应用血清LDH同工酶对宁强矮马亲缘关系的分析

检测宁强矮马和中型马血清，用聚丙烯酰胺凝胶电泳，一般可获５条ＬＤＨ同工酶酶带。层自动扫描仪扫描、计算酶谱曲线活力区０带的百分含量，经ｔ检验差异均不显著（Ｐ＞０．０５）。将５个马种血清ＬＤＨ同工酶活力区带百分含量，采用标准化欧氏平方距离的最小非类似值，以最短距离法聚类，西南马系统的４个马种在４．０１９７值时聚为一类（宁强矮马和中型为０．２２９６，建昌马和安宁果下马为３．２３１５），而伊吾马在１３．６     

宁强矮马生长激素基因（GH）的遗传变异分析

 【目的】通过分析不同动物和中国几个地方马种生长激素基因序列,为宁强矮马起源和矮化形成机制的研究提供分子水平的试验依据。【方法】通过PCR扩增宁强矮马生长激素基因并进行测序,用DNAMAN软件对不同动物的生长激素基因序列进行比对分析。【结果】马品种间29个位点发生遗传变异,编码区11个位点发现遗传多态现象。以蒙古马生长激素氨基酸序列为标准,宁强矮马仅在1 765位点的变异导致氨基酸发生改变。以生长激素的mRNA序列为基本数据进行聚类分析,宁强矮马和德保马67的同源性为100%,与百色马的同源性为99.8%,与蒙古马的同源性为99.7%。【结论】马属动物生长基因序列与猪和狗的同源性较高,宁强矮马1 765位的G→A可能影响到宁强矮马的生长发育。     

两个西南马种GHR基因第10外显子SSCP分析

通过PCR-SSCP检测10匹宁强矮马和12匹贵州马GHR基因第10外显子的多态性分析,结果表明,宁强矮马和贵州马GHR基因外显子10的第2和第4区域的保守性较高,基因多样性相对较低,第1和第3区的遗传变异较大,基因多样性水平较高。分析比较发现宁强矮马GHR基因外显子10的多态性比贵州马稍高,首次表明宁强矮马在GHR10上存在较大的遗传多态性。     

策勒黑羊血清乳酸脱氢酶同工酶与产羔数的相关研究

利用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳法,测定策勒黑羊(单羔、多羔成年母羊各60只)血清乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的多态性。测定发现,血清淀粉酶均表现为单态,LDH同工酶出现多态性。LDH同工酶共有5种基因型,经过生物图像处理系统扫描定量分析,得出其基因频率和杂合度,其百分含量的排列顺序为:LDH1>LDH3>LDH2>LDH5>LDH4;多羔成年母羊组与单羔成年母羊组2种LDH的基因型频率有显著差异(P<0.05),富含有LDH4和LDHy基因型的策勒黑成年母羊具有较高的多羔性能。     

华南虎、金钱豹、云豹血清蛋白和LDH同工酶的电泳研究

本文报道了华南虎、金钱豹、云豹的血清蛋白和LDH同工酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱和扫描曲线。分析结果表明:华南虎、金钱豹和云豹的血清蛋白电泳可分辨的区带数分别为13、14、13。在各区带的相对迁移率及含量方面显示出动物体蛋白在物种间存在着差异。3种动物血清LDH同工酶谱带均为5条,但仍各具特征性电泳图谱,且LDH同工酶表型分析结果提示,华南虎与金钱豹的电泳图谱较为接近。     

马立克氏病鸡血清乳酸脱氢酶同工酶和血清蛋白的电泳研究

应用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳分析马立克氏病鸡和健康鸡血清 LDA 同工酶酶谱变化。试验表明,马立克氏病鸡的血清乳酸脱氢酶(LDH)同工酶活性明显地比健鸡高,并出现了健鸡所没有的 LDH_4和 LDH_5两条酶带;病鸡的血清蛋白电泳带比健鸡少,前清蛋白带消失,触珠蛋白带不清,清蛋白和转铁蛋白带染色变浅,r 球蛋白扩散性增强。这些变化可作为鸡马立克氏病诊断的辅助依据。     

