丁酸梭菌对断奶仔猪生长性能、肠道结构和免疫功能的影响北大核心CSCD

本试验旨在研究饲粮添加丁酸梭菌对断奶仔猪生长性能、肠道结构和免疫功能的影响。选取(25±1)日龄、体重(6.24±0.32)kg的健康"杜×长×大"杂交仔猪360头,随机分为5个组,每组4个重复,每个重复18头猪。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂在基础饲粮中添加250、500、1 000和2 000 mg/kg丁酸梭菌的试验饲粮。试验期30 d。结果表明:1)250和1 000 mg/kg丁酸梭菌添加组断奶仔猪的平均日采食量(ADFI)显著低于对照组(P<0.05);250和500 mg/kg丁酸梭菌添加组的腹泻率较对照组分别显著降低了40.99%和44.32%(P<0.05)。2)丁酸梭菌添加组断奶仔猪的空肠绒毛高度较对照组分别显著提高了32.23%、35.71%、33.59%和47.36%(P<0.05),空肠绒毛高度/隐窝深度较对照组分别显著或极显著提高了47.24%(P<0.01)、48.03%(P<0.01)、19.69%(P<0.05)和22.83%(P<0.05)。3)饲粮添加丁酸梭菌显著提高断奶仔猪的血清免疫球蛋白A(IgA)和免疫球蛋白G(IgG)含量(P<0.05),各组的血清免疫球蛋白M(IgM)、补体3(C3)和补体4(C4)含量则无显著差异(P>0.05)。结果提示,25~55日龄断奶仔猪饲粮添加250~500 mg/kg丁酸梭菌可改善断奶仔猪肠道结构,增强机体免疫功能。     

表皮生长因子和胰岛素样生长因子-Ⅰ对断奶仔猪免疫功能的影响

选取21日龄断奶长白仔猪37头,按表皮生长因子(EG F)、胰岛素样生长因子-Ⅰ(IG F-Ⅰ)、基础日粮、自然哺乳随机分为4组,每组3重复,每个重复3头。EG F和IG F-Ⅰ的剂量为17.86μg/d,研究其对早期断奶仔猪免疫功能的影响。结果表明:EG F组和IG F-Ⅰ组脾淋巴细胞转化率均极显著(P<0.01)高于基础日粮组,空肠后段肠黏膜SIgA含量极显著(P<0.01)高于基础日粮组而且EG F组脾淋巴细胞转化率高于IG F-Ⅰ组。EG F组小肠各段黏膜上皮间淋巴细胞数极显著(P<0.01)高于基础日粮组;IG F-Ⅰ组空肠和回肠黏膜上皮间淋巴细胞数极显著(P<0.01)高于基础日粮组;EG F组回肠黏膜上皮间杯状细胞数极显著(P<0.01)高于基础日粮组;IG F-Ⅰ组回肠黏膜上皮间杯状细胞数极显著(P<0.01)低于自然哺乳组。表皮生长因子和胰岛素样生长因子-Ⅰ能提高早期断奶仔猪的免疫功能。     

太子参茎叶多糖对断奶仔猪生长性能和血清抗氧化指标、免疫指标及生化指标的影响

本试验旨在研究饲粮中添加太子参茎叶多糖对断奶仔猪生长性能和血清抗氧化指标、免疫指标及生化指标的影响。选取25日龄"大×长"断奶仔猪120头,随机分成4个组(对照组、Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组),每组3个重复,每个重复10头猪,分别在基础饲粮中添加0、500、1 000、1 500 mg/kg的太子参茎叶多糖,试验期30 d。结果表明:与对照组相比,1)Ⅰ和Ⅱ组断奶仔猪的平均日增重(ADG)极显著升高(P0.01),Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组的腹泻率极显著降低(P0.01)。2)Ⅱ和Ⅲ组的血清超氧化物歧化酶(SOD)活性极显著或显著升高(P0.01或P0.05)。3)Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组的血清免疫球蛋白A(Ig A)、补体3(C3)、补体4(C4)含量极显著升高(P0.01),血清免疫球蛋白M含量显著升高(P0.05);Ⅱ和Ⅲ组的血清免疫球蛋白G(Ig G)含量显著升高(P0.05)。4)Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组的血清甘油三酯(TG)含量极显著降低(P0.01);Ⅱ和Ⅲ组的血清尿素氮(UN)含量极显著降低(P0.01),血清白蛋白(ALB)含量极显著升高(P0.01)。研究结果表明,饲粮中添加太子参茎叶多糖可有效提高断奶仔猪的ADG,降低腹泻率,提高免疫功能,改善机体的抗氧化性能和血清生化指标。在本试验条件下,太子参茎叶多糖在断奶仔猪饲粮中的适宜添加量为1 000 mg/kg。     

