抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选及ciELISA试剂盒的研制

将氯霉素(CAP)化学修饰引入羧基活性基团,形成具有半抗原结构特征的氯霉素半琥珀酸酯(CAP-HS),用混合酸酐法制备免疫原BSA-CAP-HS和包被原OVA-CAP-HS,用UV,SDS-PAGE进行鉴定;BSA-CAP-HS免疫BALB/C小鼠,细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备CAPmAb,并鉴定其免疫学特性;应用CAP mAb研制CAP残留快速检测ciELISA试剂盒(CAP-Kit),并测定其性能.结果表明,BSA-CAP-HS偶联成功,分子结合比为1:15.6;筛选出3株杂交瘤,其中最好的4F9株间接ELISA效价细胞上清为1:1.28×103,腹水为1:6.4×105,亲和常数(Ka)为1.84×1010L·mol-1,半教抑制浓度(IC50)为2.4 μg·L-1,与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应(CR)为150%,与其它酰胺醇类和抗菌素药物无交叉反应;CAP-Kit的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,线性范围为0.1～128 μg·L-1,灵敏度为0.053 μg·L-1,检测限为0.1 μg·L-1,奶样、肉样的平均添加回收率为88.5%,82.7%,平均批内和批间变异系数<15%.CAP-Kit在4 ℃可保存180 d.     

莱克多巴胺人工免疫原合成及抗体特性

将莱克多巴胺(RAC)进行化学修饰引入羧基活性基团,合成具有半抗原结构特征的RAC-戊二酸酐半醛化合物(RAC-SA);采用混合酸酐法(MA)将RAC-SA与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成人工免疫原BSA-RAC和包被抗原OVA-RAC,用红外(IR)、紫外(UV)和凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定,推算分子结合比;用BSA-RAC免疫新西兰白兔,间接ELISA测定多克隆抗体(pAb)效价,阻断ELISA鉴定其敏感性,琼脂双扩散试验、WestGold膜杂交试验和交叉反应试验鉴定其特异性。结果表明,BSA-RAC偶联成功,分子结合比为24.5∶1;获得了高价、敏感、特异的RAC pAb,为RAC残留免疫学检测方法的建立奠定了基础。     

链霉素人工抗原的制备与鉴定

链霉素经氧-羧甲基羟胺肟化处理后引入羧基,采用EDC一步法分别合成免疫原BSA-EDC-SM和包被抗原OVA-EDC-SM;用戊二醛法和1,4-丁二醇缩水甘油醚分别合成BSA-GA-SM和BSA-di-SM;采用SDS-PAGE凝胶电泳和紫外扫描测得BSA-EDC-SM、BSA-GA-SM和BSA-di-SM的BSA与SM的分子结合比分别为1:23、1:15和1:10.用3种免疫原免疫Balb/C小鼠,获得了高价、敏感和特异的抗血清.BSA-EDC-SM免疫组中1#小鼠的多克隆抗体对SM的IC50为45.8üg/mL,对双氢链霉素(DHSM)的交叉反应为90.6%,与其他氨基糖苷类药物或抗生素药物的交叉反应均小于0.001%.BSA-di-SM和BSA-GA-SM免疫组的多克隆抗体对DHSM、其他氨基糖苷类药物或抗生素类药物的交叉反应均小于0.001%.     

NSP酶制剂对雏鹅消化酶活性和盲肠微生物数量的影响

选择150只1日龄雏鹅进行28 d的饲养试验,研究了在基础日粮中分别添加0.2%和0.4%的NSP酶制剂对雏鹅消化酶活性和盲肠微生物数量的影响.对消化酶活性的研究结果显示,0.2%与0.4%的NSP酶制剂使十二指肠食糜胰蛋白酶活性分别提高了26.95%和31.71%(P＜0.05),十二指肠食糜淀粉酶活性分别提高了23.49%和19.94%(P＜0.05),空肠食糜胰蛋白酶活性分别提高了24.15%和29.50%(P＜0.05);空肠食糜淀粉酶活性分别提高了20.49%和19.94%(P＜0.05);而对胰腺胰蛋白酶、胰腺淀粉酶、胰腺脂肪酶、十二指肠脂肪酶、空肠脂肪酶、回肠淀粉酶和回肠脂肪酶的影响均不显著(P＞0.05).对小肠盲肠微生物数量的研究结果显示,0.2%和0.4%的NSP酶制剂对雏鹅盲肠大肠杆菌、双歧杆菌和乳酸杆菌数量的影响均不显著(P＞0.05).     

