红螯螯虾卵黄蛋白原VWD结构域的原核表达及纯化

【目的】原核表达红螯螯虾（Cherax quadricarinatus）卵黄蛋白原（Vg）VWD结构域,为深入开展Vg的生物学功能研究和开发相应的生物活性物质提供技术支持,也为改进虾类养殖催熟及获取高质量后代打下基础。【方法】在GenBank中搜索红螯螯虾卵Vg的mRNA序列（AF306784.1）及查找其VWD结构域（2345~2491 aa）,采用ExPASyProtParam、ProtScale、InterProscan及TMHMM等在线软件进行生物信息学分析及理论评估,结合大肠杆菌密码子偏好优化原始VWD氨基酸序列;然后通过全基因合成获得目的基因,连接至载体pET-28a构建重组质粒pET-28a-VWD,挑取阳性克隆转化大肠杆菌BL21（λDE3）感受态细胞及采用IPTG进行诱导表达,并以10% SDS-PAGE电泳和Western blotting检测诱导表达的融合蛋白。【结果】红螯螯虾VWD结构域相对分子量为19692.11 Da,理论等电点（pI）为9.35,分子式为C₈₅₅H₁₃₃₄N₂₅₈O₂₆₁S₉,属于不稳定的亲水性蛋白,不含跨膜结构域。延伸链和无规则卷曲是红螯螯虾VWD结构域二级结构的主要元件,其中,α-螺旋占7.73%,β-转角占10.50%,延伸链占35.91%,无规则卷曲占45.86%。重组质粒pET-28a-VWD经大肠杆菌BL21（λDE3）感受态细胞诱导表达即获得融合蛋白VWD,以2 mol/L盐酸胍溶解和Ni-NTA亲和层析纯化及复性后,10% SDS-PAGE电泳和Western blotting检测均在蛋白相对分子量约20.0 kD处出现1条清晰的特异性条带,融合蛋白VWD表达形式以包涵体为主。融合蛋白VWD在BL21（λDE3）感受态细胞中高效表达的最佳诱导条件:当单克隆菌液OD_{600 nm}达0.6时添加0.5 mmol/L IPTG,置于20℃下诱导培养16 h。纯化后的融合蛋白VWD浓度为1.32 mg/mL。【结论】通过全基因合成获得的优化红螯螯虾VWD基因能在大肠杆菌BL21（λDE3）感受态细胞中诱导表达出以包涵体为主要形式的融合蛋白,经盐酸胍溶解和Ni-NTA亲和层析柱纯化及复性即可获得高纯度的活性VWD蛋白,为后续开展红螯螯虾Vg生物学功能研究及开发相应的生物活性物质提供技术支持。     

棉铃虫发生及灾变规律研究

导致棉铃虫大发生的基本条件是食物链,包括物候、作物布局、栽培耕作制度、棉花生育状况;影响其种群基数的因素有抗药性、天敌的自然控制、防治质量等;决定是否大发生的关键因子是虫情基数和气候等。虫情基数是内因,适宜的气候条件是外因,二者是导致棉铃虫暴发的关键因子。根据荆州地区１９７０～１９９６年共２７年的虫情和气象资料,采用相关分析法,选择主要的相关因子,通过逐步回归分析,建立了第４代棉铃虫发生量及灾变预报模型：Ｙ＝１８３．３９６＋１５．５５６Ｘ２－０．３７０Ｘ１１±８４．６１８,回测正确率为７４．１％,试报１９９７年第４代发生量与实际情况相符。     

新沈试29玉米制种技术

新沈试 2 9是辽宁省农科院选育的玉米新品种。1998年通过辽宁省审定。该品种生育期 135 d,株高2 80 cm,穗位 110 cm,穗长 2 1cm,穗行数 14或 16行 ,籽粒橙黄色 ,粒型介于半马齿与硬粒之间 ,穗轴红色。它具有抗病性强、适应性广、活秆成熟、籽粒品质佳、丰产稳产等特点 ,是一个适宜推广种植的大穗型优良新品种。1　亲本特征特性1.1　母本 :幼苗叶鞘紫红色 ,叶片黄绿色 ,第一片叶椭圆形。成株健壮 ,株形紧凑 ,叶片宽短直立上冲 ,叶片有纵褶。雌雄穗发育协调 ,雄穗苞内散粉。雄花序分枝 5～ 8个 ,分枝较长 ,护颖绿色 ,花药黄色 ,花粉量较大。雌…     

环境条件对油菜品质的调控研究

油菜的品质除受基因型控制外，环境因素对其影响也很大。综合了国内外大量的研究结果，论述了主要环境条件对油菜品质的影响，以期为油菜品质调控研究提供一些参考。主要包括：（1）生态因素对油菜主要品质的影响；（2）土壤因素与矿质营养对油菜主要品质的影响；（3）主要农艺措施对油菜主要品质的影响；（4）环境因素与油菜籽粒色泽的关系。     