丁酸梭菌对断奶仔猪生长性能、肠道结构和免疫功能的影响

本试验旨在研究饲粮添加丁酸梭菌对断奶仔猪生长性能、肠道结构和免疫功能的影响。选取(25±1)日龄、体重(6.24±0.32)kg的健康"杜×长×大"杂交仔猪360头,随机分为5个组,每组4个重复,每个重复18头猪。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂在基础饲粮中添加250、500、1 000和2 000 mg/kg丁酸梭菌的试验饲粮。试验期30 d。结果表明:1)250和1 000 mg/kg丁酸梭菌添加组断奶仔猪的平均日采食量(ADFI)显著低于对照组(P0.05);250和500 mg/kg丁酸梭菌添加组的腹泻率较对照组分别显著降低了40.99%和44.32%(P0.05)。2)丁酸梭菌添加组断奶仔猪的空肠绒毛高度较对照组分别显著提高了32.23%、35.71%、33.59%和47.36%(P0.05),空肠绒毛高度/隐窝深度较对照组分别显著或极显著提高了47.24%(P0.01)、48.03%(P0.01)、19.69%(P0.05)和22.83%(P0.05)。3)饲粮添加丁酸梭菌显著提高断奶仔猪的血清免疫球蛋白A(IgA)和免疫球蛋白G(IgG)含量(P0.05),各组的血清免疫球蛋白M(IgM)、补体3(C3)和补体4(C4)含量则无显著差异(P0.05)。结果提示,25~55日龄断奶仔猪饲粮添加250~500 mg/kg丁酸梭菌可改善断奶仔猪肠道结构,增强机体免疫功能。     

博落回提取物对早期断奶仔猪生长性能和血清免疫参数的影响

本试验旨在研究博落回提取物(Macleaya cordata extract,MCE)对早期断奶仔猪生长性能和免疫功能的影响。选用体重、胎次、泌乳量、产仔数相近,健康的PIC五元杂交母猪所产的60头35日龄断奶仔猪,随机分成5个组,每组4个重复,每个重复3头仔猪。对照组饲喂未添加MCE的基础饲粮,试验组分别饲喂在基础饲粮中添加2.5、5.0、7.5 mg/kg MCE的试验饲粮,土霉素组饲喂在基础饲粮中添加50 mg/kg土霉素的试验饲粮。试验期为25 d。考察仔猪生长性能,检测血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性,尿素氮、白蛋白和免疫球蛋白G含量,溶菌酶活性及一氧化氮含量等免疫参数。结果表明:35～60日龄,仔猪平均日增重和料重比随MCE添加水平的提高呈二次曲线变化(P<0.05);5.0 mg/kg MCE组平均日增重和平均日采食量显著高于对照组和土霉素组(P<0.05),料重比显著低于对照组、土霉素组和7.5 mg/kg MCE组(P<0.05)。60日龄时,5.0、7.5 mg/kg MCE组血清谷草转氨酶活性极显著低于对照组(P<0.01),土霉素组血清谷草转氨酶活性极显著低于对照组和5.0、7.5 mg/kg MCE组(P<0.01),但土霉素组血清谷丙转氨酶活性极显著高于对照组(P<0.01);5.0 mg/kg MCE组血清尿素氮含量极显著低于对照组、2.5、7.5 mg/kg MCE组和土霉素组(P<0.01)。60日龄时,5.0 mg/kg MCE组血清免疫球蛋白G含量极显著高于对照组、2.5、7.5 mg/kg MCE组和土霉素组(P<0.01),而土霉素组血清免疫球蛋白G含量极显著高于对照组(P<0.01);2.5、5.0 mg/kg MCE组血清一氧化氮含量极显著高于对照组、土霉素组(P<0.01),对照组、7.5 mg/kg MCE组差异不显著(P>0.05),土霉素组血清一氧化氮含量极显著高于对照组(P<0.01);5.0、7.5 mg/kg MCE组血清溶菌酶活性极显著高于对照组和2.5 mg/kg MCE组(P<0.01),土霉素组血清溶菌酶活性极显著高于对照组、2.5、5.0、7.5 mg/kg MCE组(P<0.01)。结果提示,MCE能够提高断奶仔猪血清免疫球蛋白G、一氧化氮含量和溶菌酶活性,显著改善免疫功能,明显增强断奶仔猪抗病能力,从而改善生长性能,其效果优于土霉素。综合生长性能和血清抗菌指标二次曲线结果,MCE在断奶仔猪饲粮中的适宜添加水平为4.5 mg/kg。     