磺胺甲嗯唑单克隆抗体的研制及免疫金标试纸检测方法的建立

用磺胺甲嗯唑人工免疫原（BSA-SMZ）免疫BALB／C小鼠（Mus muscalus）,细胞融合技术筛选抗磺胺甲嗯唑单克隆抗体（SMZ mAb）杂交瘤细胞,体内诱生腹水法制备SMZ mAb,并鉴定其免疫学特性;应用SMZ mAb研制SMZ残留快速检测金标试纸（SMZ-strip）,并测定其性能。结果表明,筛选出3株杂交瘤细胞,其中最好的3G6株间接ELISA效价细胞培养上清为1：8.1&#215;10^2,腹水为1：6.4&#215;10^5,亲和常数（K=a）为3.07&#215;10^9L／mol,对SMZ的半数抑制浓度（IC50）为12.4μg／L,与磺胺嘧啶的交叉反应率（CR％）为2.84％,与其它磺胺类药物无交叉反应;SMZ-strip目测检测限为6μg/L;其敏感性与竞争ELISA试剂盒相当,符合率为100％;SMZ-strip具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于SMZ残留快速检测的推广应用。     

膨化血粉水平对4～8周龄豁眼鹅生长性能和肉品质的影响

选取健康、活泼的4周龄豁眼鹅300只(公母各半),平均初始体重为1 073.23(±20.95)g,随机分为3组,分别在基础日粮中添加1.5%、3.0%和4.5%的膨化血粉,每组设4个重复,每个重复25只鹅,进行为期28 d的饲养试验,研究不同水平膨化血粉对生长期(4~8周龄)豁眼鹅的生长性能和肌肉品质的影响。结果表明:与1.5%、4.5%膨化血粉组相比,3.0%膨化血粉组显著提高了豁眼鹅的平均日增重、平均日采食量,并显著降低了料重比(P<0.05);在肌肉品质方面,膨化血粉均具有提高腿肌中干物质、粗蛋白质、粗脂肪含量的作用,其中以3.0%膨化血粉组效果最佳;与3.0%膨化血粉组相比,1.5%和4.5%膨化血粉组腿肌组织中天门冬氨酸、苏氨酸、谷氨酸等含量均显著性降低。     

动物医学专业构建教学、科研、科技服务一体化团队的探索与实践

动物医学专业构建融教学、科研、科技服务一体化的教师团队,有助于提高人才培养质量、凝练学科研究方向、增强教师的科研及社会服务能力。团队组建要遵循一定的方法,建立健全团队的运行机制、管理体制、评价考核体系,加强团队文化建设。     

三种蛋白质饲料对雏鹅生产性能和表观代谢率的比较研究

选用300只健康、活泼的1日龄豁眼鹅(Anser cygnoides Linn.var domestica cv.Wulong),公母各半,体重78.68 g±2.95 g,随机分为3组,分别是添加血粉3.0%组、膨化血粉3.0%组和鱼粉3.0%组,每组5个重复,每重复20只雏鹅,试验期28 d。研究在相同营养水平条件下,相同比例的血粉、膨化血粉以及鱼粉对雏鹅生产性能和营养物质表观代谢率的影响,以及膨化血粉替代鱼粉的可行性。结果表明,与血粉组相比,膨化血粉组与鱼粉组的料重比分别降低了13.28%、14.11%(P<0.05),平均日增重分别提高了18.65%、19.99%(P<0.05),营养物质中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、粗脂肪、粗蛋白质、钙及能量的表观代谢率显著提高,其中粗蛋白质的表观代谢率提高幅度较大,分别为7.45%、8.25%(P<0.05),但膨化血粉组和鱼粉组间差异不显著(P>0.05)。说明饲养效果以鱼粉组最好,膨化血粉组次之,血粉组最差;以3%的膨化血粉等比例替代鱼粉在雏鹅日粮中是可行的。     

膨化血粉水平对育肥鹅生产性能和肉品质的影响

研究在相同营养水平条件下不同水平膨化血粉对育肥鹅生产性能和肉品质的影响。试验选用300只56日龄豁眼鹅,公母各半,体重2 412.85±68.37 g,随机分为试验Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组,分别加入1.5%、3.0%和4.5%的膨化血粉,每组设5个重复,每个重复20只鹅,试验时间14d。结果表明,与试验Ⅰ组、Ⅲ组相比,试验Ⅱ组平均日增重分别提高5.15%、8.14%(p<0.05),料重比分别降低3.36%、4.64%(p<0.05);腿肌中DM含量分别提高6.02%、8.16%(p<0.05),CP含量分别提高8.08%、11.52%(p<0.05);腿肌CP中12种氨基酸含量显著提高(p<0.05),其中Met含量分别提高7.32%、8.37%,Lys含量分别提高3.73%、4.21%,风味氨基酸谷氨酸含量分别提高3.00%、4.06%。说明在育肥鹅日粮中添加3%膨化血粉,可以显著提高生产性能,改善肉质。     

构建肉牛规范化饲养技术体系

本文阐述了构建肉牛规范化饲养技术体系的必要性、可行性和原则,在此基础上构建出肉牛规范化饲养技术体系,并详尽地阐述了该体系在实现肉牛产业化中的作用、特色和实施途径。