新疆细毛羊12种组织乳酸脱氢酶电泳初步研究

本文报道了新疆细毛羊12种组织的 LDH 的聚丙烯酰胺凝胶不连续电泳图谱,并对酶谱的区带数目、泳动率、相对含量及染色强度进行了分析比较。测定结果表明:12种组织的 LDH同工酶谱呈现明显的组织特异性。     

牦牛乳酸脱氢酶-1两种遗传变异体的纯化及酶学特性比较

 【目的】从乳酸脱氢酶（LDH）水平上探索牦牛(Bos grunniens)低氧适应性分子机制。【方法】利用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析牦牛组织中LDH同工酶谱;用比色法测定牦牛、黄牛和水牛心脏、肝脏和肌肉组织中LDH总活力;采用染料亲和层析和DEAE-Sephadex离子交换层析从牦牛心肌组织中纯化LDH1（由4个H亚基组成）的2种遗传变异体,进行酶学性质的比较。【结果】电泳方法检测发现牦牛LDH1存在2种遗传变异体,根据电泳迁移率分别命名为快型和慢型（LDH1-F和LDH1-S）。获得纯化的牦牛LDH1-F和LDH1-S,比活力分别为21.4 U?mg-1蛋白和17.8 U?mg-1蛋白,在SDS-PAGE和PAGE上均显示1条区带。2种变异体以NADH为底物的米氏常数（Km）值差异不大,均显著高于普通牛的LDH1;以丙酮酸钠为底物的Km值LDH1-F小于LDH1-S。试验进一步比较了携带不同LDH1变异体的牦牛心脏、肝脏和肌肉组织中LDH总活力和各种同工酶谱,未见显著差异,而牦牛心脏、肝脏和肌肉组织中LDH总活力显著或极显著低于黄牛和水牛。【结论】牦牛LDH1 2种遗传变异体的Km值存在差异,且Km(NADH)高于普通牛;牦牛心脏、肝脏和肌肉组织中LDH总活力低于普通牛。     

西昌黄牛主要器官组织乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的研究

本文对西昌黄牛的心肌、肾脏、肌肉(骨骼肌)、肝脏、脾脏、肺脏、睾丸和血清LDH同工酶用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行了测定。测定出西昌黄牛主要器官组织基本的酶谱顺序,其中睾丸具有LDH-X带,有些织组还发现有六条区带。     

宁强矮马微卫星遗传多样性研究

采用8个微卫星标记对12匹宁强矮马的遗传多样性进行了分析,结果表明,在6个微卫星位点上存在遗传多态性,COR059有8个等位基因,ICA40有5个等位基因,AHT040有8个等位基因,UM016有9个等住基因,UM002有6个等位基因,TKY21有5个等位基因,各位点平均有效等住基因数4.93、平均多肽信息含量为0.743、平均杂合度0.78,数据表明宁强矮马保持了较为纯净的原始基因库,对宁强矮马这一濒危物种进行资源评价、保护和开发if,0用研究提供了分子水平的理论依据。     

东南亚小型马来源的遗传学和历史学研究

通过血液蛋白质多态型的遗传学分析和历史学考证，认为东南亚小型马的来源与中国西南马有着密切关系，是若干世纪民族迁徙、交往的结果。中南半岛，尤以泰国、缅甸各国小型马为中国西南马的直接延伸，而南洋群岛（菲律宾、印度尼西亚）小型马，则源自中国东南沿海的马种，也含有西南马的血液。     

