链霉素残留快速检测阻断ELISA试剂盒的研制及其性能测定

链霉素（SM）属于氨基糖苷类抗生素,用于革兰氏阴性菌和结核杆菌感染,在治疗家畜感染性疾病中发挥了重要作用,但其毒副作用较大。1999年农业部在《动物性食品中兽药最高残留限量》的通知中规定牛奶中链霉素的最高残留限量（MRL）为200μg／kg。然而,相应的链霉素检测技术并不完备,由于氨基糖苷抗生素缺少发色基团,应用到HPLC时常要对其衍生化,设备条件过高,难以普及;并且其理化测定方法相当复杂和通用性差。     

高纤维基础日粮添加非淀粉多糖酶制剂对生长鹅生产性能及内分泌的影响

选择300只29日龄生长鹅进行28 d的饲养试验,研究了在高纤维基础日粮(粗纤维11.02%)中分别添加0.2%和0.4%的非淀粉多糖(NSP)酶制剂对生长鹅生产性能及内分泌的影响.对生产性能的研究结果显示:0.2%与0.4%的NSP酶制剂对平均日增重提高幅度分别为14.82%与19.69%(P<0.05),对饲料转化率提高幅度分剔为13.27%与19.93%(P<0.05),对平均日采食量无显著影响(P>0.05).对内分泌指标的研究结果显示:0.2%与O.4%的NSP酶制剂显著提高了血糖、总蛋白、T3和IGF-Ⅰ(P>0.05),而总胆固醇、甘油三酯、尿酸、谷丙转氨酶、谷革转氨酶、碱性磷酸酶、胰高血糖素、胰岛素、TSH、GH、T4均无显著影响(P>0.05).     

有机砷饲料添加剂在肉鸡生产中的应用研究

砷(As)是一种剧毒物质,直到1975年Nielsen等通过大鼠试验证实砷是动物营养的必需微量元素之后,才引起动物营养界的关注并展开了深入的研究,目前美国、加拿大等国家将有机砷作为饲料添加剂广泛应用于动物生产,且已形成规范技术。我国此方面的研究起步较晚,始于80年代,起初主要研究无机砷如氧化物、硫化物、砷酸、砷酸盐、亚砷酸盐等,由于无机肿属于高毒类化合物,毒性大,易残留,安全性低,不宜作饲料添加剂应用,继而转向有机砷的应用研究,于1993年研制出一种有机砷饲料添加剂对氨基苯砷酸,并由国家农业部正式批准,由浙江省黄岩市荣耀化工厂定点生产,随后又相继研制出对氨基苯砷酸钠、3-硝基-4-羟基苯砷酸等系列产品,几年来推广应用于养猪生产,取得厂较好的饲养效果,而在肉鸡生产中的应用刚刚起步,处于探索阶段。笔者根据几年来生产实践中的体会,结合有关文献资料,就目前应用于肉鸡生产的有机砷饲料添加剂产品种类、作用机理与缺乏症、应用效果、毒性与安全剂量、应用安全性与使用注意事项等方面作一综述,以供借鉴。     

磺胺间二甲氧嘧啶人工抗原的合成与鉴定

用重氮化方法将SDM偶联于载体蛋白BSA和OVA上,合成免疫抗原BSA-SDM和包被抗原OVA-SDM,通过紫外扫描(UV)、SDS-PAGE凝胶电泳试验。结果显示:BSA-SDM和OVA-SDM的UV与BSA、SDM的相比均发生了改变,出现了明显的特征峰。这表明半抗原和载体偶联成功。用BSA-SDM免疫BALB/C小鼠,间接ELISA测定多抗上清(pAb)效价。结果表明,获得了高效价的pAb,为SDM残留免疫学检测方法的建立奠定了基础。     

抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选及金标试纸检测方法的建立

以BSA-CAP-HS免疫Balb／C小鼠,用细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞,体内诱生腹水法制备cAP mAb,并鉴定其免疫学特性;依据胶体金免疫层析试验(GICA)原理,以CAP mAb 为金标抗体,研制CAP残留快速检测金标试纸(CAP-Strip),并对其性能进行测定。结果表明,筛选出了3株杂交瘤细胞,其中最好的4F9-B2株间接ELISA效价细胞培养上清为1:1 280,腹水为1:640 000,亲和常数(Ku)为 1．84×1010 L/mol,对CAP的半数抑制浓度(IC50)为0．88μg/L,与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应(CR%)为150%,与其他酰胺醇类和抗菌素类药物无交叉反应;CAP-Strip的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit拟合曲线,目测检测限为0．5μg/L;其敏感性与竞争ELISA试剂盒相当,符合率为100％;可见CAP-Strip具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于CAP残留的快速检测,具有较高的推广应用价值。     

