鸡miR-125b的组织发育性变化及其功能预测分析

为了解miR-125b的进化历史和潜在的生物学功能,下载不同物种miR-125b前体序列,运用Clustal W2软件进行多序列比对,构建系统进化树,q PCR方法检测固始鸡不同组织中miR-125b表达量的发育性变化,通过Targetscan 7.0与miRDB数据库对miR-125b靶基因进行预测、DAVID数据库对预测的靶基因进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果显示:不同物种之间miR-125b具有很高的保守性;在胚胎期下丘脑中,随着胚胎发育,miR-125b的表达量逐渐增加,出壳后又呈现逐渐降低的趋势,到36周龄表达量又显著升高;在成年期消化器官(肌胃、腺胃、小肠、肝脏)中也具有较高的表达量;经预测,miR-125b靶基因有920个,富集于组织发育、生物调节、基因表达的转录后调节、小RNA的生物学加工等生物过程和细胞外基质受体相互作用、调节肌动蛋白细胞骨架、MAPK信号通路、胰岛素信号通路、不饱和脂肪酸的生物合成和NOD样受体信号等通路。结果表明:鸡miR-125b为广泛性时序表达miRNA,可能参与鸡胚胎期及出壳后生长发育相关的诸多生物学过程的调控。     

捻转血矛线虫肌动蛋白基因的克隆与表达及其DNA疫苗的构建

根据秀丽新杆线虫等其他几种线虫的肌动蛋白(Actin)开放阅读框(ORF)设计简并引物,以捻转血矛线虫总RNA为模板,合成cDNA,用RT-PCR方法扩增出约为1 100 bp的DNA片段。将该片段克隆到T载体后进行序列测定和分析,结果表明该基因的ORF为1 131 bp,与秀丽新杆线虫、新杆状线虫、肿孔古柏线虫等的同源性高达86%以上,推导出其蛋白质序列含有376个氨基酸,与胎生网尾线虫、秀丽新杆线虫、新杆状线虫、马来丝虫等的肌动蛋白相似性均为98%以上,说明成功克隆了捻转血矛线虫actin基因。将捻转血矛线虫肌动蛋白基因的ORF克隆到pET-28a(+)中,构建了原核表达载体,用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE分析发现,该基因获得了表达,且以包涵体的形式存在,融合蛋白相对分子质量约46×103。以此重组蛋白为抗原,用自然感染捻转血矛线虫山羊血清为第一抗体进行Western blot分析,结果出现1条特异性条带,表明捻转血矛线虫Actin蛋白在自然感染过程中能被宿主的免疫系统识别,可能是一种天然抗原。用纯化重组Actin蛋白免疫小鼠,制备抗血清,以该血清为第一抗体进行Western blot,结果发现该血清能识别捻转血矛线虫成虫蛋白谱中相对分子质量约为42×103的蛋白条带。将捻转血矛线虫actin基因亚克隆到真核表达载体pVAX1中,构建了DNA疫苗pVAX1-ACT,动物免疫试验结果表明该DNA疫苗在机体内获得了表达。     

γ-氨基丁酸对鲫鱼运输应激后血液生化指标的影响

为了研究γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)对鲫鱼运输应激的缓解作用,将150条鲫鱼分为5组,分别为空白对照组、试验对照组、GABA 25 mg/L添加组、GABA 50 mg/L添加组、GABA l00mg/L添加组,每组3次重复,运输前和运输2h后每组每个重复取2条鱼尾静脉采血,分离血清,测定皮质醇含量和血清生化指标.结果表明,运输应激可导致鲫鱼血清皮质醇、葡萄糖、碱性磷酸酶、总蛋白、K+等指标含量显著升高,而添加GABA对这些指标的上升水平均有显著的缓解作用.因此,GABA能够缓解应激引起的鱼类机体损伤,从而起到抗运输应激的作用.     

芽孢杆菌的筛选及其在豆粕发酵中的应用

筛选出耐酸耐胆盐且产蛋白酶、淀粉酶性能较好的优势芽孢杆菌菌株,以期制备高效复合益生素或应用于豆粕发酵。首先,对分离并镜检出的17株菌株进行耐酸耐胆盐特性初筛,而后对筛出的3株菌株进行耐酸耐胆盐梯度复筛,随后检测其发酵豆粕的蛋白酶和淀粉酶活性以及对抗原蛋白的降解能力。最后通过16SrRNA扩增比对鉴定筛选的菌种,进而通过MEGA4.0构建系统进化树进行分析。成功筛选出1株耐酸耐胆盐、产蛋白酶和淀粉酶,且能高效降解豆粕抗原蛋白的解淀粉芽孢杆菌B9。     

