全细胞催化剂pelB⁃Xln⁃DT构建及其在水解三七皂苷R1中的应用

设计带有EcoRV和XhoI酶切位点的上下游引物PCR扩增嗜热菌Dictyoglomus thermophilum DSM 3960的GH39家族的β-木糖苷酶Xln-DT编码基因,利用基因拼接技术将其重组至p ET-20b质粒中pelB信号肽基因的下游,重组质粒转化大肠杆菌表达宿主Escherichia coli BL21,构建分泌融合表达型基因工程菌pelB-Xln-DT。经异苯基-β-D-硫代半乳糖苷诱导,pelB-Xln-DT酶活为2.1 U/m L。粗酶液pelB-Xln-DT的最适温度为85℃,较原酶提高了10℃,最适p H为5.5,比原酶降低了0.5; pelB-Xln-DT在85℃下的热稳定性比原酶有了一定提高,保温1 h后酶活基本不变,保温2 h其剩余酶活为82.0%,而Xln-DT在85℃下保温1 h后其剩余酶活为70.4%;在p H 4.0～7.0的范围内,pelB-Xln-DT具有良好的p H稳定性。引入pelB信号肽后不但能够提高蛋白的可溶性表达,还能提高酶蛋白的热稳定性。以pelB-Xln-DT作为全细胞催化剂转化三七皂苷R1生成人参皂苷Rg1,研究了转化温度、转化时间、三七皂苷R1添加量、重复次数等因素对转化效率的影响。结果表明,全细胞催化剂用量1.0 U/m L,在温度37℃下,3 g/L的三七皂苷R1反应3 h后的摩尔转化率达到91.6%,重复利用10次后,转化率仍能达到46.7%,显示出pelB-Xln-DT良好的重复催化性能。     

SAS软件在果树试验数据系统聚类分析中的应用

SAS软件是计算机统计分析中常用的应用软件,在科学研究中有着广泛的应用。通过使用SAS软件对27个梨不同品种（系）抗寒性数据进行了聚类分析,详细阐述了其SAS软件实现过程,进而探讨了SAS软件在果树实验数据分析中的应用。     

高职计算机基础课的教学思考与实践探索

针对高职学生计算机基础课的学习现状，结合日常教学思考与实践，提出了四点应用方法和策略，以期能够促进高职计算机基础教学。     

都市农业的技术特征及其技术创新研究

从都市农业的技术特征研究入手,提出了以合作创新为主、自主创新和模仿创新为辅的技术创新模式结构,并且为实现这一模式提供了选择路径。     

苏云金杆菌发酵过程的代谢研究

测定了苏云金杆菌发酵过程中总核酸,菌数、总糖、还原糖、溶磷、氨基氮、pH和溶氧的变化。核酸曲线与苏云金杆菌典型生长曲线的形状相似,随培养基浓度而增减,因此认为发酵液的核酸含量可以反映菌体数量。在发酵罐发酵条件下,A、B配方培养基在发酵结束时的残糖分别为起始浓度的62.75％和66.6％,表明碳源的供给是充裕的,但溶氧和溶磷在对数生长期都降至很低水平,启示调整溶氧,增加溶磷可能与进一步提高发酵菌数密切相关。