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传染性法氏囊病病毒变异株主要免疫基因cDNA的克隆及鉴定 总被引:8,自引:2,他引:6
采用反转录-聚合酶链反应,从1株传染性法氏囊病病毒性本地分离株GZ902中扩增到编IBDV主要免疫蛋白VP2的cDNA片断,大小约为1350bp。将该cDNA片断插入pBssK 粒中,用重组质粒转化大肠杆菌XL1-Blue,成功获得重组质粒转化菌。 相似文献
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肌肉生长抑素基因工程疫苗免疫动物的效果研究 总被引:3,自引:0,他引:3
为检验肌肉生长抑素基因工程疫苗对动物生长的影响,用由大肠杆菌表达的肌肉生长抑素蛋白与油佐制成疫苗,肌肉注射免疫25天龄小白鼠、并观察生长状况,每周称重,纪录结果,饲养至95天龄后试验结束;肌肉注射免疫21天龄幼鸡,饲养至98天龄后进行屠宰,分离胸肌、腿肌并称重。结果,与对照组相比,注射肌肉生长抑素基因工程疫苗的小白鼠体重最高增加17.17%;鸡体重最高增加14.27%,免疫效果比较理想,达到了预期的目的。 相似文献
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酵母在畜禽业中的研究与应用 总被引:3,自引:0,他引:3
酵母是一类单细胞微生物,属真菌类。目前已知的酵母菌有95余种。由于酵母菌个体大、蛋白质含量高易分离、杂食性强易培养、生长期短、代谢产物多、综合利用广等特点而倍受关注。随着科技的发展和人们对养殖业需求的不断上升, 相似文献
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水泡性口炎病毒血清型特异LUX实时荧光RT-PCR检测方法的建立 总被引:5,自引:0,他引:5
采用LUX荧光核酸扩增技术原理,以水泡性口炎病毒(VSV)NJ、IND型NS基因为模板分别设计并合成单标记LUX荧光引物,建立血清型特异的VSV荧光RT—PCR检测方法。试验表明,两种型特异的LUX荧光RT-PCR能分别特异地鉴定VSV血清型,对口蹄疫、猪水泡病等病毒以及对照细胞、健康动物组织RNA样品的检测结果均为阴性。对比检测试验表明,LUX荧光RT—PCR的检测敏感性比常规RT-PCR提高达10倍以上,对VSV细胞增殖病毒液的检测灵敏度可达1 TCID50。对人工感染豚鼠样品以及临床样品的检测试验证实,该LUX荧光RT—PCR可有效检测到人工感染动物组织以及进口牛临床样品中的水泡性口炎病毒,并能鉴定感染病毒血清型。所报道的检测方法,包括样品核酸提取、LUX荧光RT—PCR以及熔解曲线分析,可在3h内完成。 相似文献
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益生素与免疫刺激作用 总被引:11,自引:0,他引:11
胃肠道中作为益生菌的微生物通过三条途径刺激动物的免疫系统。其一 ,它们能作为活细胞在动物胃肠道表面定植与繁殖 ,增殖到一定数目 ,刺激动物免疫系统 ;其二 ,由死细胞释放出来的抗源物质(包括脂多糖、肽聚糖和DNA等大分子物质 )被动物吸收后直接刺激动物免疫系统。其三 ,乳杆菌 (Lac tobacillus)通过影响胃肠道中微生物菌群组成来间接影响免疫系统。目前来说这三种方法哪一种被广泛采用还没有定论 ,但显而易见的是某一菌株的定植、繁殖能力以及其在动物胃肠道存在的数量同它的免疫刺激能力的强弱是相关联的。益生菌对动… 相似文献
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鸡β-防御素-1基因(Gal-1)在大肠杆菌中的融合表达与纯化 总被引:2,自引:0,他引:2
内源性抗菌多肽防御素是机体先天性免疫系统的重要组成部分,可帮助机体防御外界病原微生物的入侵。鸡β防御素-1(Gallinaein-1,Gal-1)对许多致病菌都具有杀菌作用,具有很好的研究开发价值。本研究利用PCR技术从重组质粒pGEM-TEasy-gal-1中克隆出Gal-1基因成熟肽区,将该基因插入原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组质粒pET-32a(+)-gal-1,然后用重组质粒转化大肠杆菌BL-21。挑选阳性克隆菌,用浓度为0.5mmol/L的IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE电泳显示在目标位置约25kD处出现了条带并用Werstern Blot进行了鉴定。表明Gal-1基因在大肠杆菌以融合形式得到了表达。经灰度扫描显示重组蛋白表达量占细菌总蛋白的15.54%。用50%Ni-NTA纯化树脂进行层析纯化,在洗脱液E中出现单一条带。Gal-1多肽在pET-32a(+)质粒表达体系中成功表达为鸡防御素多肽下一步的研究奠定基础。 相似文献
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鸡传染性支气管炎病毒CQ/01/2004株的分离与鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
2004年从重庆某肉用鸡场疑似鸡传染性支气管炎的病鸡中采集病料,按常规处理后接种9~10日龄鸡胚,通过鸡胚连续传代培养3代,并对该分离毒株的鸡胚致病性、血凝性和NDV的干扰特性进行检测.同时进行了动物回归试验。结果表明,该分离株具有IBV感染特征,可使鸡胚胚体出血、蜷缩、矮化;该分离毒株无直接血凝性,对NDV有明显的干扰作用;动物回归试验中有75%的感染鸡在10d内发病或死亡。剖检病死鸡可见肾苍白、肿胀,肾小管内充塞大量尿酸盐,支气管有出血点、有大量粘液。采用反转录.聚合酶链式反应(RT-PCR)技术对CQ/01/2004的纤突蛋白S1基因进行扩增、克隆和序列测定,结果表明该基因具有IBVSl基因的共有分子特征,将测序结果提交GenBank进行同源性检索,发现分离株CQ/01/2004和J株S1的同源性最高,核苷酸同源性为94%,氨基酸同源性为89.4%,与M41的核苷酸同源性为80.6%,氨基酸同源性为78.0%。试验结果表明,分离的病毒株CQ/01/2004为鸡传染性支气管炎病毒。 相似文献