波尔山羊和江苏本地山羊的AFLP和RAPD分析

实验山羊共 10 5只 ,其中波尔山羊 6 0只 (公母羊各半 ,采血样 2 0个 ,组织样 4 0个 ) ,徐淮山羊 30只 (公母羊各半 ,每羊采血样 1个 ) ,海门山羊 15只 (公羊 7只 ,母羊 8只 ,每羊采血样 1个 )。分别提取DNA ,按品种构建池DNA。应用 36个选择性引物组合对波尔山羊、徐淮山羊和海门山羊种间AFLP多样性进行研究 ,其中 2 9个引物组合共扩增出 32 5 3个标记 ,包括可变标记 92个 ,平均每个引物组合扩增 3 17个标记 ,多态频率达 2 8%。可变标记数较多的引物组合为 :E0 0 ACG/M0 0 CAC(13个 )、E0 0 ACG/M 0 0 CAG(10个 )、E0 0 AAC/M 0 0 CAC(8个 )和E0 0 AAC/M0 0 ACT(7个 )。从 93个随机引物中筛选出品种间多态性较强、重复性好的引物 2 2个 ,对三个品种池DNA进行随机扩增 ,共扩增出 183个标记 ,其中可变标记 6 0个 ,平均每个引物扩增 2 73个标记 ,多态频率为 32 8%。两种方法得到一致结果 ,即徐淮山羊与海门山羊遗传距离最近 ,...     

亚胺环已酮对小鼠卵母细胞成熟和人工激活的影响

蛋白合成抑制剂亚胺环已酮不能抑制小鼠卵泡卵母细胞体外培养过程中自发的生发泡裂裂ＧＶＢＤ，但可抑制卵母细胞第一极体的释放。刚排出不久和小鼠卵母细胞（ｈＣＧ后１２－１３ｈ）体外老化培养６ｈ，卵母细胞的乙醇激活率达到８６．９％，但如果在老化过程中抑制蛋白质的合成，卵母细胞的乙醇激活率显著下降至１７．４％，亚胺环已酮与乙醇联合使用可有效地激活小鼠ｈＣＧ后１８－１９ｈ的卵母细胞，激活率与乙醇对照组无显著差异     

猪冷冻附睾精子与体外成熟卵母细胞的体外受精

研究了不同解冻温度（39－41℃，58-60℃,69-71℃)和解冻方式（干解冻、湿解冻）对猪冷冻附睾精子解冻后的活力、存活指数以及受精能力的影响。结果表明，采用同一种解冻方式，经高温解冻的精液，虽然解冻后的活力较好，但活力却下降很快，精子的存活时间和存活指数均不如低温解冻的精液。采用同一种解冻温度，湿解冻所需的解冻时间相对短，解冻后精子活力相对低，但存活时间和存活指数相应优于对应的干解冻试验组。经低温解冻的精子，受精能力最强，精子的受精能力与解冻时间呈显著正相关（r=0.91613,P=0.0103).使用改良TCM199培养液，猪受精卵和颗粒细胞单层共培养能发育至早期桑椹胚。     

双肌臀大约克种猪的应激敏感基因净化研究

应用PCR RFLPs技术对双肌臀大约克 (Ⅰ系 )、普通大约克 (Ⅱ系 )和Ⅰ系与Ⅱ系系间繁殖后代 (Ⅲ系 ) 3个选育群体的全部种猪普检应激敏感基因 (RYR1基因 )。Ⅰ系和Ⅲ系全部为阴性纯合体 ,Ⅱ系检出阳性纯合体和杂合体分别为 1头和 1 5头 ,阳性率为 1 4 2 %。对Ⅱ系的阳性个体和相同数量的阴性个体进行复检 ,其检测结果复重率达 1 0 0 %。经过系统选育 ,培育成了无RYR1基因的双肌臀大约克种猪Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ系 1 1 7、 97和 49头的育种核心群。     

禽类生殖嵌合体的制作及其应用

目前已能够运用禽类囊胚细胞 (BCs)或原生殖细胞 (PGCs)制作嵌合体。为了提高生殖嵌合体的制作效率 ,已有许多方法被采用。最近的研究表明 ,对BCs或PGCs进行同性别移植也可以提高生殖嵌合的制作效率。BCs和PGCs体外培养的成功使得嵌合体技术能够应用于禽类转基因中 ,并且 ,还可应用于珍稀鸟类的保种     

苏淮猪选育过程中繁殖性能及早期生长性能分析

苏淮猪是在新淮猪基础上培育的各方面性能更优良的新淮猪瘦肉系。本文对江苏省淮安市淮阴种猪场的苏淮猪自 1 998年下半年以来的育种资料进行了分析 ,结果表明 :苏淮猪在经过杂交和几个世代的选育后 ,所形成的新品系在其繁殖性能、仔猪早期生长性能上有了明显的变化 ;育种群中苏淮猪的繁殖性能和仔猪早期生长性能有其独特的遗传规律 ,这对以后的育种工作提供了启示     

