脱氧雪腐镰刀菌烯醇对仔猪海马神经细胞凋亡及线粒体膜电位的影响

[目的]本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对仔猪海马神经细胞的凋亡及其信号通路的影响。[方法]体外培养仔猪海马神经细胞至对数生长期,以不同质量浓度的DON(0、125、250、500、1 000和2 000 ng·mL~(-1))进行处理,采用倒置显微镜和透射电镜观察细胞的形态学变化及线粒体结构,CCK-8试剂盒检测细胞的存活率,流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化,ELISA试剂盒检测caspase-3酶活性,荧光定量PCR(RT-qPCR)检测Bcl-2和Bax mRNA的表达水平。[结果]DON可显著抑制仔猪海马神经细胞存活率并诱导细胞发生明显的形态学变化,且具有剂量和时间效应;DON可降低线粒体膜电位,增强caspase-3酶活力,并通过上调Bax mRNA和下调Bcl-2 mRNA的表达,增加Bax/Bcl-2值。[结论]DON可通过引起线粒体功能障碍,激活caspases-3并调节Bcl-2家族基因,从而诱导仔猪海马神经细胞凋亡。     

党参多糖对仔猪生长性能、血清细胞因子及肠黏膜分泌型免疫球蛋白A含量的影响

本试验旨在研究党参多糖(CPP)对仔猪生长性能、血清细胞因子及肠黏膜分泌型免疫球蛋白A(SIg A)含量的影响。选取1日龄"杜×长×大"三元杂交仔猪60头(6窝),随机分为3组,每组2个重复,每个重复10头猪(公母各占1/2)。14日龄时开始试验,3组仔猪分别饲喂仔猪代乳料(对照组)、仔猪代乳料+1%党参多糖(低剂量组)、仔猪代乳料+2%党参多糖(高剂量组),所有仔猪21日龄断奶,试验期14 d。结果表明:与对照组相比,1)21日龄时,饲粮添加2%党参多糖极显著提高了仔猪的平均体重(P0.01);28日龄时,饲粮添加1%和2%党参多糖显著提高了仔猪的平均体重(P0.05)。22~28日龄时,饲粮添加2%党参多糖显著提高了仔猪的平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)(P0.05)。2)21日龄时,饲粮添加2%党参多糖显著提高了仔猪的血清γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-6(IL-6)含量(P0.05);28日龄时,饲粮添加1%和2%党参多糖显著提高了仔猪的血清IL-2、白细胞介素-4(IL-4)和IL-6含量(P0.05)。3)饲粮添加2%党参多糖极显著提高了仔猪的十二指肠、空肠和回肠黏膜SIg A含量(P0.01)。由此可见,饲粮添加1%和2%党参多糖能够改善仔猪的生长性能,提高血清细胞因子和肠黏膜SIg A含量,其中添加2%党参多糖的作用效果优于1%党参多糖。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)暴露对断奶仔猪血清及小肠黏膜免疫功能的影响

旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)暴露对断奶仔猪血清及肠道黏膜免疫功能的影响。选择30头21日龄临床检查健康的"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪,体质量(6.87±0.41)kg,随机分为3组,对照组饲喂基础日粮,低剂量组和高剂量组分别饲喂含1,2 mg/kg的DON日粮,试验期为60 d。试验结束时,所有仔猪经前腔静脉采血,分离血清,用于检测免疫因子含量;同时每组随机选择5头仔猪进行屠宰,收集免疫器官及各段小肠,用于检测免疫器官指数及小肠组织中免疫球蛋白的表达水平。结果显示:与对照组相比,DON处理组仔猪血清中分泌型免疫球蛋白A(sIgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、补体3(C3)及补体4(C4)含量均显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01);试验组仔猪脾脏指数较对照组显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01);小肠各段肠黏膜中免疫球蛋白表达水平均随DON含量的增加而显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01)。结果表明,在本试验条件下,DON可降低断奶仔猪的体液免疫及肠道黏膜免疫水平,改变仔猪的免疫功能。     