不同精料水平对杂交肉牛瘤胃内环境参数的影响

采用4×4拉丁方试验设计,以干玉米秸为粗料,精料补充料相同,配制精料水平分别为35%、45%、55%、65%的4种饲粮。研究不同精料水平日粮对4头21月龄、体重300 kg左右、安装永久性瘤胃瘘管的杂交阉公牛瘤胃内环境参数的影响。结果表明:试牛瘤胃液平均pH值在6.46~6.84范围内变动。随着精料水平的提高,平均pH值降低,65%精料组与其他各组间差异显著(P<0.05)。瘤胃液平均NH3-N浓度随精料水平的提高而增大,且35%精料组与65%精料组间差异显著(P<0.05)。瘤胃内乙酸和丙酸的摩尔浓度高峰值随着精料水平的提高,有延迟的趋势,但平均值随精料水平的提高而增加,且丙酸摩尔浓度平均值在35%精料组与65%精料组间差异显著(P<0.05)。乙酸与丙酸的摩尔浓度比随精料水平的提高而下降,且35%精料组与65%精料组间差异显著(P<0.05)。     

氯霉素残留检测竞争ELISA试剂盒的研制及其性能测定

应用抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞株建立竞争ELISA(ciELISA)分析方法,研制出CAP残留快速检测试剂盒(CAP-Kit),并对其性能进行了测定。结果表明,CAP-Kit标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,相关系数R2=0.9955,检测范围为0.1~128.0μg.L-1,半数抑制浓度(IC50)为2.4μg.L-1,灵敏度为0.053μg.L-1,检测限为0.1μg.L-1;奶样、肉样的平均添加回收率为88.5%、82.7%,平均批内和批间变异系数均<15%;CAP-Kit与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应(CR%)为150%,与其他酰胺醇类和抗菌药物无CR;基质对CAP-Kit的检测结果影响不大;CAP-Kit在4℃可保存6个月以上。     

磺胺甲噁唑单克隆抗体的研制及免疫金标试纸检测方法的建立

用磺胺甲噁唑人工免疫原（BSA-SMZ）免疫BALB/C小鼠（Mus muscalus）,细胞融合技术筛选抗磺胺甲噁唑单克隆抗体（SMZmAb）杂交瘤细胞,体内诱生腹水法制备SMZ mAb,并鉴定其免疫学特性;应用SMZmAb研制SMZ残留快速检测金标试纸（SMZ-strip）,并测定其性能。结果表明,筛选出3株杂交瘤细胞,其中最好的3G6株间接ELISA效价细胞培养上清为1∶8.1×102,腹水为1∶6.4×105,亲和常数（Ka）为3.07×109 L/mol,对SMZ的半数抑制浓度（IC50）为12.4 μg/L,与磺胺嘧啶的交叉反应率（CR%）为2.84%,与其它磺胺类药物无交叉反应;SMZ-strip目测检测限为6 μg/L;其敏感性与竞争ELISA试剂盒相当,符合率为100%;SMZ-strip具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于SMZ残留快速检测的推广应用。     

发酵床饲养对生长肥育猪生长性能与血液生化指标的影响

为了研究发酵床饲养对生长肥育猪生长性能与血液生化指标的影响,选择体重为30 kg的杜长大三元猪120头,根据体重相近、胎次一致、公母各半的原则随机分为对照组(传统水泥地饲养)和发酵床组,每组设3个重复,每个重复20头,试验期53 d.研究结果表明:发酵床组与对照组相比,日增重提高14.53％(P＜0.05),料重比减少2.11％(P＜0.05);在血液生化指标方面,血清碱性磷酸酶活性提高13.86％ (P ＜0.05),丙氨酸转氨酶活性降低5.81％(P＞0.05),血清尿素氮含量降低12.8％ (P ＜0.05),总蛋白含量提高11.95％ (P ＜0.05),白蛋白含量提高5.39％ (P＞0.05),球蛋白含量提高18.6％ (P ＜0.05),总胆固醇含量降低9.97％ (P ＜0.05).通过发酵床饲养,能减少环境污染、提高生长肥育猪生长性能.     

19-去甲类固醇激素的结构、性能及其代谢特点研究

19-去甲类固醇类化合物是临床应用最多的合成类雄性蛋白同化激素,可用于治疗骨质疏松症,蛋白质缺陷型疾病和烧伤等。它还可以提高运动员和赛马比赛的成绩,增强食源性动物瘦肉生产率,进而提高饲料转化率。但19-去甲类固醇及代谢残留引起人的肝功能障碍和心血管系统受损,内分泌失调等副作用,因此在世界上多数国家中,除医疗和科研之外,禁止使用。详尽阐述了19-去甲类固醇类化合物的结构、功能、副作用和代谢特点。