辽宁省猪血凝性脑脊髓炎流行病学调查与分析

从辽宁省各地区采集猪血清样本和HEV感染疑似病例脑组织样品,进行HEV抗体和病原学检测,结果910份样品中有451份呈现HEV抗体阳性反应,阳性率为49.6%;23份疑似病料检测HEV阳性率为73.91%,多与PRRSV等病原混和感染.依据临床样本资料和检测结果综合分析表明,辽宁省各地区普遍存在HEV感染,主要为隐性感染,发病猪均为45日龄以下仔猪.通过检测猪血清HEV抗体效价,可以判断HEV感染状态,为养猪场制定相应的防制措施提供依据.     

丙泊酚静脉麻醉与安氟醚吸入麻醉在巴马小型猪体外循环中的比较研究

为探讨丙泊酚静脉麻醉与安氟醚吸入麻醉在巴马小型猪体外循环(CPB)中的麻醉效果,本研究选用巴马小型猪10头,平均分成2组,分别进行丙泊酚静脉麻醉和安氟醚吸入麻醉;开胸后进行全血肝素化处理,分别于升主动脉、上腔静脉和下腔静脉插管,连接体外循环机进行CPB;观察并记录麻醉诱导前(T0)、麻醉诱导后(T1)、CPB前即刻(T2)、降温至30 ℃(T3)、阻断主动脉前即刻(T4)、阻断主动脉后4 min(T5)、开始复温即刻(T6)、停CPB即刻(T7)、关胸后即刻(T8)及手术结束拔管后10 min(T9)10个时间点各组试验猪的生命体征、鼻温(NT)、心率(HR)、平均动脉压(MAP)、pH及血氧饱和度(SPO₂)指标。结果2组试验猪于CPB实施前后的基本情况如体重、手术时间和麻醉时间等指标均无显著性差异(P＞0.05);安氟醚组恢复自主呼吸的时间显著短于丙泊酚组(P＜0.05);与T0和T1相比,各组试验猪在CPB进行时其NT、HR和MAP值均显著降低(P＜0.05);但各组间及组内SPO₂和pH差异不显著(P＞0.05)。由此可见,丙泊酚静脉麻醉与安氟醚吸入麻醉均可用于巴马小型猪CPB中的麻醉。选用丙泊酚时,应根据手术过程中试验动物的反应情况适当调整用量;而安氟醚麻醉过程相对平稳,麻醉效果好,术后苏醒快,适合情况复杂且时间较长的手术。     

巴马小型猪在辽宁地区的适应性观察及血液生理生化指标检测

从广西巴马瑶族自治县引进巴马小型猪20头,进行饲养繁殖,观察其在东北环境下的适应性及血液生理生化指标的变化.经过2年的观察与检验,证实引进的巴马小型猪适应性良好,繁殖性能正常,性成熟期为2～3月龄,妊娠期为114～120 d,初产仔猪数为3～7头,经产仔猪数为5～10头,产仔猪数与母猪体重呈正相关(R²=0.96).血液生理生化指标检测结果显示,与巴马原种厂提供的数据相比,白细胞数(WBC)、血红蛋白(HGB)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、尿素(Urea)、肌酐(Cr)、磷酸肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖定量试验(GLU)、总胆固醇(T-Ch)、甘油三酯(TG)、胆碱酯酶(CHS)、Na、Cl、淀粉酶(AMS)和二氧化碳结合力(CO₂CP)均有显著差异(P<0.05),其余指标差异均不显著(P>0.05).结果表明由辽宁省饲养并繁殖的巴马小型猪的血液生理生化指标与人类具有一定的相似性,可以为辽宁地区试验应用巴马小型猪提供参考依据.     

新生Wistar大鼠海马神经细胞的体外培养与鉴定

为探讨原代Wistar大鼠海马神经细胞的体外培养方法,本研究取新生24 h内的Wistar大鼠海马组织,无菌剪碎后采用胰酶消化法分离细胞,用含20%胎牛血清的DMEM/F12培养基培养,逐日在倒置相差显微镜下观察。结果发现,从海马组织中分离出的神经细胞具有增殖能力,细胞对数生长期为2~8 d,最长培养30 d;细胞经免疫荧光鉴定Nestin表达呈阳性;免疫组织化学结果显示,在传代培养细胞的胞体和突起均有NF阳性标记物,GFAP抗体和CD68抗体显色均为阴性。由此可见,分离培养的细胞是具有自我更新增殖和多分化潜能的神经元细胞。     

