施用猪粪对连作鸡毛菜株高及产量的影响

为改善鸡毛菜连作障碍,研究了施用猪粪对连作鸡毛菜株高及产量的影响。试验设计2个处理:连续四茬施用化肥种植鸡毛菜及连续四茬施用猪粪(水沤法施用-全肥土制作)种植鸡毛菜。结果表明,施用化肥连茬种植鸡毛菜,在第三茬时株高显著下降,第二茬时单株鲜重显著下降,鸡毛菜产量随种植茬数的增加而减少,四茬种植时鸡毛菜产量仅为首茬种植的74.90%。与施用化肥处理相比,施用猪粪连茬种植鸡毛菜仅首茬鸡毛菜株高、单株鲜重及产量略低,但之后茬口均显著高于施用化肥处理。合理施用猪粪替代化肥,可改善鸡毛菜连作障碍,保证鸡毛菜株高、单株鲜重及维持产量水平稳定。     

茶园花蓟马种群数量与茶叶中生化物质关系的数学分析

为明确茶园花蓟马种群数量与茶叶中生化物质的相关性,利用HPLC-ELSD法测定茶叶中生化物质的含量,再通过对茶园9种茶叶上花蓟马的数量进行Pearson相关性分析、通径分析和回归分析得出不同生化物质含量与花蓟马数量关系的密切程度,并进行综合比较与分析。通过Pearson相关性分析得出,花蓟马种群数量与茶叶中糖类含量呈显著正相关,与儿茶素类呈显著负相关;通过通径分析得出,低聚原花青素类与花蓟马的通径系数绝对值最大,其次为糖类和儿茶素类,其中低聚原花青素和糖类的通径系数为正数,儿茶素类为负数;通过回归分析得出,糖类与儿茶素类仍然是与花蓟马数量相关性最显著的2类生化物质。因此,栽植时为了避免花蓟马危害,可以选择糖类含量低或者儿茶素类含量高的茶树种类。研究结果为花蓟马抗虫育种提供了科学依据。     

水热预处理竹材制备低聚木糖和单糖的研究

以贵州慈竹为研究对象,对其进行水热预处理(LHWP),研究不同预处理强度系数对竹材化学组分、酶水解性能及低聚木糖(XOS)浓度的影响。利用X射线衍射(XRD)和傅里叶转换红外线光谱分析仪(FT-IR)分析预处理前后物料的物理和化学结构变化。研究结果表明:水热预处理过程中竹材的半纤维素含量显著降低,而纤维素及木质素的含量则有所增加;水热预处理能够显著提升竹材的酶解效率,在预处理强度系数为4.50时,预处理竹材的酶水解性能最高,葡聚糖和木聚糖酶水解得率分别为79.0%和92.0%;而XOS质量浓度则在强度系数为3.96时,达到最大值8.7g/L(得率55.3%),继续提高预处理强度,XOS质量浓度降低,在强度系数为4.50时,体系中仅检测到0.5g/L(得率3.1%)XOS。     

基于“对分易”网络教学平台的体育旅游概论课程的教学实践探索研究

指出了《体育旅游概论》课程对体育旅游的理论知识和实践技能的掌握具有较高的专业要求,教学平台将讲授、内化、讨论的环节融合到传统课堂,并利用现代互联网技术,通过“对分易”微信平台实现对《体育旅游概论》课堂教学的改革创新,从而实现多元的教学目标,激发学生学习的积极性、主动性、创造性。因此,研究了在传统体育旅游课堂中引入“对分易”网络教学平台的移动学习模式,针对体育生群体的特殊性,探究了“对分易”教学平台在课堂教学中的应用创新,并分析了应用效果和存在的问题,提出了一些改进措施,此研究旨在为线上线下“混合式”教学提供网络平台的案例支持。     

