不同胁迫博落回根中生物碱含量变化及相关基因表达量分析

本研究通过对PEG6000模拟干旱以及机械受损等方法胁迫博落回,采用HPLC方法检测博其根中原阿片碱、别隐品碱、血根碱、白屈菜红碱的含量,结果 30%PEG6000模拟干旱以及机械受损均可使博落回根中终产物生物碱血根碱、白屈菜红碱含量上升,中间产物原阿片碱、别隐品碱含量下降;且血根碱、白屈菜红碱合成基因DBOX、P6H表达量上调;用实时荧光定量RT-PCR检测生物碱合成相关基因的表达量,血根碱、白屈菜红碱合成基因DBOX、P6H表达量上调。适当干旱以及机械受损有利于博落回根中血根碱、白屈菜红碱积累,为其在干旱、石漠化地区种植以及在种植过程中结合家畜喂养提供理论依据。     

一种高质量天门冬基因组DNA提取方法

针对天门冬[Asparagus cochinchinensis(Lour.)Merr.]成熟叶片富含多糖、多酚、蛋白质及其他次生代谢物质的特点,采用改良CTAB法对其基因组总DNA进行提取,并对DNA进行质量检测。结果表明,改良CTAB法可从天门冬成熟叶片中获得纯度高、完整性好的总DNA,其OD260 nm/OD280 nm为1.86,OD260 nm/OD230 nm为2.36,浓度为390μg/mL,产率达11.7μg/g,多糖、多酚和RNA杂质被去除干净,无降解现象,说明该方法提取的天门冬基因组总DNA质量较高。     

罗汉果组培苗种植关键技术

罗汉果Siraitia grosvenorii (Swingle)C.Jeffrey ex Lu et Z.Y.Zhang是单性、雌雄异株的葫芦科,罗汉果属多年生藤本植物,又名拉汗果、假苦瓜、光果木鳖等,以果实入药,是我国常用大宗中药材之一,应用历史悠久,历代本草均有记载.罗汉果性凉、味甘,归肺、大肠经,具有清热润肺,利咽开音,滑肠通便等功效,主治肺热燥咳,咽痛失音,肠燥便秘[1].作为中国特有的珍贵药用和甜料植物,罗汉果主要产于广西永福县、临桂县和龙胜县等地.罗汉果果实含多种甜苷,其中甜苷V为世界上最强的非糖甜味物质之一,是蔗糖甜度的300～400倍,广泛应用于食品、保健品和药品中,是糖尿病人、肥胖者和高血压患者的理想糖替代品[2].     

从狼毒大戟中克隆蓖麻烯合成酶基因

本研究采用RACE-PCR技术从狼毒大戟(Euphorbia fischeriana Steud.)根中克隆到一个蓖麻烯合成酶(casbene synthase)基因,命名为EfCS(GenBank登录号为:JN862821)。该基因长1969bp,编码602个氨基酸,具有典型的萜类合成酶的基因结构。对CS基因编码氨基酸序列进行生化特性分析发现其理论等电点为5.36,分子量为69.3648kD。通过疏水性分析,发现CS整体表现为亲水性。进行导肽分析结果发现其具有叶绿体导肽。二级结构预测表明,CS蛋白由α-螺旋、延伸链、β-转角和随意卷曲构成,它们分别占到64.95%、6.64%、3.16%和25.25%。另外,对CS蛋白质进行三级结构预测,发现蓖麻烯合成酶属Ⅰ类萜类合成酶。     

罗汉果葡萄糖基转移酶基因的克隆及原核表达

 从罗汉果（Siraitia grosvenorii）转录组中获得一条与罗汉果甜苷Ⅴ生物合成相关的葡萄糖基转移酶（UDPG）的unigene片段,以罗汉果授粉后70 d的果实RNA为模板,利用RACE和RT-PCR技术克隆UDPG全长基因,将克隆得到的SgUDPG1基因连接到原核表达载体pEASY-E1上,构建融合表达载体,转化到大肠杆菌BL21（DE3）,通过IPTG诱导表达,重组蛋白纯化,SDS-PAGE检测表达产物以及Western-blotting和质谱鉴定蛋白产物。结果表明,获得了1条SgUDPG1,全长为1 959 bp,开放阅读框ORF为1 365 bp,编码1条454 aa的肽链,理论分子量为51.2 kD,等电点为5.39,具有植物中次生代谢产物糖基转移酶特有的保守结构域PSPG-box motif。SgUDPG1在授粉后50 d和70 d的果实中表达逐渐升高,是对照授粉后3 d的5.16倍和13.12倍,与果实中甜苷Ⅴ含量呈相同趋势。此基因的ORF可以在大肠杆菌中表达,并且可以纯化出比理论分子量大5.3 kD的融合蛋白,通过Western-blotting和质谱鉴定,确定该蛋白属于罗汉果葡萄糖基转移酶。     