高锌日粮对断奶仔猪肠道黏膜免疫及黏膜上皮形态的影响

本试验旨在研究长期饲喂不同锌源的高锌日粮对断奶应激仔猪肠道黏膜免疫及黏膜上皮形态的影响。选用临床检查健康的(26±2)日龄"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪60头,按体质量和性别随机分成3组,每组20头,分别饲喂基础日粮、基础日粮+3 000 mg.kg-1氧化锌和基础日粮+500 mg.kg-1蛋氨酸锌。试验期70 d。于试验结束时,每组选取5头仔猪放血致死,分别取十二指肠近端、空肠近端1/4处、空肠远端1/4处和回肠中段,用于测定肠黏膜绒毛高度、绒毛宽度、隐窝深度,小肠上皮间淋巴细胞、杯状细胞数量,粘液层厚度及肠道粘液中IgA的含量。结果显示,在断奶后0～42 d,添加高锌日粮组仔猪的体重和日增重显著或极显著高于对照组仔猪(P0.05或P0.01),而在断奶后42～70 d,对照组仔猪日增重显著高于添加高锌日粮组仔猪(P0.05);两高锌组仔猪小肠黏膜结构有明显的损伤,表现为绒毛高度下降,隐窝变深,肠黏膜上皮细胞萎缩,肠道粘液层厚度变薄;上皮间淋巴细胞数、杯状细胞数和肠道黏液中IgA水平都显著或极显著低于对照组(P0.05或P0.01)。高锌日粮长期暴露引起断奶仔猪锌中毒,改变了肠道黏膜上皮结构的完整性,并降低了仔猪生长性能及肠道黏膜免疫功能。     

高铜对断奶应激仔猪血清生化指标及激素水平的动态影响

选用30头(28±2)日龄“长大定”三元杂交断奶仔猪,按体质量和性别随机分成3组,每组10头。组(对照组)仔猪饲喂基础日粮;组仔猪在断奶后14d内饲喂基础日粮+250mg/kg铜(CuSO4·5H2O),然后改喂基础日粮;组仔猪饲喂基础日粮+250mg/kg铜(CuSO4·5H2O)。试验期28d。所有试验猪均于断奶后0、7、14、28d,经前腔静脉采血,测定部分血清生化指标及血清激素水平。结果表明,与断奶前相比,3组仔猪断奶后血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、总胆固醇和碱性磷酸酶水平均显著下降或极显著下降(P<0.05或P<0.01);组仔猪血清尿素氮含量在断奶后7d极显著升高(P<0.01),而血清生长激素、胰岛素和三碘甲状腺原氨酸在断奶后7d显著下降(P<0.05);组仔猪血清生长激素、胰岛素和三碘甲状腺原氨酸在断奶后14d极显著升高(P<0.01);组仔猪血清生长激素、胰岛素和三碘甲状腺原氨酸及甲状腺素在断奶后14、28d显著升高或极显著升高(P<0.05或P<0.01)。试验显示,高铜日粮可显著提高断奶应激仔猪血清生长激素、胰岛素和三碘甲状腺原氨酸及甲状腺素的水平。     