CRISPR/Cas9介导的绵羊示踪脐带间充质干细胞系的建立

【目的】利用CRISPR/Cas9技术建立绵羊示踪脐带间充质干细胞系,为间充质干细胞的临床治疗与分化机制研究奠定基础。【方法】根据绵羊ROSA26的基因组序列,利用在线工具ZiFiT Targeter Version 4.2设计合成3对引物,利用点突变法,以px330质粒为模板分别进行PCR,DpnⅠ去除质粒DNA后,PCR产物自身环化,酶切测序鉴定,构建以绵羊Rosa26为靶标基因的sgRNA/Cas9载体,构建的质粒含Cas9和向导RNA(single-guide RNA,sgRNA) 表达盒,由U6启动子驱动表达。将上述载体分别利用脂质体转染绵羊脐带间充质干细胞(sUMSCs),提取其基因组PCR后进行T7E1酶切,琼脂糖电泳分析条带灰度以检测载体编辑活性。根据sgRNA序列在绵羊ROSA26靶位点的上下游设计并合成左、右同源臂扩增引物,提取绵羊全基因组为模板分别进行PCR扩增得到左右同源臂,回收纯化后分别与pMD19-Simple连接,酶切测序鉴定获得左、右同源臂重组质粒。根据PCR引入的酶切位点,将左同源臂质粒和Donor表达载体DC-DON-SH02 ROSA26进行酶切连接,鉴定获得左臂重组打靶载体,使用相同方法将右同源臂质粒连接到左臂打靶载体上,鉴定获得Donor打靶载体,载体携带嘌呤霉素抗性基因和绿色荧光蛋白（GFP）报告基因。在生长良好的sUMSCs中加入不同浓度的嘌呤霉素,观察细胞存活时间,确定最佳抗性筛选浓度和时间。利用脂质体共转sgRNA/Cas9载体和Donor载体到绵羊间充质干细胞,在其ROSA26位点切割DNA双链,在DNA断裂处通过同源重组方式引入报告基因,转染48 h后进行嘌呤霉素抗性筛选,筛选结束后更换正常培养基继续培养,观察绿色荧光的表达并提取阳性细胞基因组,针对ROSA26位点设计上下游两对引物对其进行PCR检测其整合情况。【结果】（1）针对绵羊Rosa26位点设计3对PCR引物,利用点突变法将sgRNA 克隆至px330的BbsⅠ酶切位点上,成功构建sgRNA/Cas9载体px330-sgRNA1/2/3,将其分别转染sUMSCs,T7E1酶切结果表明px330-sgRNA2/3出现脱靶现象,未在靶位点发生编辑,px330-sgRNA1的编辑效率最高,约为20%;（2）基于sgRNA1,PCR法获得打靶载体的左、右同源臂,经一系列分子生物学方法先后连接到载体DC-DON-SH02 ROSA26上,经酶切和PCR鉴定,成功获得绵羊ROSA26位点的重组载体sROSA26-HA;（3）筛选得到sUMSCs最佳抗性浓度时间,利用Lipofectamine2000共转染sgRNA/Cas9载体和Donor重组载体到sUMSCs,1.5 μg·mL^-1嘌呤霉素筛选15d至对照组细胞全部死亡,获得的阳性克隆并扩大培养。显微镜下可观察到明显的绿色荧光,且与对照组相比,阳性细胞克隆的基因组PCR均检测到特异条带,表明sUMSCs的ROSA26位点发生同源重组,GFP基因被成功敲入到基因组中并能正常表达,该细胞可以用于动物疾病模型中追踪sUMSCs的去向和分化方向的研究。【结论】成功利用CRISPR/Cas9系统在sUMSCs内实现外源GFP基因的定点敲入,获得绵羊示踪脐带间充质干细胞系,为间充质干细胞进一步的临床转化奠定了基础。     

不同保种时间下绍兴鸭体尺及蛋肉品质的差异研究

通过对不同保种时间的带圈白翼梢绍兴鸭和白羽绍兴鸭的体尺及蛋肉品质的各项指标进行测定,比较不同保种时间(相同品系)的绍兴鸭生产性能,发现保种T10(保种时间为10 a)的绍兴鸭的蛋白高度、哈氏单位、龙骨长均显著大于保种T40(保种时间为40 a)的绍兴鸭。不同品系(相同保种时间)的绍兴鸭生产性能比较显示,带圈白翼梢绍兴鸭其蛋重、蛋白高度、哈氏单位、体斜长、公鸭胸宽均显著大于白羽绍兴鸭;白羽绍兴鸭蛋黄色泽和蛋黄比例均大于带圈白翼梢绍兴鸭,但未出现显著性差异。结果表明,不同保种时间下的绍兴鸭部分指标具有一定差异性,但总体生产性能差异较小;不同品系绍兴鸭生产性能也具有一定差异。     

光碳核肥对大豆品种主要农艺性状及产量的影响

为探讨光碳核肥对大豆主要农艺性状及产量的影响,试验以九芽豆1号大豆为试验材料,在大豆生长的3个关键时期喷施光碳核肥,对大豆主要农艺性状及产量进行比较研究。结果表明:大豆喷施光碳核肥,植株株高、茎粗、主茎节数、有效分枝、百粒重、单株粒重与对照相比均有所提高,实测产量与对照相比明显增加;苗期、开花盛期、鼓粒盛期共喷施3次光碳核肥处理的大豆各项农艺性状指标值最高,产量最高,为3594.25kg/hm2,比对照增加689.9kg/hm2,增产23.75%。     

