全细胞催化剂pelB⁃Xln⁃DT构建及其在水解三七皂苷R1中的应用

设计带有EcoRV和XhoI酶切位点的上下游引物PCR扩增嗜热菌Dictyoglomus thermophilum DSM 3960的GH39家族的β-木糖苷酶Xln-DT编码基因,利用基因拼接技术将其重组至p ET-20b质粒中pelB信号肽基因的下游,重组质粒转化大肠杆菌表达宿主Escherichia coli BL21,构建分泌融合表达型基因工程菌pelB-Xln-DT。经异苯基-β-D-硫代半乳糖苷诱导,pelB-Xln-DT酶活为2.1 U/m L。粗酶液pelB-Xln-DT的最适温度为85℃,较原酶提高了10℃,最适p H为5.5,比原酶降低了0.5; pelB-Xln-DT在85℃下的热稳定性比原酶有了一定提高,保温1 h后酶活基本不变,保温2 h其剩余酶活为82.0%,而Xln-DT在85℃下保温1 h后其剩余酶活为70.4%;在p H 4.0～7.0的范围内,pelB-Xln-DT具有良好的p H稳定性。引入pelB信号肽后不但能够提高蛋白的可溶性表达,还能提高酶蛋白的热稳定性。以pelB-Xln-DT作为全细胞催化剂转化三七皂苷R1生成人参皂苷Rg1,研究了转化温度、转化时间、三七皂苷R1添加量、重复次数等因素对转化效率的影响。结果表明,全细胞催化剂用量1.0 U/m L,在温度37℃下,3 g/L的三七皂苷R1反应3 h后的摩尔转化率达到91.6%,重复利用10次后,转化率仍能达到46.7%,显示出pelB-Xln-DT良好的重复催化性能。     

黑曲霉全细胞生物催化制备没食子酸丙酯的研究

利用黑曲霉(Aspergillus niger)细胞作为全细胞生物催化剂,研究了催化没食子酸生成没食子酸丙酯的条件,探讨了有机溶剂、细胞预处理、底物浓度、反应时间和水分含量等因素在酶催化没食子酸丙酯合成中的影响,结果表明,苯是最佳溶剂,而菌丝体的含水量在80％时得率最高.在此基础上,选择菌丝量、没食子酸浓度、正丙醇体积分数和反应时间进行了正交试验,在200 r/min、40℃的转化条件下得到的较佳催化组合为:25 mL锥形瓶中加入10 mL苯、0.5g菌丝、7 mmol(0.012 7 g)没食子酸、7.3 ％(0.73 mL)正丙醇组成的有机催化体系中,反应18h,没食子酸丙酯得率达到36.4％.该过程无需要纯化或者固定化酶,实现了没食子酸丙酯低成本、高得率的催化.     

分子生物学技术在担子菌中的研究进展

担子菌有较高的经济价值和研究价值，近年来，随着分子生物学在担子菌中的深入研究，担子菌的品质、产量、栽培效率和利用价值得到进一步提高。本文从分子标记技术和转化系统两个方面重点阐述讨论担子菌在分子生物技术的研究进展及应用前景。     

露地韭菜无公害栽培技术探析

近年来,露地韭菜发展较快,与保护地栽培相比,具有投资少、收获茬次多、供应市场时间长的特点,根据多年生产实践,提出了露地韭菜无公害栽培技术。     

固阳县 厚植生态底色 守护绿水青山

<正>初夏时节，早晚仍能感受到一丝凉意。走进固阳县协和义村至七分子村10万亩乔木林区，举目四顾，头顶阳光明媚，枝头绿意盎然，脚下青草如茵。固阳县位于内蒙古中西部、包头市正北方，地处大青山北麓、黄河上中游地区，土地总面积5025平方公里，总人口19.7万，其中农业人口16.8万。县域南部大青山山峦起伏，中部滩川交错，北部丘陵广布，全县地形被形象地描述为“四分丘陵五分山，只有一分是滩川”。历史上固阳县属茂明安部，