DON暴露对断奶仔猪抗氧化水平、血清生化指标及小肠黏膜形态的影响

旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)暴露对断奶仔猪抗氧化水平、血清生化指标及小肠黏膜形态的影响。选择健康的“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪30头,随机分成3组,对照组饲喂基础饲粮,低剂量组和高剂量组分别饲喂1和2 mg·kg^-1的DON饲粮,试验期为60 d。试验结束时,所有仔猪采集血液样本,用于检测抗氧化性能、血清生化指标及肠道通透性。每组选5头仔猪进行剖杀,取小肠组织观察病理变化。结果显示,与对照组相比,DON显著降低了断奶仔猪血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性(P<0.05),提高了一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)水平(P<0.05),并引起碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GGT)、肌酐(CREA)、α-淀粉酶(α-AMY)、脂肪酶(LIP)、肌酸激酶(CK)活性显著升高(P<0.05),谷草转氨酶(AST)活性显著降低(P<0.05),血清二胺氧化酶(DAO)及D-乳酸(D-LA)含量随DON剂量的增加而显著升高(P<0.05)。低剂量DON可使小肠黏膜发生部分形态改变,而高剂量DON使小肠组织严重受损。试验结果表明,DON暴露可改变断奶仔猪机体抗氧化反应,引起部分生化指标异常,造成肠道黏膜损伤,增加肠道通透性,对仔猪具有一定的毒性作用。     

党参多糖对仔猪小肠黏膜免疫功能的影响

为探讨党参多糖(CPP)对仔猪小肠黏膜免疫功能的影响,选取60头1日龄健康"杜×长×大"三元杂交仔猪,随机分为3组,从14日龄开始,3组仔猪分别饲喂代乳料(对照组)、代乳料+1%(以生药计)CPP(低剂量组)、代乳料+2%CPP(高剂量组)。21日龄断奶,试验期为14 d。试验结束时,每组随机选择6头仔猪进行剖杀,取小肠各段分别放置于4%多聚甲醛和液氮中保存,免疫组化法(IHC)检测分泌型免疫球蛋白A(SIg A)、免疫球蛋白G(Ig G)和免疫球蛋白M(Ig M)阳性表达水平,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)测定Ig A、Ig G和Ig M的m RNA相对表达量。结果表明党参多糖显著或极显著提高仔猪小肠SIg A、Ig G和Ig M蛋白表达水平以及Ig A、Ig G和Ig M m RNA相对表达量(P0.01或P0.05),其中添加2%党参多糖的效果优于添加1%党参多糖的效果。表明在仔猪饲粮中添加党参多糖能够促进仔猪小肠Ig A、Ig G、Ig M m RNA表达,提高仔猪机体免疫应答能力。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇对PC12细胞自噬的影响

【目的】研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对PC12细胞自噬的影响。【方法】以不同质量浓度(0(CK),125,250,500,1 000和2 000ng/mL)的DON处理PC12细胞24h后,采用倒置显微镜、透射电镜、免疫荧光、荧光定量PCR、Western-blot等技术,研究DON对PC12细胞形态和超微结构、LC3聚点率及自噬相关基因classⅢPI3 K、Beclin-1、P62 mRNA和蛋白LC3Ⅱ、P62、classⅢPI3K表达的影响。【结果】不同质量浓度的DON均可诱导PC12细胞自噬,各试验组细胞自噬水平均高于对照组(CK),并随着DON质量浓度的增大而先增加后下降,在DON质量浓度为1 000ng/mL时达到峰值。与对照组相比,各试验组classⅢPI3 K mRNA和Beclin-1mRNA表达水平均极显著增高(P0.01),P62mRNA表达水平随着DON质量浓度的增加总体呈下降趋势,差异达显著(P0.05)或极显著(P0.01)水平。Western-blot结果显示,LC3Ⅱ蛋白表达量在DON质量浓度为1 000ng/mL时最高,与对照组相比,250~2 000ng/mL DON处理组的LC3Ⅱ蛋白表达量显著(P0.05)或极显著(P0.01)增加;500~2 000ng/mL DON处理组classⅢPI3K蛋白表达量较对照组显著(P0.05)或极显著(P0.01)增加,其中以1 000ng/mL DON处理组表达量最高;与对照组相比,不同质量浓度DON处理组P62蛋白表达量均极显著降低(P0.01),其中以1 000ng/mL DON处理组最低。【结论】DON能够诱导PC12细胞发生自噬,自噬相关基因classⅢPI3 K、Beclin-1、P62及蛋白LC3Ⅱ、P62、classⅢPI3K等参与了DON诱导PC12细胞自噬的调控。