非洲猪瘟病毒核酸定性检测方法比对

为提升兽医实验室非洲猪瘟病毒核酸检测能力和质量控制水平,积累检测经验,以更好地开展非洲猪瘟检测,2020年7月,参加了北京市农业农村局组织的“非洲猪瘟实验室检测能力比对”项目。本次比对同时选用《非洲猪瘟检疫技术规范》(SNT 1559—2010标准)中的普通PCR方法、荧光定量PCR方法以及商品化试剂盒,对5份验证样品开展非洲猪瘟病毒核酸检测和结果比对。比对发现,3种检测方法结果一致,样品检测结果与预期一致,结果满意。此次比对确认了实验室现有检测方法能够满足非洲猪瘟病毒核酸的日常检测需求,同时提升了实验室人员的检测能力,积累了检测经验,可为非洲猪瘟防控提供有力的技术支撑。     

非洲猪瘟自然弱毒株演变进程

自2018年非洲猪瘟(African swine fever,ASF)传入中国以来疫情得到了有效控制。但2021年以后,我国的ASF流行情况出现了新的变化,临床中出现了“自然变异株”。这些毒株可能导致感染后临床症状不典型,容易与其他疫病混淆等问题。这与国外的流行演变规律一致,即当ASF在一个国家或地区流行较长时间后,其临床表现将由急性发病转变为缓慢发病或出现新的临床表现。经过多年的观察积累,国外已经对该病毒的流行规律特别是自然弱毒株的演变进程有了大量记载,但国内目前尚无这方面的描述。为此,就ASF自然弱毒株的演变进程进行综述,从而提出加强血清学诊断产品研发、加快产业化报批进程、适时开展血清学监测追溯等建议,以期为我国ASF科学防控提供参考。     

“1237”P氏生物安全立体非洲猪瘟防控体系

在目前非洲猪瘟疫苗毒株、变异毒株、野毒株并存背景下,只做好外部生物安全已不足以达到防控非洲猪瘟的目的。因疫苗毒株隐蔽性强、检测难度大,不知道通过引种是否会将疫苗毒株带到猪场。因此,未来猪场生物安全不能只关注场外生物安全,更重要的是要运用“以猪为本”的“1237”P氏生物安全立体非洲猪瘟防控体系,即在做好“控五流”等外部生物安全的同时,更要关注饮水安全、注重猪的自身健康度、提高猪的非特异性免疫力,才能实现“与非共存,与蓝共舞”。所谓“立体防控”是指全方位的防控,而不是仅仅针对猪场大门的传统生物安全防控。     

非洲猪瘟疫苗研究的困境和展望

非洲猪瘟（ASF）目前是生猪产业最重要的猪病。因为非洲猪瘟病毒（ASFV）本身的复杂性,以及和宿主相互作用的复杂性导致ASF已经被报道一百年了,还没有商业化疫苗。理想的ASF疫苗不仅要有好的免疫保护性,更重要的是其安全性,同时如果能区分野毒感染和疫苗接种,能在适合的高质量GMP车间进行稳定低价的生产,能用于不同物种就更好了。ASF灭活疫苗研制这条道路似乎不通;亚单位疫苗、DNA疫苗、病毒活载体疫苗的免疫保护能力不足;主要包含自然缺失、传代致弱、基因工程缺失的减毒活疫苗在免疫保护方面体现了非常大的优势,但是其潜在的持续感染风险,会造成猪只的副作用,包括皮肤溃烂、关节炎,导致神经系统、呼吸系统的损伤等问题非常值得警惕。复制缺陷单周期病毒能有效地解决减毒活疫苗的安全性问题,似乎是一个值得尝试的ASF疫苗研制方向,尽管存在难以确定缺失复制相关的基因,以及难以构建能高效表达缺失基因编码蛋白,且能让单周期病毒稳定大量生产的辅助细胞系。我国针对ASFV强毒的精准剔除策略,未注册非法弱毒苗造成临床严重损失,以及一些不使用疫苗但成功从国家层面净化ASF的案例,让我们认识到针对ASF基础研究的重要性。同时至少目前阶段,ASF的防控不一定要借助疫苗,更多的要做好生物安全管控和区域ASF净化。尽管ASF疫苗研制困难重重,但针对ASF理想型疫苗的研制也应该持续进行下去,未来可能作为ASF防控的一个突破点。     