丁酸钠对断奶仔猪生长性能及免疫功能的影响

本试验旨在研究丁酸钠对断奶仔猪生长性能及免疫功能的影响。试验选用162头28日龄(8.25±0.18)kg断奶去势仔猪,随机分为6组,每组3个重复,每个重复9头猪。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加0.01%抗生素(Ⅰ组)、0.10%丁酸钠(Ⅱ组)、0.10%丁酸钠+0.01%抗生素(Ⅲ组)、0.30%氧化锌+0.01%抗生素(Ⅳ组)和0.10%丁酸钠+0.30%氧化锌+0.01%抗生素(Ⅴ组)。试验期21 d。结果表明:1)Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组末重、平均日采食量和平均日增重显著高于对照组(P<0.05)。2)除Ⅰ组外,其他4个试验组的脾脏指数、胰脏指数、淋巴结指数均显著高于对照组(P<0.05);与对照组相比,各试验组免疫球蛋白G含量均显著升高(P<0.05),各试验组肠道黏膜免疫球蛋白A阳性(IgA+)细胞含量均有所上升,其中Ⅲ组上升最显著。3)Ⅲ、Ⅴ组的二胺氧化酶活性分别比对照组降低了46.22%和44.83%(P<0.05);Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组的皮质醇含量分别比对照组降低了43.13%、43.14%、47.01%(P<0.05)。结果提示,饲粮中添加丁酸钠能促进断奶仔猪生长和免疫器官发育,提高血清免疫球蛋白含量,刺激机体肠道黏膜分泌免疫球蛋白A阳性细胞,提高其免疫功能。此外,丁酸钠与抗生素一起使用对促进生长性能和降低腹泻率作用效果更明显。     

谷氨酰胺和牛磺酸对仔猪肠黏膜形态的影响

甘氨酰谷氨酰胺( Gly-Gln)和牛磺酸(Tau)对早期断奶仔猪小肠各段黏肠DNA和形态的影响.以28日龄杜×长×大断奶仔猪为研究对象,通过饲养和屠宰试验,研究Gly-Gln和Tau对早期断奶仔猪十二指肠、空肠和回肠黏肠DNA及形态的影响.结果表明:饲粮中分别或同时添加Gly-Gln和Tau均可提高小肠各段黏膜DNA的含量.Gly-Gln组能显著提高空肠和回肠段的黏膜DNA含量,Tau组和复配组对小肠各段黏膜DNA含量影响不显著;Gly-Gln组极显著增加了十二指肠和回肠的黏膜厚度(MT),显著提高了十二指肠和回肠后段的绒毛高度(VH),显著或极显著降低了空肠前段和中段的隐窝深度(CD),极显著提高了空肠前段和中段的VH/CD,显著提高了回肠段的VH/CD;Tau组极显著提高了十二指肠段的VH并降低了CD,极显著提高了十二指肠段和空肠中段的VH/CD;复配组显著或极显著降低了十二指肠段和空肠中段的CD,极显著提高了空肠前段、中段和回肠段的VH/CD.这说明,在早期断奶仔猪饲粮中分别或同时添加0.25%Gly-Gln和0.1% Tau能有效提高仔猪肠黏膜的发育及功能.     

高锌日粮长期暴露对断奶仔猪生长性能和血清生化指标的影响

试验选用60头日龄相近(23±1)临床检查健康的“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪,按体重和性别随机分成3组,每组20头,分别饲喂基础日粮、基础日粮+3000 mg/kg 氧化锌、基础日粮+500 mg/kg 蛋氨酸锌。在断奶后0、21、42、70 d,每组随机选取10头仔猪,前腔静脉采血,测定部分血清生化指标。结果表明,在断奶后0~42 d,添加高锌日粮组仔猪的体重和日增重显著（P<0.05)或极显著（P<0.01)高于对照组仔猪,而在断奶后42~70 d,对照组仔猪日增重显著高于添加高锌日粮组仔猪（P<0.05）;在断奶后42~70 d,添加高锌日粮组仔猪血清AST和ALT水平显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于对照组仔猪,而血清TP、ALB水平显著（P<0.05)或极显著（P<0.01)低于对照组仔猪;在断奶后21~70 d,添加高锌日粮组仔猪血清ALP水平极显著高于对照组仔猪（P<0.01）。因此,断奶仔猪早期饲喂高锌日粮能显著缓解仔猪断奶应激,而长期饲喂高锌日粮对断奶仔猪有毒副作用。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇暴露对断奶仔猪延髓脂质过氧化反应、神经递质及钙稳态的影响