黑草仿野生生态栽培技术

黑草(Buchnera cruciatas Hamilt.)属玄参科黑草属1 a生药用草本植物,又名鬼羽箭、黑骨草,因晒干后全草变成黑色,故山区药农称其为黑草.以全草入药,味淡、微苦、性凉,具有清热解毒、凉血止血的功能、主治流感、伤寒、斑痧、癫痫、风疹、荨麻疹、高血压、中暑腹痛、皮肤风毒肿痛、蛛网膜下腔出血等症.     

罗汉果甜苷Ⅴ合成生理规律的研究

【目的】探讨罗汉果甜苷Ⅴ合成生理规律.【方法】通过不同品种以及遮阴、气调贮藏、低温贮藏比较试验,分析罗汉果苷类和糖类代谢的关系,以及光合作用、呼吸作用、温度对它们代谢的影响.【结果和结论】不同品种罗汉果和遮阴果实均在30 d时只含罗汉果苷ⅡE、苷Ⅲ,蔗糖、葡萄糖含量较低,30~70 d时罗汉果苷ⅡE、苷Ⅲ迅速减少、消失,蔗糖、葡萄糖含量持续升高,甜苷Ⅴ出现并急剧积累接近最高含量,70~90 d时仅含甜苷Ⅴ,蔗糖含量继续升高,葡萄糖含量则明显下降;但是,光合速率高的品种果实葡萄糖和甜苷Ⅴ含量也高;遮阴使叶片光合速率降低,果实葡萄糖和甜苷Ⅴ含量却均升高;气调和低温贮藏均促进果实葡萄糖积累,而抑制甜苷Ⅴ合成.这些结果表明,罗汉果甜苷Ⅴ由低糖苷与葡萄糖逐渐结合转化而来,通过调控生育后期叶片光合速率与果实呼吸来增加葡萄糖量不能促进其合成积累,其合成积累所需葡萄糖量是充足的,主要限制因子可能是低糖苷量和合成关键酶活性.     

钩藤生根壮苗培养基优化及移栽基质的筛选

以钩藤无菌茎尖组培苗为试验材料,研究不同基本培养基、不同激素配比对钩藤生根壮苗的影响;同时以优良的组培苗为试验材料,搭配不同比例的基质,研究其对钩藤组培苗移栽成活率和生长状况的影响。结果显示,1/2 MS+0.2 mg/L NAA+0.2 mg/L I BA激素组合的培养基生根壮苗效果最好,所发的新根粗壮,根长适中,根数较多,最适于炼苗移栽;移栽基质以体积比2∶1∶1的塘泥∶育苗土∶蛭石较佳,移栽成活率可达90%以上,且生长状况最佳。     

三七避雨栽培关键技术

三七是我国特有的名贵中药材,药用价值高,广泛应用于药品、保健品和化妆品中,近年来市场需求量不断攀升,发展前景看好。生长环境的特殊性和品种的单一性导致三七极易孳生多种病害,严重制约三七产业的健康发展。在开展三七基础研究和生产实践的基础上,开展三七避雨栽培试验,取得了很好的防病效果,达到了增加产量和改善品质的目的;对三七避雨栽培关键技术进行总结,以期为其规模化良好农业规范(good agricalture practice,GAP)种植提供依据。     

我国植物细胞核雄性不育基因研究进展

目前我国植物细胞核雄性不育基因方面的研究主要包括对不育材料遗传性状的观察、分子标记与定位、基因表达、调控及克隆、转基因、生产应用和常规育种等。对植物细胞核雄性不育基因方面的研究进行了综述概括,并对其研究及应用前景和发展方向进行了论述展望。