抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选及ciELISA试剂盒的研制

将氯霉素(CAP)化学修饰引入羧基活性基团,形成具有半抗原结构特征的氯霉素半琥珀酸酯(CAP-HS),用混合酸酐法制备免疫原BSA-CAP-HS和包被原OVA-CAP-HS,用UV,SDS-PAGE进行鉴定;BSA-CAP-HS免疫BALB/C小鼠,细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备CAPmAb,并鉴定其免疫学特性;应用CAP mAb研制CAP残留快速检测ciELISA试剂盒(CAP-Kit),并测定其性能.结果表明,BSA-CAP-HS偶联成功,分子结合比为1:15.6;筛选出3株杂交瘤,其中最好的4F9株间接ELISA效价细胞上清为1:1.28×103,腹水为1:6.4×105,亲和常数(Ka)为1.84×1010L·mol-1,半教抑制浓度(IC50)为2.4 μg·L-1,与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应(CR)为150%,与其它酰胺醇类和抗菌素药物无交叉反应;CAP-Kit的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,线性范围为0.1～128 μg·L-1,灵敏度为0.053 μg·L-1,检测限为0.1 μg·L-1,奶样、肉样的平均添加回收率为88.5%,82.7%,平均批内和批间变异系数<15%.CAP-Kit在4 ℃可保存180 d.     

重金属钼离子单抗的制备及其免疫学特性研究

为了检测水质、土壤、食品中的重金属钼离子的残留,故制备用于钼离子检测用的单克隆抗体。采用已合成的钼离子人工抗原Mo6+-ITCBE-BSA免疫Balb/C小鼠,用间接ELISA和间接竞争ELISA法筛选出备用小鼠,用细胞融合技术筛选制作单克隆抗体。结果表明:筛选出4株特异性强、敏感度高的杂交瘤细胞,其中4B3杂交瘤细胞株间接ELISA检测培养上清抗体效价为1∶(3.6×102);体内诱生法制备腹水效价为1∶(5.12×105);杂交瘤核型鉴定结果显示4B3杂交瘤细胞株染色体数目平均为99.4。4B3杂交瘤细胞株用间接竞争ELISA结果显示,IC50值为23.4μg/L,与Cr3+-EDTA的交叉反应率为81.8%,与其他金属螯合物无交叉反应。说明Mo6+-EDTA-mAb可用于Mo6+污染检测的免疫学试验。     

膨化血粉对4~8周龄扬州白鹅生长性能和肉品质的影响

试验选取健康、活泼的4周龄扬州白鹅300只(公母各半),按照体重相近的原则随机分为3组(分别在基础日粮中添加1.5%、3.0%和4.5%的膨化血粉),互为对照,每组设4个重复,每个重复25只鹅,进行为期28 d的饲养试验,用于研究不同水平膨化血粉对生长期(4~8周龄)扬州白鹅的生长性能和肌肉品质的影响。试验结果表明:与3.0%膨化血粉组相比,1.5%膨化血粉组与4.5%膨化血粉组的料重比分别提高了3.92%(P<0.05)与6.34%(P<0.05);平均日增重分别降低了8.14%(P<0.05)与12.40%(P<0.05);腿肌中干物质、粗蛋白质、粗脂肪含量显著下降(P<0.05);肌肉组织中氨基酸含量均有所下降(P<0.05)。     

氯化镉对小鼠的急性毒性效应

采用Bliss法对小鼠经口灌胃氯化镉溶液（对照组0.0mg/kg;试验组Ⅰ～Ⅵ分别为98.3,122.9,153.6,192.0,240.0,300.0mg/kg）,并对染毒后小鼠的死亡情况、体质量、脏器指数、血液生理指标和病理剖检变化进行分析,以探讨氯化镉对小鼠的急性毒性效应。结果显示,氯化镉LD50为187.03mg/kg;小鼠的体质量随染毒剂量的增加而降低（P〈0.01）;与对照组相比,Ⅰ组小鼠心指数差异不显著（P〉0.05）,其余各组差异显著（P〈0.05）,脾指数和睾丸指数差异极显著（P〈0.01）,其余脏器指数均差异不显著（P〉0.05）;小鼠血液生理指标均在正常生理范围内波动（P〉0.05）;死亡小鼠除大脑组织无明显病变外,以Ⅵ组小鼠各组织的病变较严重,存活小鼠各组织的病变以Ⅰ组较轻微,Ⅴ组较严重。结果表明,氯化镉属于中等毒性物质,对小鼠多个组织均具有不同程度的急性毒性效应。     