巴马小型猪在达芬奇机器人手术系统中的麻醉管理

为探讨巴马小型猪在达芬奇机器人微创手术中的麻醉管理策略,以丙泊酚麻醉作诱导,异氟醚维持麻醉的复合麻醉方法对巴马小型猪进行全身麻醉,同时用达芬奇机器人对其分别进行心脏、肺脏、肝脏和胃的微创手术,于术前、术中及术后监测巴马小型猪动脉血气和血流动力学变化。结果各组试验猪均顺利完成手术,手术平均时间(166±34)min,麻醉时间(181±38)min,气胸(气腹)时间(122±33)min,在整个麻醉过程及苏醒过程中,各组试验猪安全平稳,未出现体动表现。由此可见,该麻醉方法可用于达芬奇机器人手术系统,且为人医临床应用中的麻醉管理奠定基础。     

羔羊外周血单个核细胞转化MTT比色法最佳检测条件的筛选

为了建立羔羊外周血单个核细胞转化检测的MTT比色法,对影响MTT比色法的3个主要因素(包括刺激原、细胞浓度、培养时间)进行了探索性的研究.结果表明,MTT法检测的最佳条件为:植物血凝素(PHA)浓度为10 pg/mL,细胞密度为1×107个/mL;或者刀豆蛋白A(ConA)浓度为40μg/mL,细胞密度为2×107个/...     

猪血凝性脑脊髓炎病毒的血清学调查

应用血凝和血凝抑制试验检测了从辽宁省部分地区采集的猪血清中血凝性脑脊髓炎病毒（HEV）的抗体滴度。结果表明,368份血清样品中,有162份呈抗体阳性反应,阳性率高达44.0%。被采集血清的猪未表现出临床症状,说明该地区存在血凝性脑脊髓炎病毒的隐性感染。     

巴马小型猪骨髓来源内皮祖细胞的培养鉴定及生物学特性分析简

为探索并建立巴马小型猪骨髓来源内皮祖细胞(EPCs)的体外培养及鉴定方法,本研究在健康猪髂后上棘取骨髓,采用密度梯度分离法分离单个核细胞,按2×10⁷个/孔的密度加入预先包被人纤维连结素（HFN）的6孔细胞培养板中,用含内皮细胞生长因子的选择性培养基诱导培养,逐日在倒置相差显微镜下观察,MTT法检测EPCs增殖情况;流式细胞术（FACs）检测EPCs中AC133和vWF的表达纯度;免疫荧光法双染检测EPCs表面相关抗原ac-LDL和UEA-1。结果发现,从巴马小型猪骨髓分离的EPCs具有增殖能力;MTT结果显示细胞于48 h换液二次贴壁后3～5 d增殖明显,7～10 d增殖加速并出现条索状结构;FACs检测结果显示,二次贴壁细胞vWF阳性细胞百分率74.91%,AC133阳性细胞百分率79.54%,而未经诱导的二次贴壁细胞vWF和AC133阳性率分别是33.65%和39.87%;细胞经免疫荧光双染后Dil-ac-LDL和FITC-UEA-1表达呈阳性,vWF和AC133免疫荧光染色阳性。由此可见,分离培养的细胞具有自我增殖和分化潜能,是内皮祖细胞。     

雏鸡大肠埃希菌的分离鉴定及药敏试验

对长春市某鸡场送检的10只2日龄疑似患大肠埃希菌病死亡的雏鸡进行了实验室诊断。无菌采集病死鸡的心、肝、脾、肺、肾等组织,通过细菌检测、PCR鉴定、生化试验、血清型鉴定、动物回归试验等系统鉴定,确定其为大肠埃希菌。分离菌药敏试验结果表明,该菌株对复方新诺明、庆大霉素、链霉素等药物敏感,对丙氟哌酸、恩诺沙星、氨苄青霉素、左氟沙星等大多数抗菌药物高度耐药。     

猪血凝性脑脊髓炎病毒RT-PCR方法的建立及初步应用

为了建立快速检测猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)的RT-PCR方法,根据GenBank中HEV的HE基因和S基因设计了1对引物,在优化RT-PCR反应条件的基础上,成功的扩增出323bp的特异性条带。检测与HEV亲缘性较高的牛冠状病毒及猪的伪狂犬病毒均为阴性,最低可以检测到10个TCID50/100μl的病毒,说明该方法的有较好的特异性和敏感性。用此RT-PCR方法对感染HEV的小鼠和猪进行检测,结果能从发病动物的多种组织中检测到病原,其中以脑组织的检出率最高。因此,临床疑似病例检测时以脑组织为最佳检测样本。