6个猪种胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因座位遗传多态性检测

本文采用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ分析方法对我国地方猪种民猪、香猪、桃源猪、内江猪、姜曲海猪以及用作对照的国外猪种杜洛克猪的ＩＧＦ－１基因座位进行研究。结果发现：ＩＧＦ－１基因ＰＣＲ扩增片段存在２个限制性内切酶ＨｈａＩ酶切位点,其中１个酶切位点产生遗传多态。此片段上共产生２个等位基因。在ＩＧＦ－１基因位点上,香猪除与桃源猪基因频率差异不显著之外,与其它猪种之间基因频率差异极显著（Ｐ＜０．０１）,而其它各猪种之间差异均不显著     

体内外成熟与老化对小鼠卵激活刺激敏感性的影响

小鼠体外成熟卵母细胞组的乙醇激活率显著低于体内成熟卵母细胞组水平,在体外成熟过程中（培养液：ＴＣＭ－１９９＋ＦＣＳ（２０％）＋ｈＣＧ（２ＩＵ／ｍｌ））卵丘细胞的存在极显著地降低了成熟卵的乙醇激活率,卵激活率由５８．７％（裸卵）降为１３．８％（卵丘卵母细胞复合体）超排卵子随着卵龄的增加,卵子的乙醇激活率逐渐升高,而且体内卵的激活率高于体外老化同龄组的水平。     

FSH处理对猪颗粒细胞中类固醇合成酶基因的表达及其调控区组蛋白H3修饰的影响

【目的】研究FSH处理对猪卵巢颗粒细胞类固醇合成酶、垂体激素受体、凋亡相关等基因表达的影响及此过程中组蛋白H3修饰的变化情况。【方法】首先,采集猪卵巢组织并用注射器抽取方法收集卵泡颗粒细胞,用含血清体系体外培养颗粒细胞至贴壁,血清饥饿16h后用终浓度5IU·mL~(-1)的FSH处理24h,并收集细胞。其次,提取细胞m RNA,采用qRT-PCR方法检测类固醇合成酶(STAR、CYP11A1、HSD3B和CYP19A1)、垂体激素受体(FSHR和LHR)、凋亡相关基因(XIAP和Fas L)m RNA的表达变化,最后,相同处理后固定细胞,采用染色质免疫沉淀结合q PCR(Ch IP-q PCR)方法检测类固醇合成酶基因STAR、CYP19A1和HSD3B上游转录调控区组蛋白H3修饰(H3K4me2、H3K4me3、H3K9ac和H3K14ac)状况。【结果】5IU·mL~(-1)的FSH处理引起类固醇合成酶基因STAR、CYP19A1和HSD3B分别为2倍(P0.01)、2.8倍(P0.01)和3.6倍(P0.05)的显著上调,而CYP11A1表达水平没有显著变化;FSH处理对垂体激素受体FSHR、LHR和凋亡相关基因XIAP、Fas L影响不显著。在上调的三个类固醇合成酶基因中,HSD3B调控区组蛋白H3修饰变化最为显著,H3K4me2、H3K4me3、H3K9ac和H3K14ac结合分别有14.7倍(P0.01)、13.6倍(P0.01)、19.7(P0.01)倍和2.5倍(P0.05)的显著上调;STAR基因调控区的H3K9ac在处理后有11.1倍的显著下降(P0.05);CYP19A基因调控区的H3K4me3和H3K9ac分别有0.5倍的上调(P0.01)和10.4倍(P0.01)的下降,其余组蛋白修饰在处理前后没有显著变化。【结论】FSH处理24h对颗粒细胞类固醇合成酶基因转录有显著上调作用,对其转录过程有H3组蛋白修饰参与,组蛋白修饰模式具有基因特异性。垂体激素受体和凋亡相关基因的应答可能需要FSH和其他因素的联合作用。     

北京鸭与樱桃谷鸭遗传多样性的微卫星分析

用双重抑制PCR技术分离7对鸭的特异微卫星引物,对北京鸭A、B、C 3个系和樱桃谷鸭进行了遗传多样性分析。结果表明,所用的7对引物中4对呈高度多态,3对呈中度多态。群体平均杂合度最高的是北京鸭A系,达0.578 0;杂合度最低的是樱桃谷鸭,为0.561 6。在DA遗传距离上,北京鸭B系与樱桃谷鸭最近,为0.024 4。北京鸭A系与北京鸭C系遗传距离较远,为0.094 6。在UPGMA聚类图上,北京鸭B系先和樱桃谷鸭聚在一起,然后和A系聚在一起,最后再和C系聚在一起。说明北京鸭经过不同方向选育后,C系和A、B系之间出现了差异。本研究结果与育种实际相符合,也从另一方面说明了品系的遗传特征能够由各微卫星位点的多态性得到真实的反映。