网络教学平台的流媒体技术

本文介绍了流媒体技术的概念、基本原理及其在网络教学中的应用,提出了基于流媒体技术的远程教学系统的基本结构和解决方案。     

含非洲猪瘟病毒核酸序列病毒样颗粒的研制及其在检测方法中的应用

非洲猪瘟（African swine fever,ASF）是由非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）引起的烈性传染病,为了保证其检测结果的准确性和可靠性,需要研制试剂盒中使用的阳性标准质控品。本试验旨在研制含ASFV核酸序列的病毒样颗粒,并探究其在检测方法中的应用。首先扩增p72基因的全长片段,利用昆虫杆状病毒系统,包装出含有p72基因的ASF DNA病毒样颗粒。为了进一步验证该病毒样颗粒在应用中的可靠性,本研究将病毒样颗粒与ASF的组织毒及细胞毒同时进行DNA核酸提取,进行实时荧光定量PCR。结果表明,本研究制备的病毒样粒子能很好的取代ASFV在实时荧光定量PCR检测方法中作为阳性质控品,且能对核酸提取过程进行质控,实时荧光定量PCR检测试剂盒中,病毒样粒子的最低包装浓度为10² TCID₅₀。进一步研究发现该病毒样颗粒也适用于普通PCR及LAMP检测方法中,最低浓度分别为10³和10¹ TCID₅₀。本试验结果将为规范ASF检测方法,促进ASF检测方法的转化应用及保证检测结果的准确度和可靠性提供科学依据。     

平凉市生猪屠宰企业实验室非洲猪瘟检测能力比对结果分析

为了进一步评估生猪屠宰企业非洲猪瘟检测在生猪屠宰“两项制度”落实中发挥的积极作用,提升生猪屠宰企业非洲猪瘟自检能力,落实非洲猪瘟常态化防控措施。2020年平凉市10家生猪屠宰企业先后3次参加了省、市动物疫控机构组织的非洲猪瘟病毒核酸荧光PCR检测能力比对工作。结果显示:3次能力比对结果准确率分别为78%、84%和96.6%,并有逐次提高的趋势,有3家生猪屠宰企业3次非洲猪瘟病毒核酸检测比对结果均符合标准,占屠宰企业总数的30%,有7家生猪屠宰企业在3次比对中结果还不稳定,企业之间比对结果存在差异,对10家生猪屠宰企业3次非洲猪瘟病毒核酸检测能力比对结果影响因素综合分析结果表明,生猪屠宰企业实验室标准化程度越高、检测人员文化程度越高、屠宰企业管理越严格,非洲猪瘟检测能力比对结果越稳定,准确率越高。     

非洲猪瘟的研究进展及防控措施

非洲猪瘟是一种致死率极高的猪烈性传染病,文中阐述该病病毒特性、临床症状、病理变化等特点,结合欧洲对该病的防控手段,提出对非洲猪瘟的防控策略,一方面严防严控该病进入国内,另一方面对疫病暴发要提前准备,迅速控制。     

新疆乌鲁木齐市一起非洲猪瘟疫情的紧急流行病学调查

2019年4月,新疆乌鲁木齐市某生猪养殖合作社暴发非洲猪瘟疫情。为查明疫情可能来源及扩散范围,科学指导疫情处置工作,通过现场调查、问卷调查与访谈、采样检测等方式,对该合作社及流行病学相关场点开展了紧急流行病学调查。溯源调查发现,此次疫情由调运的生猪及车辆机械性带毒引发可能性最大;追踪调查结果显示,疫情局限于该养殖合作社,但对屠宰场有污染。调查结果提示,应提高养殖户生物安全意识,完善车辆洗消制度,严格调运和屠宰环节的检疫监管。     

吸血性节肢动物在非洲猪瘟病毒传播过程中可能扮演的角色

非洲猪瘟自2018年冬季从国外传入,给国内的生猪产业造成毁灭性打击,已造成大量生猪死亡和众多养殖户恐慌。尽管非洲猪瘟已被世界动物卫生组织列为法定上报疾病之一,但是市面上尚无有效的治疗药物和疫苗,故国际上针对该病的防制措施仍停留于消灭传染源、切断传播途等物理防御。据文献记载,非洲猪瘟病毒可由某些吸血性节肢动物所传播,故清楚这些吸血性节肢动物在病毒传播过程中所扮演的角色对预防和控制非洲猪瘟的爆发和流行有着重大的意义。文章就国内几种常见的吸血性节肢动物在非洲猪瘟病毒传播中可能扮演的角色进行阐述,以便更好地切断其传播途径。