中国部分绵羊品种BMPR-IB基因RFLP多态性的研究

为了研究骨形态发生蛋白受体(BMPR-IB)基因对绵羊排卵控制的作用,进一步寻找与多胎绵羊相关的遗传标记,为中国地方绵羊品种繁殖性状的标记辅助选择提供一定的理论基础。以影响Booroola Merino高产性能的BM-PR-IB基因为候选基因,采用PCR-RFLP方法分析内蒙古地方品种,蒙古羊、呼伦贝尔羊、内蒙古细毛羊与中国美利奴多胎品系共206只绵羊个体的基因多态性,以及BMPR-IB基因多态性与绵羊进化的关系。结果表明:高繁殖力的中国美利奴羊多胎品系BMPR-IB基因编码序列第746位碱基处发生了与Booroola Merino绵羊相同的突变(A746G),而低繁殖力的蒙古羊、呼伦贝尔羊、内蒙古细毛羊则没有发生这种突变。     

高产多抗中强筋小麦陕512的选育研究（Ⅰ）

陕512小麦是西北农林科技大学农学院以陕麦150太谷核不育系为母本,以陕354为父本,1997年田间杂交,轮回选择结合系谱法育成,2001年出圃,2004年9月提前通过审定。因长势好、产量高,籽粒大、外观商品性好、中强筋、适口性优,抗病、抗干热风、抗穗发芽,被多家种子公司列为统供品种,迅速推广开来。该品种选育推广之快说明轮回选择是提高产量因子之间及产量、品质、抗性之间在更高水平上和谐的有效途径。     

双低油菜新品种川油20的特点及其丰产栽培技术

川油 2 0是四川省农科院作物所于 1999年选育出的又一个双低油菜新品种。该品种 2 0 0 0年通过四川省农作物品种审定委员会审定 ,并获当年四川省育种攻关后补助。由于其具有产量较高、品质优良、熟期适宜、抗逆性较强、适应性较广等特点 ,而被四川省内一些县、市纳入油菜优质化发展规划内 ,应用前景十分广阔。1　在试验和生产中川油 2 0集中表现出以下几方面的特点 :1.1　丰产、稳产1998年川油 2 0参加四川省区试 ,结果 9点试验平均公顷产 1791kg,较对照中油 82 1增产 7.47% ,达显著水平 ,其中增产点 8个 ,增产点平均公顷产 1845 kg,相应增…     

我国柑桔类水果中农药最大残留限量标准现状分析

以现行《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》(GB 2763—2019)为依据,总结了我国柑桔类水果(涉及柑、桔、橙、柠檬、柚、佛手柑、金桔等,去柄全果)中农药最大残留限量标准现状,分析了农药及其最大残留限量标准的主要变化,按用途分类列出了具体农药的每日允许摄入量及其最大残留限量,以方便使用该标准。结果表明,GB 2763—2019对柑桔类水果规定了包括艾氏剂等9种持久性农药在内的160种农药、438项最大残留限量,相比GB 2763—2016和GB 2763.1—2018,增加农药23种,增加最大残留限量222项,缓解了生产中个别登记农药及树种“无标可依”的现状;对具体树种规定的限量标准数量占柑桔类水果总限量数的81.3%,改变了以往主要实施水果大类限量的局面;佛手柑、金桔等小宗柑桔类水果的最大残留限量标准数量不足,有待于进一步加强;苯嘧磺草胺等18种农药有最大残留限量标准但无规定的检测方法,建议尽快制定相应检测方法标准。     

动模干式弯曲竹制品制造工艺

介绍了动模干式弯曲技术及其加工设备。该技术可实现一次性将竹条软化、胶合、干燥和360°圆弧弯曲无损定型,同时实现了竹质弯曲构件的免钉装配,提高了竹质弯曲制品生产的自动化和连续化水平。此外,采用内外侧同时分段加热的方式,使组合竹条受热更加均匀,减少了裂痕、开胶等现象的发生。通过调整动模干式弯曲设备加热模具的形状、尺寸、弧度,不仅实现了多层竹单板的胶接弯曲,增加了弯曲件的操作厚度,还可实现多种弧度、形状的竹材弯曲定型,操作灵活。相关加工设备包括动模干式弯曲装置和热压定型装置。通过以上设备和方法制造的竹质弯曲制品性能整体满足使用GB/T 3324—2017 《木家具通用技术条件》、GB/T 35607—2017 《绿色产品评价家具》和GB 18401—2020 《国家纺织产品基本安全技术规范》等标准相关要求。     

恩施州不同海拔下烤烟中性致香物质含量分析

以烤烟品种K326、云烟87和中烟103为材料,分析了湖北省恩施州500、900和1 300m3个海拔下烤烟中性致香物质含量的差异.结果表明,海拔900m的烤烟中性致香物质不论是总量还是大多数组分的含量均较高.从单一组分来看,随着海拔的升高,大多数体现清香型风格特征的中性致香物质含量呈增多趋势,而反映浓香型风格特征的中性致香物质含量呈减少趋势.结合中性致香物质含量,对不同品种、海拔组合的9个样品进行主成分和聚类分析,可以分为3大类:第一类为中烟103-500m组合,第二类为K326-500m、云烟87-500m、K326-900m和云烟87-900m4个组合,第三类为K326-1 300m、云烟87-1 300m、中烟103-1 300m和中烟103-900m4个组合.