旨在通过脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)体内暴露试验,检测仔猪延髓组织的脂质过氧化反应、神经递质分泌及钙稳态的变化,研究DON对仔猪的神经毒性作用。选取30头21日龄"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪,随机分为对照组、DON低剂量组和DON高剂量组,每组10头仔猪。对照组饲喂基础饲料,DON低剂量组和高剂量组分别饲喂含1、2 mg·kg^-1DON的饲料,试验期为60 d。试验结束时,每组随机选择5头仔猪屠宰,采集延髓组织,检测氧化与过氧化水平、神经递质含量和Ca²⁺浓度、钙调蛋白(CaM)与钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(CaMKⅡ)mRNA相对表达量及CaM、CaMKⅡ、p-CaMKⅡ的蛋白表达水平。结果显示:与对照组相比,DON高、低剂量组脂质过氧化指标超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性极显著降低(P<0.01),而一氧化氮(NO)浓度极显著升高(P<0.01);DON高、低剂量组神经递质5-羟色胺(5-HT)浓度极显著升高(P<0.01),而乙酰胆碱(ACH)浓度极显著降低(P<0.01),高剂量组多巴胺(DA)和γ-氨基丁酸(GABA)浓度显著下降(P<0.05);DON高、低剂量组钙稳态指标Ca²⁺浓度均极显著升高(P<0.01),低剂量组CaM mRNA表达量显著降低(P<0.05),高、低剂量组CaMKⅡmRNA表达量均极显著降低(P<0.01);DON高剂量组CaM蛋白表达水平极显著降低(P<0.01),而p-CaMKⅡ蛋白表达水平极显著升高(P<0.01)。试验结果表明,DON暴露能够改变仔猪延髓组织脂质过氧化反应及神经递质的分泌,并导致钙稳态紊乱,对断奶仔猪具有一定的神经毒性作用。     

熟化软颗粒教槽料对断奶仔猪生长性能及腹泻率的影响

为研究熟化软颗粒教槽料对仔猪断奶前后生长性能及腹泻率的影响,试验选用8窝(共计84头)15日龄仔猪,随机分为对照组和试验组,分别饲喂同配方的粉状教槽料和软颗粒教槽料,每个组4个重复,每个重复1窝猪;试验分为两个阶段,分别为断奶前10d和断奶后5d,即15~25日龄和26~30日龄,仔猪在25日龄断奶。结果表明:在15~25日龄阶段,试验组仔猪平均日增重(ADG)较对照组无明显差异,平均日采食量(ADFI)增加了40.90%;在26~30日龄阶段,试验组ADG较对照组增加了12.21%,ADFI增加了34.41%;整个试验期,试验组ADFI较对照组增加了35.12%,ADG无明显差异,试验组的腹泻率也低于对照组;在仔猪断奶前后的3d,试验组的ADG和ADFI均高于对照组。综上,软颗粒教槽料在仔猪断奶后前期可有效地提高其采食量和日增重。     