“豫粉1号”配套系商品代蛋鸡产蛋率曲线拟合及蛋品质分析

为探索"豫粉1号"商品代的产蛋性能和蛋品质等生产特性的变化规律,采用Wood模型、杨宁模型和McMillan模型对产蛋率曲线进行拟合分析;并对32、36、40周蛋品质进行分析。结果显示,3种模型的非线性方程为：Wood模型：y_t=0.327×2.2t×e^－0.067t;McMillan模型：y_t=159.19×（1－e^{－0.199×（t－17.612）}）×e^－0.019t;杨宁模型：y_t=0.284×e^－0.284t/（1+e^{－0.302×（t－20.779）}）,拟合度分别为0.885、0.987和0.991。与实际生产数据相比,杨宁模型拟合值与观测值最为接近,拟合效果最佳。蛋品质分析结果显示,"豫粉1号"商品代蛋品质的哈氏单位达到82.61,为AA级;蛋壳强度达到4.77 kg/m²,具有较高的强度;蛋黄颜色为8.72,色泽比普通鸡蛋深。在实际生产中可以利用杨宁模型对该品系产蛋率的变化规律进行估计与预测,为地方蛋鸡新品系的育种及管理提供参考,蛋品质可在后期配套系运用中进行优化。     

动物组织学与胚胎学课程教学体会

动物组织学与胚胎学是高等农业院校动物医学和动物科学专业的一门必修专业基础课。从教学观念、教学内容、教学方法等方面就动物组织学与胚胎学的教学展开阐述,以为该课程的教学提供借鉴。     

鸡白细胞介素-2的研究进展及应用前景

鸡白细胞介素-2(IL-2)是由激活的T细胞分泌产生的糖蛋白,是鸡体内一类重要的细胞因子,在机体的免疫应答中起重要作用。近年来,随着鸡的IL-2基因克隆成功,使鸡的IL-2研究及应用得到了一定的发展,同时作为免疫增强剂和构建新型基因工程疫苗呈现出一定的应用前景。     

鸡miR-124a-3p的组织表达谱及其与ACAA2基因的互作关系

鸡(Gallus gallus)miR-124a-3p与乙酰辅酶A酰基转移酶2基因(acetyl-CoA acyltransferase 2 gene,ACAA2)间存在潜在的互作关系。但目前对鸡miR-124a-3p的功能及其与ACAA2的靶作用关系了解还很少。本研究整合了组织表达谱和靶基因预测结果,分析鸡miR-124a-3p的潜在生物学功能,并验证了其与ACAA2的靶向关系。qRT-PCR结果显示,miR-124a-3p在所检测的鸡4个发育阶段13种组织中均表达,尤其是在下丘脑中高丰度特异性表达。生物信息学分析显示,miR-124a-3p预测靶基因在脂类转运、神经元迁移调控、脂肪细胞因子信号通路、轴突导向等生物学过程和通路中富集。关联分析表明,miR-124a-3p和ACAA2在胸肌、肝脏和皮下脂肪组织中的表达呈负相关。在鸡成纤维细胞中转染miR-124a-3p模拟物(miR-124a-3p mimics)可显著抑制荧光素酶活性和ACAA2的表达,表明鸡miR-124a-3p为一广泛性表达miRNA,且呈明显的时序表达,并通过靶作用于ACAA2参与多种脂类代谢相关生物学过程调控。本研究数据为进一步研究鸡miR-124a-3p功能和揭示鸡脂肪沉积相关性状形成机制提供了资料。     

淅川乌骨鸡与黄胫丝毛鸡、青胫隐性白羽鸡杂交F1 代的生长性能和胴体品质测定

以淅川乌骨鸡♂×黄胫丝毛鸡♀、淅川乌骨鸡♂×青胫隐性白羽鸡♀和淅川乌骨鸡纯繁组F_1代为研究对象,对其体重、体斜长、龙骨长、胫围、胫长、胸宽、胸深等生长性状和半净膛重、全净膛重、腹脂重、胸肌重、腿肌重、肌间脂带宽、皮脂厚及胸肌、腿肌剪切力、滴水损失、p H值等屠宰性状和肉品质进行测定和分析。结果表明,两个杂交组F_1代生长性状、屠宰性能和胴体品质均优于纯繁组,生长性状和屠宰性能方面淅川乌骨鸡与黄胫丝毛鸡杂交组最优,肉品质方面尤其是肌纤维性状方面淅川乌骨鸡与青胫隐性白羽鸡杂交组最优。总的来说通过杂交淅川乌骨鸡的各方面性能得到了提升。     

外源皮质酮对雏鸡法氏囊microRNA表达的影响

MicroRNA(miRNA)是在真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码小RNA,在鸡的许多生物学功能中发挥重要作用,但在鸡的应激性免疫抑制的分子调控机制中尚不完全清楚。本试验通过在日粮中添加外源皮质酮激素,构建雏鸡应激性免疫抑制模型,高通量Solexa测序技术建立雏鸡法氏囊差异miRNA表达谱,共鉴定出77个差异表达的miRNAs,34个上调,43个下调,生物学分析预测差异表达miRNA的靶基因有282个,对这些预测的靶基因进行GO和KEGG通路富集分析,结果显示这些通路主要富集到心肌收缩、精氨酸和脯氨酸代谢、RNA聚合酶、肾素-血管紧张素系统。试验结果为揭示家禽应激性免疫抑制转录后分子调控机制提供了依据。