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鸡β-防御素-3的克隆与诱导表达 总被引:7,自引:1,他引:7
利用反转录PCR(RT—PCR)与套式PCR技术检测Gal-3基因在鸡体不同组织的分布表达。实验结果表明Gal-3基因在法氏囊、皮肤、舌头、肺脏、骨髓、气管等组织中广泛分布,在肾脏、脾脏、肝脏、胰脏等组织中没有检测到。对从鸡骨髓中扩增出来的β-防御素(Gal-3)cDNA进行克隆测序表明扩增出的cDNA碱基数为297bp,与GenBank中的Gal-3cDNA序列完全相同。核苷酸序列比较表明在同源性上,Gal-3与Gal-1、Gal-2基因核苷酸相似性分别为75%、50%,同火鸡GPV-1基因同源性最高,达9l%。体外诱导表达实验表明在气管上皮细胞中LPS与灭活卡介苗可以诱导Gal-3的表达;Gal-3在法氏囊细胞、肺上皮细胞的表达为持续性表达。 相似文献
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鸭源H9亚型禽流感病毒的分离与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
从广东各地鸭群的392份泄殖腔样本中分离到3株病毒。用琼脂扩散试验(AGP)及血凝抑制试验(HI)证实3个分离株均为H9亚型禽流感病毒(AIV)。3个AIV分离株都能凝集人、鸡、山羊、豚鼠、兔的红细胞,但不能凝集猪红细胞;所有分离株血凝素(HA)对热不稳定;60℃加热处理10 m in后,病毒失去对鸡胚的感染性;3个AIV分离株的半数鸡胚感染剂量(E ID50)分别为107.2/0.2 mL、105.8/0.2 mL和106.1/0.2 mL。 相似文献
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根据GenBank上登录的堆形艾关球虫Ea1A基因序列,设计了1对引物,以抽提的广东株的总RNA为模板,利用反转录一聚合酶链反应(RT—PCR)扩增获得了Ea1A基因部分片段,并将此片段克隆至pGEM—T载体中,经PCR、限制性内切酶分析和克隆片段序列测定、比较,证实了克隆片段的可靠性。 相似文献
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鸽Ⅰ型副粘病毒ZQ98-1株F基因全序列的克隆和序列分析 总被引:5,自引:0,他引:5
本研究报道了PMV-1/鸽/肇庆/1/1998株(ZQ98-1)F基因的全序列。该基因核苷酸序列长度为1712bp,编码由553个氨基酸组成的F0多肽。F0蛋白裂解位点处的氨基酸序列为^112K-R-Q-K-R-F^117,F0蛋白中有3个与病毒副合相关的重要抗原位点和6个糖基化位点。经比较,鸽Ⅰ型副粘病毒ZQ98-1株和PMV-1/Pigeon/England/1168/84(1168/84)株、Warwick株及Ulster株核苷酸序列的同源性分别为95%、90%和89%,氨基酸的为异率分别为5.4%、6.2%及9.1%。 相似文献
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鸡、鹅肌肉生成抑制因子基因的克隆及序列分析 总被引:5,自引:0,他引:5
采用反转录.聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从鸡胚、鹅胚中扩增得到肌肉生成抑制因子基因,分别克隆到pGEM-T Easy载体中进行序列测定.结果表明,克隆得到的MSTN基因序列均由1128个核苷酸组成,MSTN基因序列同源性为94.6%,推导相应氨基酸序列的同源性达97.9%. 相似文献
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采用RT-PCR方法扩增了H9N2亚型禽流感病毒(AIV)广东株的血凝素基因HA.将HA基因克隆到笔者所设计的原核表达载体pMBX上,成功构建重组表达质粒pMBX-HA.将其转化到E.coli BL-21感受态细胞中表达,经SDS-PAGE可检测到相对分子质量约为96200的融合蛋白,表达产物占菌体总蛋白的29.5%.经蛋白可溶性分析看出,融合蛋白90%以上是以可溶形式表达的.Western-blot证实,可溶表达的融合蛋白与H9N2 AIV阳性血清具有良好的免疫反应性.将可溶表达的融合蛋白用体积分数为50%的Ni-NTA树脂过柱纯化,用融合蛋白作抗原,通过ELISA方法,能特异性地检测出禽流感阳性血清. 相似文献
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酯酶同工酶的一种新染色法的初步研究 总被引:6,自引:0,他引:6
酯酶可将α -醋酸萘酯和 β -醋酸萘酯水解生成醋酸和萘酚 ,利用KMnO4可与萘酚反应生成有色物质的性质可对酯酶同工酶进行染色。 相似文献
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根据现有鸡γ-干扰素基因序列设计引物,应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从Con A诱导培养的鸡脾淋巴细胞中扩增得到石岐杂鸡γ-干扰素(spzChIFN-γ)基因,将克隆到pGEM-T载体中,进行序列测定,结果表明,克隆得到的ChIFN-γ基因的开放阅读框架由492个核苷酸组成,和其他ChIFN-γ基因的同源性达99%,与火鸡γ-干扰素基因的同源性性为96%,与鸭γ-干扰素基因的同源性为81%,推导的石岐杂鸡IFN-γ氨基酸序列与其他已发表的ChIFN-γ氨基酸序列完全一致,与火鸡和鸭IFN-γ氨基酸同源性分别为97%和67%。 相似文献