金黄色葡萄球菌对奶牛乳腺上皮细胞Wnt/β-catenin信号通路和相关修复因子的影响

采用金黄色葡萄球菌侵袭原代奶牛乳腺上皮细胞,观察该病原菌对乳腺上皮细胞Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白和相关修复因子EGFR、TGF-β3和VEGF基因mRNA表达的影响。金黄色葡萄球菌以MOI=1∶1的比例接种奶牛乳腺上皮细胞,分别作用0,15,30,45,60,120,240 min,采用Western blot法检测乳腺上皮细胞β-catenin、Cyclin D1及c-Myc蛋白表达水平;免疫荧光法检测β-catenin的表达及核易位;荧光定量PCR检测EGFR、TGF-β3和VEGF基因mRNA表达。结果显示,β-catenin蛋白在45,60,120 min表达量升高,与0 min相比差异显著(P<0.05);Cyclin D1蛋白在45,60,120和240 min表达量升高,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01);c-Myc蛋白在15,30,60,120,240 min表达量升高,差异极显著(P<0.01)。修复相关因子EGFR、TGF-β3和VEGF基因mRNA的表达量在30 min均出现极显著升高(P<0.01),且VEGF基因mRNA在45,60,120和240 min均呈现极显著升高(P<0.01),EGFR基因mRNA表达量在30,45和60 min时表达量极显著升高(P<0.01)。结果表明,金黄色葡萄球菌侵袭奶牛乳腺上皮细胞后,诱导Wnt/β-catenin信号通路的转导和修复因子EGFR、TGF-β3和VEGF基因转录,该信号通路和修复因子可能参与金黄色葡萄球菌导致的炎症和细胞损伤的修复过程。     

产后健康和子宫炎奶牛子宫中化脓隐秘杆菌分离鉴定

为了调查产后3周内健康和子宫炎奶牛子宫中细菌分离情况,尤其是化脓隐秘杆菌及其毒力基因的分布情况。本试验采集了产后3周内15头健康奶牛和11头患子宫炎奶牛的子宫分泌物进行细菌分离鉴定,并对分离到的化脓隐秘杆菌进行毒力基因的检测。结果表明,大肠杆菌、化脓隐秘杆菌、芽孢杆菌是产后3周内子宫分泌物最常分离培养的细菌;从15头健康奶牛和11头患病奶牛的子宫分泌物中分离到17株化脓隐秘杆菌,所有菌株均携带plo基因和fimA基因;携带多种毒力基因的化脓隐秘杆菌在健康和子宫炎奶牛中均可以分离到。本试验为进一步研究化脓隐秘杆菌对子宫内膜的致病机理提供参考依据。     

互叶白千层油(茶树油)对肉鸡小肠黏膜组织结构及肠道免疫细胞的影响

选用1日龄的雌性岭南黄肉鸡99只,随机分为3组,分别为对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组,每组33只。对照组常规饲养,试验Ⅰ组和Ⅱ组分别在饮水中添加0.012 mL/L和0.020 mL/L的茶树油,试验至45日龄结束。解剖取十二指肠、空肠、回肠进行HE染色和PAS染色,观察小肠黏膜形态、上皮内淋巴细胞及杯状细胞数目。结果显示,2个试验组与对照组相比,各段小肠的绒毛长度增加,肠壁变薄,隐窝深度变浅,肠绒毛高度/隐窝深度比值增加;2个试验组的上皮内杯状细胞和淋巴细胞的数目高于对照组。结果表明,茶树油能够改善肉鸡小肠黏膜结构,增加小肠上皮内免疫细胞数量,提示茶树油对肉鸡的肠道吸收和肠道免疫功能具有增强作用。     

狐肺炎大肠杆菌毒力基因和耐药基因检测及药物敏感性分析

为了解河北地区狐肺炎大肠杆菌毒力基因、耐药基因的分布及耐药性情况,本研究采用PCR技术对从狐肺炎病例分离的81株大肠杆菌的毒力基因和耐药基因进行检测,采用K-B法检测这些大肠杆菌对16种抗菌药物的敏感性,采用试管二倍稀释法检测中药对大肠杆菌的最小抑制浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),采用腹腔注射法检测81株大肠杆菌对小白鼠的致病性。结果显示:此次共分离到81株大肠杆菌,且对小白鼠具有较强致病性;毒力基因irp2、fyuA、Ler、eaeA检出率分别为50.6%、56.8%、9.9%、23.5%;耐药基因blaTEM、blaOXA1、sul1、sul2、blaTEM1、blaSHV-1、blaCTX-M、strA-strB、aadA1、blaPSE1、sul3、tetA、tetB、tetC、tetD、ermF检出率分别为84.0%、69.1%、43.2%、38.3%、28.4%、4.9%、24.7%、29.6%、16.1%、9.9%、11.1%、9.9%、18.5%、8.6%、13.6%、3.7%,未检出耐药基因ermB、ermC;81株大肠杆菌均对磺胺间甲氧嘧啶、林可霉素等耐药;诃子、乌梅、五味子对81株大肠杆菌具有较好的体外抑菌作用,抑菌圈直径在20 mm～36 mm,MIC和MBC在7.81 mg/mL～62.50 mg/mL。本研究调查了河北地区狐肺炎大肠杆菌的流行情况,对狐肺炎病的防治具有重要的指导意义,更具公共卫生学意义。     

