绵羊卵巢oar-mir-150靶向调节类固醇激素合成急性调节蛋白基因的表达

为研究吐鲁番黑羊(Ovis aries)的繁殖调控,培育新的高繁殖力绵羊品种,本研究以吐鲁番黑羊卵泡期和黄体期显著差异表达的绵羊微小RNA150(Ovis aries microRNA150,oar-mir-150)为研究对象,利用生物信息学预测oar-mir-150的靶基因,应用qRT-PCR检测吐鲁番黑羊卵泡期和黄体期卵巢组织中oarmir-150和类固醇激素合成急性调节蛋白基因(steroidogenic acute regulatory protein gene,STAR)的表达水平,合成野生型、突变型和缺失型STAR基因碱基序列,退火扩增后与PGL3-control载体连接,构建荧光素酶报告基因重组载体,将绵羊oar-mir-150 mimic或negative control mimic与重组载体共转到293T细胞,利用双荧光素酶活性检测实验检测荧光素酶活性。结果表明,oar-mir-150的全部靶基因有540个,其中卵泡期与黄体期差异表达的靶基因有8个,STAR基因作为卵泡期较黄体期表达显著上调的靶基因其mRNA的3'非翻译区(3'untranslated region,3'UTR)存在oar-mir-150靶标结合位点(UUGGGAG);相对定量结果显示:卵泡期与黄体期相比,吐鲁番黑羊卵巢组织中oar-mir-150相对表达量为0.73,显著下调(P0.05),STAR mRNA相对表达量为1.90,显著上调(P0.05);成功构建野生型、突变型和缺失型荧光素酶报告基因重组载体,并以最佳转染效率和最佳转染比例进行转染;双荧光素酶活性检测结果表明oar-mir-150靶向负调控STAR的表达。研究证明了oar-mir-150与STAR间存在确切的靶向关系,且负调控STAR基因的表达,为研究微小RNA(microRNA,mi RNA)在发情周期的不同阶段调控吐鲁番黑羊繁殖过程提供理论依据。     

Rho激酶抑制剂Y-27632对小鼠早期胚胎发育的影响

[目的]研究Rho激酶特异抑制剂Y-27632对小鼠早期胚胎发育的影响。[方法]取小鼠早期胚胎2细-胞,经体外培养1~2 d后,进行细胞计数、受体移植,观测Rho激酶抑制剂Y-27632对细胞数目和胚胎着床效率的影响。[结果]早期胚胎经Y-27632处理后,胚胎发育延迟,囊胚出腔脱带时间推后,试验组胚胎桑椹胚、囊胚发育率同对照组差异不显著（P〉0.05）,与同期胚胎相比细胞数目增加,差异显著（P〈0.05）,着床效率相当。[结论]Rho激酶特异抑制剂Y-27632对小鼠早期胚胎细胞数目增加和延迟着床具有重要作用。     

小鼠胚胎干细胞密度梯度离心去核法

在细胞松弛素B的参与下，通过Ficoll密度梯度离心法可有效制备小鼠无核ES细胞，在适宜条件下，悬液培养中40％的小鼠ES细胞可发生去核作用，经Hoechst染色和形态观察确定：80％的去核ES细胞在30min内可恢复其原有形态，但其生活力不会超过48h，这为研究ES细胞的胞质功能及核质互作效应提供了一种可行的细胞去核方法。     

绒山羊结构基因标记座位与经济性状关系的研究

通过对127只辽宁绒山羊血液蛋白质座位与经济性状的遗传关系分析，结果表明：PA-32-2型在产绒量和体重两方面的LSE都显著的大于其他基因型，而且PA-3座位的选择反应最大，可以作为多性状标记辅助选择时的标记基因型。其次TfAB型、ESDBB型可作为产绒量的标记基因型，LAPAB型可作为体重的标记基因型。     

林芝猪血液蛋白多型性研究

采用水平板淀粉凝胶电泳法检测了林芝猪19个血液蛋白座位的多型性,计算了基因频率及其估计误差以及估计值的可靠性和精确度,结果表明：林芝猪在Pa,Tf,Am,Hp,6PGD,CEs,Ca,Cp8个座位表现多型,分别由2,3,4,4,3,3,2,3个等位基因支配,其中CEs^c和Cp^x基因为首次发现。     

新遗传资源西藏瘤牛生态形态特征的研究

 从体尺 ,形态及生态特征 3方面对阿沛甲咂牛 (APJ)、日喀则高峰牛 (LKZ)、樟木牛 (ZMN) 3个瘤牛群体及拉萨黄牛 (LSN)、文山牛 (WSN)、西双版纳牛 (XSB) 3个参照群体进行了多元统计分析 ,结果表明 ,西藏瘤牛具多样化生态类型 ;主成分分析提示选取前 2个特征值作为 2个主成分 (占总信息量的 88.15 % ) ;根据各群体前 2个主成分值计算相似系数并籍此进行聚类分析 ,西藏 3个瘤牛群体与云南 2个瘤牛群体呈交替聚类 ,而拉萨黄牛独立于这 5个群体之外。证实西藏高寒地区存在瘤牛群体 ,并提示西藏瘤牛与云南瘤牛间存在共同血统来源的可能性。     

干细胞及其在人类医学上的应用前景

干细胞是指从胚胎、胎儿或成年个体各种组织中分离出来的多能性细胞 ,具有体外保持未分化状态的无限增殖能力 ,在不同条件下可诱导分化为不同的细胞类型、组织甚至器官。胚胎癌细胞、胚胎干细胞、胚胎生殖细胞和成年组织干细胞是目前研究的几类主要干细胞 ,它们除作为发育生物学研究的细胞模型外 ,在人类医学领域也具有潜在的应用价值     

应用血清LDH同工酶对宁强矮马亲缘关系的分析

检测宁强矮马和中型马血清,用聚丙烯酰胺凝胶电泳,一般可获5条LDH同工酶酶带。薄层自动扫描仪扫描、计算酶谱曲线活力区带的百分含量,经t检验差异均不显著(P>0.05)。将5个马种血清LDH同工酶活力区带百分含量,采用标准化欧氏平方距离的最小非类似值,以最短距离法聚类,西南马系统的4个马种在4.0197值时聚为一类(宁强矮马和中型马为0.2296,建昌马和安宁果下马为3.2315),而伊吾马在13.659值时才与西南马聚为一类。     

应激引发线粒体功能障碍的研究进展

随着人类生活环境的改变和生活节奏的加快,以及家畜饲养环境和养殖模式的改变,人类和家畜会频繁地遭受各种来源的不同程度应激,使机体发生生理或病理性变化。线粒体是对机体各种损伤最为敏感的细胞器之一,当机体或细胞受到应激时会造成线粒体功能紊乱或障碍。文章重点阐述了应激通过影响线粒体的形态结构与胞内分布、分裂融合平衡、ATP的合成及内部线粒体凋亡途径,进而影响细胞的分裂增殖、新陈代谢和程序性死亡(凋亡)的研究进展。