基于高分辨率影像的农村宅基地空间分布信息提取

【目的】 基于高分辨率影像提取农村宅基地空间分布,可以快速、便捷获取农村宅基地空间分布信息。【方法】 文章选择黑龙江省安达市吉星岗镇作为研究区,基于高分辨率正射影像,采用人工目视解译方法获取了研究区农村宅基地空间分布信息,并利用房地一体农村宅基地和集体建设用地使用权确权登记颁证工作成果对其精度进行了验证。【结果】 （1）吉星岗镇共有宅基地5 897宗,总面积640.76 hm²,平均每宗宅基地面积为1 095.61 m²。（2）吉星岗镇宅基地在空间上总体分布零散,但在行政村内分布相对紧凑,基本上以自然屯为单元,集中分布在自然屯内某个区域。（3）吉星岗镇宅基地数量和面积总体精度分别为81.86%、91.87%,10个行政村宅基地数量精度在72.55%～88.47%之间,面积精度在82.94%～99.92%之间。（4）与实测法、倾斜摄影测绘法、勘丈测绘法等方法相比,基于高分辨率正射影像,采用人工目视解译方法获取宅基地空间信息,操作简单、成本低、工作周期短。【结论】 该文成果可为研究区农村宅基地改革和管理提供数据支撑,该方法为获取农村宅基地空间信息的方式提供了参考。     

欧美杨细菌性溃疡病菌双组分基因缺失突变及其生物学表型分析

  目的  欧美杨细菌性溃疡病是革兰氏阴性细菌Lonsdalea populi引起的杨树枝干病害,其危害严重,已造成欧美杨人工林的重要经济损失。双组分系统是细菌致病过程的关键调控途径之一。目前,欧美杨细菌性溃疡病菌的双组分系统如何调控致病过程仍缺乏系统研究。因此,本研究开展欧美杨细菌性溃疡病菌的双组分编码基因的缺失突变及突变体表型分析,为深入解析其致病机制提供遗传材料。  方法  本研究以欧美杨溃疡病菌菌株N-5-1为研究对象,利用双亲结合方法获得了28个双组分系统基因的缺失突变体,并通过表型测定方法分析了这些基因突变体的致病性、生长、游动性、生物膜形成和抗逆性等表型特征,研究不同双组分系统编码基因对该病菌致病过程的调控。  结果  构建了36个欧美杨溃疡病菌的双组分编码基因的敲除重组载体,获得了28个基因的缺失突变体。致病性测定表明18个双组分基因的敲除降低了病原菌的毒性,其中8个突变体毒性丧失。此外,还获得了调控游动性和生物膜形成能力的突变体以及在逆境胁迫反应（金属离子、盐离子、抗生素等胁迫）有缺陷的突变体。  结论  本研究获得了5个显著影响欧美杨细菌性溃疡病菌毒性及其他生物表型的双组分基因,为后续双组分信号调控致病机制研究提供了遗传材料。      

珠兰叶挥发油化学成分及其生物活性

利用水蒸气蒸馏法提取新鲜珠兰叶中的挥发油,通过气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对其挥发油化学成分进行分析,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2',-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)、抑制酪氨酸酶法、抑菌圈法对挥发油的抗氧化和抑菌活性进行评价.结果表明:从珠兰叶挥发油中共检测出化合物55个,占挥发油总量的82.60％;其中以烯类化合物相对百分比最高(60.46％),其次是醇类化合物(14.52％),其主要成分为1,5,5-三甲基-6-亚甲基-环己烯(14.58％)、二环大根香叶烯(11.12％)、(4E,6Z)-2,6-二甲基-2,4,6-辛三烯(4.40％)、桉油烯醇(3.81％)、α-异黄樟烯(3.47％)、d-杜松烯(3.20％)等.珠兰叶挥发油对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、变形杆菌均有显著的抑菌效果,对DPPH、ABTS自由基清除作用的抑制质量浓度(IC50)分别为14.112、3.766 g·L-1,对酪氨酸酶抑制作用的抑制质量浓度(IC50)为22.900 g·L-1,抗氧化活性及酪氨酸酶抑制作用与珠兰叶挥发油呈浓度效应.珠兰叶挥发油具有一定的抗氧化、酪氨酸酶抑制作用及抑菌特性.