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81.
影响鸡IBV血凝因素及HI试验抗原制备的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
选择没有自然血凝性的三个标准IBV毒株(M41、Gray、T株)和四个由西北农大禽病研究室分离的陕西省地方株[X、Fu、W和H株(有自然血凝性)],在非免疫鸡胚上增殖后,用蔗糖透析法浓缩10倍,再分别采用三种方法处理,制备IBV-HA抗原:1)用浓缩4倍的兔A型魏氏梭菌培养液滤液(R.W.F.C4)处理IBV;2)用2.5U/mlI型磷酸酯酶C(PLC1)处理IBV;3)用1%胰酶处理IBV。结果显示,除T株仍不具有血凝性外,其余毒株都有了较高的血凝价。IBVM41株、X株HA效价株高达2^8,Fu、Gray、W、H株的HA效价也达2^7—2^9。但是,用方法3)来制备HA抗原没有任何实用价值。因为1%胰酶本身具有非常强的非特异性凝集作用,非特异性HA价高达8log2。而采用R.W.F.C4和2.5U/ml PLC1处理IBV浓缩毒制得的IBV—HA抗原,除T株外,均能凝集鸡红细胞,且该凝集作用可被特异的IBV抗血清所抑制,而不能被ND、EDS—76、IBD等其它鸡病阳性血清所抑制,说明该抗原具有较强的特异性。本试验还对影响IBV血凝试验和血凝抑制试验的各种因素进行了研究。比较了用R.W.F.C4和用2.5U/ml PLC1处理IBV制备HA抗原血凝价,结果显示二者的血凝价是一致的,所以完全可以用廉价的兔A型魏氏梭菌培养液代替昂贵的PLC1作为抗原处理液。本试验还采用IBV—M41株和陕西省地方肾型株X株制备IBV—HA双价抗原,结果表明,用上述IBV—HA二价抗原所测出的各毒株抗血清的HA效价和用各毒株所制得的IBV—HA单价抗原所测出的相应毒株抗血清的HI效价差异不显著,说明IBV二价HA抗原的抗原交叉性广泛,可用于IB的免疫监测和诊断。本试验还将在同一条件下获得的免疫鸡血清分别采用HI和CEKC—SN二种方法所测得的抗体效价进行了比较,结果经统计学分析表明:HI效价与CEKC—SN效价呈正相关,相关系数为0.6585,且HI法比ECKC—SN法省时、省力。 相似文献
82.
J亚群禽白血病病毒膜表面糖蛋白基因gp85的克隆与表达 总被引:3,自引:0,他引:3
以pGEM-IMC2.2重组质粒为模板扩增禽白血病病毒内蒙株IMC10200gp85基因,构建了转移栽体pFast Bacl-IM gp85,并利用Bac-to-Bac表达系统获得了重组杆状病毒rBac-IMC gp85。转染Sf9细胞后的表达研究表明,重组杆状病毒可高效表达IMC10200的gp85基因,表达产物具有病毒的抗原特异性,与ALV-J单抗JE9有强的间接免疫荧光反应。蛋白质印迹法分析表明,表达产物的分子质量约54ku。 相似文献
83.
84.
用间接ELISA法检测鸡痘病毒抗体的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
建立了检测鸡痘病毒抗体的间接ELISA方法,用该法检测20份人工感染鸡血清样品,抗体阳性率为100%,康复期鸡群血清抗体阳性率为43%,人工接种弱毒疫苗65d和170d鸡群血清抗体的阳性率分别为60%、70%。经反复试验,确定了诊断抗原的制备方法和间接ELISA检测鸡痘抗体的最佳反应条件,即抗原包被浓度10.8μg/孔,待测血清最佳稀释度为1:100。 相似文献
85.
猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究进展 总被引:5,自引:0,他引:5
猪繁殖与呼吸综合征 (Porcine reproductiveand respiratory syndrome,PRRS)是 1 987年发现的一种新的猪病 ,它主要是引起母猪的繁殖障碍 ,如流产、早产、死胎、木乃伊胎和呼吸道症状的一种由猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)引起的接触性传染病。此病最初在美国首先被发现 ,随后相继在世界各国报道 ,我国台湾省也有疫情的报道。 1 995年我国首次从进口猪中检出 PRRS阳性猪 ,并从中分离到 PRRSV。 1 996年郭宝清等首次从国内 PRRS血清阳性猪群中分离到 PRRSV,从而证实了我国也有此病的流行[1] 。由于 PRRS主要是引起母猪的繁殖… 相似文献
86.
马立克氏病病毒(MDV)糖蛋白D基因的分离克隆,定序及其在大肠杆… 总被引:1,自引:0,他引:1
用聚合酶链式反应(PCR)技术,从马立克氏病病毒(MDV)GA株感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)基因组DNA中扩增出MDV糖蛋白(gD)抗原基因1209bp编码序列。将该PCR扩增产物于EcoRI和KpnⅠ位点克隆进行pUC18质粒载体中。将gD重组pUC18质粒DNA用Digoxigenin(Dig)标记后,在Southern blot中,该探针能识别MDV基因组DNA的Bam HI-A克隆中的A 相似文献
87.
锥虫的抗原变异研究进展 总被引:4,自引:1,他引:3
二十世纪初,寄生虫学家就注意到,感染锥虫后的动物,早期阶段出现连续的虫血症波动现象,而且各虫血症期具有不同的抗原群体锥虫。此后,用克隆群体的锥虫接种到实验动物身上,发现单个锥虫也具有不断改变抗原而逃避宿主兔疫的能力,这就是锥虫一个重要的生物学特性——抗原变异现象。锥虫可以在实验动物身上继代,同样产生抗原变异,这为实验室研究提供了可能;锥虫的冷冻保藏和体外培养技术的建立,使抗原变异的研究更加方便;现代科学技术特别是免疫学和分子生物学的迅速发展,将锥虫抗原变异的研究不断推向深入,不仅对控制推虫病十分… 相似文献
88.
89.
近年来,由于免疫失误和病毒变异,导致了一些病死鸡难以找到书中所介绍的典型症状和病灶,给诊断工作造成了很大的困难。利用血凝抑制试验(HI)和琼脂扩散试验(AGP)检查死鸡体内的抗原,对新城疫、禽流感、传染性支气管炎、传染性喉气管炎、鸡痘、马立克氏病、传染性法氏囊炎、产蛋下降综合症、禽脑脊髓炎和病毒性关节炎等病,可以在数小时至24小时内确诊疫情。传染病的发生常是先由个别或少数鸡开始发病或死亡,若能对此及时快速确诊,立即接种疫苗和采取防制措施,则可阻断传染病的扩散,将传染病扑灭于萌芽开始阶段,将会减少因疫病扩散而造成的重大经济损失。查抗原的方法简单易行,有很大的实际应用价值。 相似文献
90.
本文提出了利用反相离子对色谱法,简单,快速,准确同时定量测定饲料添加剂中的烟酸,烟酰胺,盐酸吡哆辛,氰钴胺素,核黄素和硫胺素。样品前处理简单,六个维生素能在12min内获得满意的分离,各组份之间的分离度Rs大于1.60。各个维生素的回收率在87.0~101.0%,相对偏差为3.1~2.0%。色谱柱为LichrosorbRP-18 250×φ5mm,流动相为甲醇/水,0.25%TEA,1.25mmol/l PICB-5,3.75mmol/l PICB-7,pH3.00,紫外可变波长检测器采用MAXPL操作方式λ 1=254nm,λ_2=280nm,λ_3=354nm,流速1.1 nl/min。 相似文献