张掖市甘州区畜禽粪污综合利用模式分析与思考

推进粪污综合利用是做好畜禽粪污治理的必由之路,随着养殖业污染问题的日益显现,推动畜禽粪污综合利用显得迫在眉睫。本文立足张掖市甘州区当前畜禽养殖现状,分析了畜禽粪污综合利用的几种典型模式,指出了存在的问题及困难,并提出了有针对性的措施,旨在为进一步创新粪污综合利用模式,科学推进畜禽粪污综合利用提供实践参考。     

张掖市甘州区畜禽粪污治理现状及对策

畜禽粪污是养殖业污染的主要来源,随着中央环保督查的深入展开,畜禽粪污治理得到了空前的关注。本文阐述了甘州区推进畜禽粪污治理的现状,总结了所采取的措施及取得的成效,分析了当前推进畜禽粪污治理所存在的主要问题,并提出了针对性的建议和对策。以期为该区科学推进畜禽粪污综合利用提供一定的理论指导,从而推进畜禽养殖健康、持续发展,实现畜牧业发展与环境保护协调发展。     

毛皮动物源大肠埃希菌毒力基因二重PCR检测方法的建立

为了建立一种能够快速检测毛皮动物源大肠埃希菌耶尔森菌强毒力岛(HPI)中irp2、FyuA毒力基因的二重PCR方法,根据GenBank中irp2、FyuA基因的序列,设计并合成两对引物,扩增得到irp2、FyuA基因片段,大小分别为300bp和951bp。据此建立双重PCR方法,并将反应条件进行了优化。结果表明,用所建立的二重PCR方法可同时特异性扩增出大肠埃希菌irp2、FyuA毒力基因片段,对沙门菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、克雷伯菌均无特异性扩增。菌液最低检出量为2.8×105CFU/mL。在78份临床样品检测中,二重PCR检测结果与常规PCR检测结果一致。所建立的大肠埃希菌irp2、FyuA毒力基因二重PCR检测方法具有很好的特异性和灵敏度,能够提高临床样品检测的效率。     

猪δ冠状病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立与初步应用

本研究旨在建立一种灵敏、快速检测猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)的TaqMan荧光定量RT-PCR方法。参照GenBank中PDCoV有关基因序列,设计一对特异性引物用于扩增PDCoV M 基因。将测序正确的基因片段克隆入pMD18-T载体,构建重组质粒作为建立标准曲线的病毒模板。设计合成一对特异性引物与TaqMan探针,进行反应条件和反应体系的优化,建立快速检测PDCoV的TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法,并进行该方法的灵敏性、特异性与重复性验证。结果表明,该方法能有效扩增1.0×10^1 ~1.0×10^9 拷贝·μL^-1 的PDCoV标准质粒,建立的标准曲线呈现良好的线性关系。该方法的检测灵敏度为1.0×10^1 拷贝·μL^-1;对猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪伪狂犬病病毒等病原不发生交叉反应,具有很好的特异性;重复性试验结果显示变异系数(CV)小于1%,重复性良好。对2017—2018年期间收集的河南省不同猪场的100份腹泻病料进行检测,PDCoV的阳性检出率为23%(23/100),与PDCoV SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法的符合率为100%。人工感染PDCoV的仔猪,取攻毒后不同时间的粪便样品,应用本研究建立方法与常规RT-PCR方法对样品进行检测,TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的灵敏度远远优于常规RT-PCR。上述结果表明,本研究所建立的TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法能够灵敏、特异地检测PDCoV,可用于临床PDCoV的检测。