不同胁迫博落回根中生物碱含量变化及相关基因表达量分析

本研究通过对PEG6000模拟干旱以及机械受损等方法胁迫博落回,采用HPLC方法检测博其根中原阿片碱、别隐品碱、血根碱、白屈菜红碱的含量,结果 30%PEG6000模拟干旱以及机械受损均可使博落回根中终产物生物碱血根碱、白屈菜红碱含量上升,中间产物原阿片碱、别隐品碱含量下降;且血根碱、白屈菜红碱合成基因DBOX、P6H表达量上调;用实时荧光定量RT-PCR检测生物碱合成相关基因的表达量,血根碱、白屈菜红碱合成基因DBOX、P6H表达量上调。适当干旱以及机械受损有利于博落回根中血根碱、白屈菜红碱积累,为其在干旱、石漠化地区种植以及在种植过程中结合家畜喂养提供理论依据。     

博落回中季铵类苯并啡啶类生物碱的提取及其硫酸氢盐的抗菌活性和急性毒性

采用酸提碱沉的方法,从博落回中提取并制备了苯并啡啶类生物碱(QBAs)——血根碱(sanguinarine)和白屈菜红碱(chelerythrine)的硫酸氢盐;采用高效液相色谱法测定了2种生物碱的含量;初步测定了其硫酸氢盐对几种常见病原菌的抗菌活性,并对其急性毒性进行了研究。结果表明:所制备的QBAs硫酸氢盐中血根碱和白屈菜红碱的质量分数均在60%以上。生物测定结果表明,该生物碱的硫酸氢盐对葡萄叶斑病菌Cercospora viticola、葡萄黑豆病菌Elsinoe ampelina、葡萄炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides、葡萄褐斑病菌Cercospora viticola、稻瘟病菌Pvricularia oryzae、小麦赤霉病菌Gibberella zeae和辣椒疫霉Phytophythora capsici均具有较强的抑制作用,EC50值在3.35～10.08 μg/mL之间。其急性毒性属低毒,对皮肤有弱致敏性,但对眼睛有重度刺激性。博落回中QBAs硫酸氢盐制备方法稳定,具有较强的抗菌活性,可考虑开发成低毒、环境友好型植物源杀菌剂。     

博落回提取物对3种麦蚜的生物活性

采用浸渍法测定了博落回提取物（MCE）对不同龄期麦长管蚜、禾谷缢管蚜、麦二叉蚜的生物活性。结果显示,博落回提取物对不同龄期3种麦蚜均有一定杀虫活性,对麦长管蚜、禾谷缢管蚜、麦二叉蚜4龄有翅若蚜48 h致死中浓度LC50?分别为8.185 1、5.313 5、2.682 4 g/L,有翅成蚜48 h LC50?分别为8.575 0、6.614 7、0.590 4 g/L,毒力大小均为：麦二叉蚜＞禾谷缢管蚜＞麦长管蚜,麦二叉蚜对博落回提取物最敏感。研究结果为进一步开展博落回对麦蚜活性组分的分离纯化奠定了基础。     

博落回愈伤抗除草剂Bar基因的转化以及抗性功能的检测

本研究成功建立了一个全新的以博落回愈伤为外植体的遗传转化体系。该遗传体系将抗草丁膦的Bar基因整合到pcambia2301质粒,构建植物载体,通过农杆菌介导转染博落回愈伤,选用Bar基因为筛选标记,采用PPT进行筛选,对转染的愈伤和组培苗用PCR、RT-PCR、GUS染色等方法验证为阳性,获得了抗除草剂的博落回植株。该遗传体系相比以叶片为外植体、抗生素为筛选标记的遗传体系,更能加快转化时间,缩短转化周期,而且假阳性更低,对于博落回生物学研究具有一定帮助。