宁强矮马线粒体DNA D-loop区的遗传多样性

【目的】研究宁强矮马线粒体DNA（mitochondrial DNA,mtDNA）D-loop区的遗传多样性及其母系起源进化,为其遗传资源保护提供理论数据。【方法】采用PCR和测序技术分析12匹宁强矮马mtDNA D-loop区的600 bp核酸序列,并基于mtDNA D-loop区序列将宁强矮马和NCBI公布的其它马种进行系统树构建。【结果】宁强矮马群体存在9种单倍型,检测到34处SNP位点,占所分析位点总数的5.67%,各单倍型间的遗传距离为0.002—0.035,单倍型多样性为0.978±0.054,核苷酸多性为0.01988±0.00818。聚类分析表明宁强矮马分布在4个支系中,与胡克尔马、设特兰马、德保马、蒙古马和车巨马亲缘关系较近,与纯血马、云南马和韩国济州岛本土马的亲缘关系较远。【结论】宁强矮马具有比较丰富的遗传多样性,在进化的历史过程中受到其它马种的影响较大。     

蒙古马与其他品种马的ELA-DRA*exon2多态性分析

本实验通过PCR-SSCP技术检测了三大品种6个类型共296匹马ELA-DRA* exon2的多态性。用12%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳将已变性的PCR扩增产物分离,并用银染法显色。结果296匹马中共出现6种基因型:三种纯合子分别记为AA、BB和CC型,均为3条带;三种杂合子分别记为AB、BC和AC型,均为4条带;且AA和AB两种基因型是所研究的各类型马的优势基因型。纯血马和三河马的PIC和He值均较高,属于高度多态,4个类型蒙古马均属于中度多态。聚类分析表明三大品种各聚一支,各类型蒙古马中锡尼河马和巴尔虎马关系较近。     

不同品种1岁青年马血清生化指标的比较分析

【目的】在相同精饲料营养水平下,不同品种的1岁青年马匹血清中常规指标及肝脏、肾脏、糖及脂代谢相关指标的水平,为青年马匹健康养殖提供基础数据参考。【方法】试验选择临床健康的体重(217.44±21.35) kg相近的1岁伊犁马20匹,体重(215.86±18.42) kg相近的1岁哈萨克马20匹,体重(219.00±19.37) kg相近的1岁焉耆马16匹,体重(224.35±14.56) kg相近的1岁纯血马16匹,体重(227.98±21.49) kg相近的1岁杂交马(伊犁马 ♀×奥尔洛夫马 ♂)20匹,以品种为单位,分为5个组。在饲养管理和日粮营养水平相同的基础,进行45 d补喂饲养,第45 d采集血液检测12项血清生化指标。【结果】在5个不同品种1岁青年马匹之间,血清中常规指标总蛋白含量各品种间存在极显著差异(P<0.01),白蛋白和尿素氮浓度各品种间差异不显著(P>0.05);血清中丙氨酸氨基转移酶活力、门冬氨酸基转移酶活力、尿酸浓度、肌酐浓度各品种间存在极显著或显著差异(P<0.01 or P<0.05);血清中葡萄糖浓度、总胆固醇浓度、甘油三酯浓度、高密度脂蛋白浓度各品种间存在极显著或显著差异(P<0.01 or P<0.05),低密度脂蛋白浓度各品种之间差异均不显著(P>0.05)。【结论】在相同的饲养管理条件下,5个不同品种1岁青年马匹血清中常规指标、肝脏、肾脏、糖及脂代谢指标存在一定的差异。     

南亚小型马近缘关系的研究

通过血液蛋白质多态型的遗传学分析和历史学的考证，认为南亚小型马与中国西南马有着近缘关系。西南丝绸之路和海上丝绸之路的开通，为中国西南马的扩延创造了必要的条件。尼泊尔小型马的来源与藏马有关，但它也可能混有中国西南马的血液。     

利用10个重要经济性状的聚类分析来探讨中国地方猪种的分类

利用体尺、繁殖、生长和屠宰四类共10个重要经济性状的最新数据,通过聚类分析,把94个地方猪种(群)分成6类。第I类繁殖力高,第II类生长速度快,第III类综合性能好,第IV类过渡型,第V类屠宰率高,第VI类型体型小。黔东花猪、圩猪和乐平花猪与平均品种的欧氏距离最短,为中国地方品种的中心品种。东乡花猪与乐平花猪之间的欧氏距离较大,聚类结果也不在同一类中,因此把东乡花猪归入乐平花猪并不合理。本聚类结果,为中国地方猪种的开发利用提供理论依据。     