猪新发冠状病毒研究进展

当前，由新型冠状病毒（SARS-CoV-2）导致的新型冠状病毒肺炎（COVID-19）疫情正在全球暴发大流行，这也引发业界对于动物源性冠状病毒的高度关注。猪德尔塔冠状病毒（PDCoV）和猪急性腹泻综合征冠状病毒（SADS-CoV）是近年来新发现的猪冠状病毒，不但严重危害到养猪业，对公共卫生安全也具有潜在威胁风险。本文结合国内外现有文献，从PDCoV和SADS-CoV的病原学、病毒起源与进化、致病性以及检测诊断技术等方面进行综述，并提出展望，以拓展对SARS-CoV-2的认识，并为PDCoV和SADS-CoV的后续研究提供参考借鉴。     

地方高校动物医学专业毕业实习的管理

毕业实习是在学生完成理论学习后所进行的一次综合训练,是整个教学过程中重要的实践性教学环节。其目的是使学生综合运用所学的基础理论、专业知识和基本技能,解决生产实践中的实际问题;培养学生严谨的科学态度、独立分析和解决问题的能力及勇于创新的精神。毕业实习前,学生所在系与学生个人、实习单位签订协议,规范三方各自的责任、权利和义务,使毕业实习管理法制化。     

抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选及金标试纸检测方法的建立

以BSA-CAP-HS免疫Balb／C小鼠,用细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞,体内诱生腹水法制备cAP mAb,并鉴定其免疫学特性;依据胶体金免疫层析试验(GICA)原理,以CAP mAb 为金标抗体,研制CAP残留快速检测金标试纸(CAP-Strip),并对其性能进行测定。结果表明,筛选出了3株杂交瘤细胞,其中最好的4F9-B2株间接ELISA效价细胞培养上清为1:1 280,腹水为1:640 000,亲和常数(Ku)为 1．84×1010 L/mol,对CAP的半数抑制浓度(IC50)为0．88μg/L,与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应(CR%)为150%,与其他酰胺醇类和抗菌素类药物无交叉反应;CAP-Strip的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit拟合曲线,目测检测限为0．5μg/L;其敏感性与竞争ELISA试剂盒相当,符合率为100％;可见CAP-Strip具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于CAP残留的快速检测,具有较高的推广应用价值。     

不同精料水平对杂交肉牛瘤胃内环境参数的影响

采用4×4拉丁方试验设计,以干玉米秸为粗料,精料补充料相同,配制精料水平分别为35%、45%、55%、65%的4种饲粮。研究不同精料水平日粮对4头21月龄、体重300 kg左右、安装永久性瘤胃瘘管的杂交阉公牛瘤胃内环境参数的影响。结果表明:试牛瘤胃液平均pH值在6.46~6.84范围内变动。随着精料水平的提高,平均pH值降低,65%精料组与其他各组间差异显著(P<0.05)。瘤胃液平均NH3-N浓度随精料水平的提高而增大,且35%精料组与65%精料组间差异显著(P<0.05)。瘤胃内乙酸和丙酸的摩尔浓度高峰值随着精料水平的提高,有延迟的趋势,但平均值随精料水平的提高而增加,且丙酸摩尔浓度平均值在35%精料组与65%精料组间差异显著(P<0.05)。乙酸与丙酸的摩尔浓度比随精料水平的提高而下降,且35%精料组与65%精料组间差异显著(P<0.05)。     

氯霉素残留检测竞争ELISA试剂盒的研制及其性能测定

应用抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞株建立竞争ELISA(ciELISA)分析方法,研制出CAP残留快速检测试剂盒(CAP-Kit),并对其性能进行了测定。结果表明,CAP-Kit标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,相关系数R2=0.9955,检测范围为0.1~128.0μg.L-1,半数抑制浓度(IC50)为2.4μg.L-1,灵敏度为0.053μg.L-1,检测限为0.1μg.L-1;奶样、肉样的平均添加回收率为88.5%、82.7%,平均批内和批间变异系数均<15%;CAP-Kit与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应(CR%)为150%,与其他酰胺醇类和抗菌药物无CR;基质对CAP-Kit的检测结果影响不大;CAP-Kit在4℃可保存6个月以上。     

磺胺间二甲氧嘧啶人工抗原的合成与鉴定

用重氮化方法将SDM偶联于载体蛋白BSA和OVA上,合成免疫抗原BSA-SDM和包被抗原OVA-SDM,通过紫外扫描(UV)、SDS-PAGE凝胶电泳试验。结果显示:BSA-SDM和OVA-SDM的UV与BSA、SDM的相比均发生了改变,出现了明显的特征峰。这表明半抗原和载体偶联成功。用BSA-SDM免疫BALB/C小鼠,间接ELISA测定多抗上清(pAb)效价。结果表明,获得了高效价的pAb,为SDM残留免疫学检测方法的建立奠定了基础。