因组中整合了ＣＭＶ－ＣＰ基因,长度为１ｋｂ,并能有效表达,表达产     

转天麻抗真菌蛋白基因彩色棉新品系抗枯黄萎病研究

将天麻抗真菌蛋白基因(Gastrodia Antifargal Protein ,GAFP)用花粉管通道法转化天然彩色棉主栽品种和高代系,转化后代经卡那霉素初筛、分子检测、综合农艺性状选择,获得整合了GAFP的彩色棉花新品系.对其进行了室内抗枯萎病性鉴定和田间人工病圃抗黄萎病性鉴定.结果表明:彩B5-8相对病指4.93,为高抗枯萎病类型,彩B5-3相对病指7.75、彩B5-9相对病指8.09,为抗枯萎病类型;彩B5-7枯萎病、黄萎病相对病指分别为9.95和19.13,既抗枯萎病又抗黄萎病,是一个兼抗类型,彩B5-2相对病指19.69为抗黄萎病类型.     

紫花苜蓿组织培养及其再生植株

以SH为基本培养基,分别添加NAA 0.5～3 mg/l;KT0.1～1.0 mg/l的激素,对紫花苜蓿无菌苗子叶和下胚轴进行离体培养,所产生的愈伤组织可在原诱导培养基上直接分化出芽,其中下胚轴愈伤组织的平均诱导频率,分化频率均高于子叶.