不同品种父本杂交改良伊犁马公驹8～11月龄冬季舍饲生长发育研究

[目的]通过对伊犁马及其不同品种父本杂交F1公驹8 -11月龄体尺、体重测定,初步研究伊犁马不同品种父本杂交后代生长发育情况,为伊犁马杂交改良工作提供基础依据和理论数据.[方法]试验通过对伊犁马及其不同品种父本杂交F1代8～11月龄体高、体长、胸围、管围、体重测定并分析,绘制生长发育曲线,对比和分析伊犁马及其不同品种父本杂交后代之间的差异.[结果]不同品种父本杂交F1代马驹与伊犁马8～11月龄体高、体长、胸围、体重指标总体呈现纯血F1代＞新吉F1代＞吉乳F1代＞奥尔洛夫F1代＞伊犁马;管围总体呈现出纯血F1代＞新吉F1代＞吉乳F1代＞伊犁马＞奥尔洛夫F1.[结论]不同品种父本杂交F1代马驹8～11月龄生长规律与伊犁马基本相同,但是生长发育水平优于伊犁马,不同品种杂交后代之间存在一定差异,均呈现出部分其父本品种生长发育的特点,说明引进优良品种马匹杂交改良伊犁马效果明显;并且以伊犁马作为母本,通过引进优良品种杂交改良,有选育出伊犁马新品系的潜力.     

贵州矮马与伊犁马生长激素基因5’侧翼区的结构特征

为了摸索贵州矮马生长发育的调控机制,探明贵州矮马与伊犁马生长激素基因5’侧翼区的结构特征,以4～5龄的贵州矮马和7～8龄的新疆伊犁马为研究对象,采用直接测序法从两种马基因组中克隆了生长激素(GH)基因5’侧翼区的DNA序列,并进行生物信息学分析。结果表明:1)从基因组中克隆的711bp片段为GH基因5’侧翼区序列;2)两个马品种的GH基因5’侧翼区中都存在TATA box、CAATbox、GC box和Octamer位点等真核生物启动子结构;3)从伊犁马GH基因5’侧翼区中检测到1个位于30bp处的突变位点发生了G→C颠换,由此新增了1个转录因子upstream stimulatory factor(USF)结合位点;4)从贵州矮马和伊犁马GH基因的5’侧翼区序列中发现了MZF1、CdxA、Nkx-2、AML-1a和c-Myc等19种共58个转录因子的结合位点。结论:克隆的711bp基因序列中存在大量的转录调控元件。     

中国部分家鸭和野鸭遗传多样性及亲缘关系的微卫星分析

利用前期双重抑制PCR技术分离得到的10个鸭微卫星标记,分析了13个鸭品种的遗传多样性。利用等位基因频率计算各群体的平均遗传杂合度(H)、多态信息含量(PIC)和群体间的Nei氏遗传距离(DA)等遗传参数,并用类平均法进行了聚类分析。结果表明:10个微卫星座位中有7个具有多态,可作为有效的遗传标记用于各品种的遗传多样性和系统发生关系分析。7个微卫星座位在13个品种中共检测到51个等位基因;每个座位的等位基因数为5～12个,平均多态信息含量为0.402 3～0.601 5;各群体平均杂合度为0.407 0～0.707 0,说明各群体的遗传多样性较为丰富。采用DA/UPGMA法聚类分析,13个鸭群体聚为3类:Ⅰ类为8个家鸭品种和樱桃谷鸭;Ⅱ类为野鸭类;Ⅲ类为番鸭独成一类。结果提示:各类鸭群体间的聚类关系与其来源、分化、地理分布基本一致,而且绿头野鸭和斑嘴鸭在家鸭品种形成过程中均作出了贡献。