鲤鱼肝原代细胞的分离与培养方法

本研究在酶消化法的基础上,通过比较不同的肝组织分离和培养条件,获得鲤鱼肝原代细胞培养的最佳培养方法和条件。首先,结合细胞数量和台盼蓝染色所得的细胞存活率,比较了胰蛋白酶消化鲤鱼肝组织的不同反应温度和时间,结果表明:肝组织用0.25%(m/V)胰蛋白酶在25℃消化40 min时细胞分离效果最好。其次,经酶消化得到的肝原代细胞粗制液,设置4种不同的细胞纯化和培养条件:1)将细胞直接重悬于含10%胚牛血清(FBS)的L-15/DMEM培养基中培养;2)以10%鲤鱼血清取代培养基中的胚牛血清重悬细胞并培养;3)将细胞经Percoll液密度梯度离心纯化后,重悬于含10%胚牛血清的L-15/DMEM培养基中培养;4)细胞经Percoll纯化后,重悬于含10%鲤鱼血清的L-15/DMEM培养基中培养。利用光学显微镜观察肝细胞的形态,进而通过HE染色法检测,结果表明经Percoll纯化后,肝细胞纯度显著提高;采用MTS/PMS法检测肝细胞的增殖情况,结果表明鲤鱼血清代替胚牛血清培养细胞,肝细胞活力显著提高。本研究将为建立稳定的毒理学肝原代细胞实验模型奠定基础。     

种鸡开产前免疫不同新城疫-传染性支气管炎-禽流感H9三联油苗的效果观察

为了探讨尽可能延长母鸡开产后免疫保护期的可能性,本试验选用市售的两种新城疫(ND)-传染性支气管炎(IB)-禽流感(AI)H9三联灭活商品疫苗在广西地区主要地方品种三黄鸡的两个品系黄1和黄2上分别进行对比免疫试验。种鸡开产前的150日龄分别使用疫苗A(精制浓缩型油苗)、疫苗B(普通油苗)免疫,然后分别于免疫时以及免疫后的1个月、2个月、3个月、4个月和5个月分别使用HI试验和ELISA测定两组鸡只相应产生的血清抗体滴度。结果表明,在黄1品种上的试验,疫苗A免疫组的ND抗体水平高于疫苗B免疫组,两组鸡的H9、IB抗体水平则无明显差异;在黄2品种的试验,疫苗A免疫组的ND、H9、IB抗体水平均高于疫苗B免疫组;开产前免疫疫苗A后5个月,黄1和黄2品种均仍能维持较高的抗体水平,其中黄1品种可推迟补免时间20多天,黄2品种推迟补免时间1个月。     

人工鱼(藻)礁区生态修复效果评估指标体系与实例应用

本文从生态修复效果含义出发,构建了以水环境、沉积物环境、生物环境和渔业资源为评价指标的人工鱼(藻)礁区生态修复效果评估指标体系,并以秦皇岛鱼(藻)礁示范区为实例进行分析,实例分析结果显示鱼礁示范区生态修复效果综合评价指数(REE indx)5月和9月分别为75.5和71.5,判定结果分别为修复效果明显和有修复效果。研究结果表明,建立的人工鱼(藻)礁区生态修复效果评估指标体系具有较强的可操作性,可以为人工鱼(藻)礁生态修复效果评估提供参考。     

饲料脂肪水平对俄罗斯鲟幼鱼生长、血液生化指标及抗氧化性能的影响

以鱼油、豆油、亚麻籽油等比例混合,配成脂肪含量分别为5.45%(L1)、7.00%(L2)、10.44%(L3)、14.37%(L4)、16.34%(L5)、18.91%(L6)及20.15%(L7)的等氮饲料,饲喂俄罗斯鲟(Acipenser gueldenstaedtii)幼鱼[(6.20±0.02)g]8周。实验结果表明,L3组的终末体质量、增重率最大,但与L2组间无显著差异(P0.05),L3组的蛋白质效率显著高于其它组(P0.05),且饲料系数最低。L6和L7组终末体质量、增重率和蛋白质效率显著低于L2和L3组(P0.05)。将幼鱼的增重率与饲料脂肪水平进行回归分析,得出俄罗斯鲟幼鱼在饲料脂肪水平为10.69%时生长最佳。随着饲料脂肪水平的升高,各组鱼的肝体比和体粗脂肪有上升趋势,其中肝体比在饲料脂肪含量大于14.37%时显著增大(P0.05)。血清中的甘油三酯、胆固醇含量也随脂肪水平升高而显著提高(P0.05),提示脂肪过高会影响俄罗斯鲟幼鱼的生长,降低蛋白质效率,导致脂肪在体内的过量积蓄。L7组鱼血清中高密度脂蛋白胆固醇含量最高,而L1组鱼的低密度脂蛋白胆固醇含量最高。肝脏脂蛋白酯酶活性随饲料脂肪水平的提高而升高,脂肪酸合成酶活性则随脂肪水平升高而降低,提示饲料脂肪水平的提高会促进鱼体脂肪的分解代谢。肝脏丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性均随着饲料脂肪水平的提高显著升高(P0.05),表明脂肪含量过高会导致脂质过氧化,引发机体抗氧化酶活性的升高。综合俄罗斯鲟幼鱼的生长、血液指标及抗氧化性能,建议生产中将幼鱼的饲料脂肪水平控制在7.00%~10.69%。     

盐酸赛拉嗪麻醉时对犬血清糖、脂、蛋白质含量的影响

研究临床上动物手术前应用盐酸赛拉嗪麻醉时对犬血清中3大营养代谢物质含量的影响。挑选8只健康犬,试验前犬禁食24 h、禁水12 h,分别在股四头肌肌肉注射0.24 mg/kg体重的塞拉嗪。分别在注射麻醉药后0、0.5、1、1.5、2 h颈静脉采血2 m L,常规分离血清,检测葡萄糖、甘油三脂、总胆固醇、总蛋白和白蛋白的含量。结果与试验开始相比,0.5 h、1.5 h、2 h血清葡萄糖含量极显著增加(P<0.01),而各时间点之间无显著差异(P>0.05);甘油三酯含量在试验开始后1.5 h和2 h时极显著下降(P<0.01)。整个试验期间血清总胆固醇、总蛋白和白蛋白含量均无显著变化(P>0.05)。结论是临床应用赛拉嗪用于犬麻醉时应密切关注由于塞拉嗪引起的血糖和甘油三酯含量变化对动物机体的影响,减少麻醉意外的发生。     

城郊综合游憩型绿道选线适宜性评价因子研究

城郊综合游憩型绿道能够综合利用城郊优质的自然生态、农业生产和乡村文化游憩资源,为城镇居民闲暇休闲提供具有吸引力的线性游憩空间。绿道选线的科学性决定了绿道建设难度、投入和成效。运用适宜性分析和AHP层次分析方法,结合城郊特征,遴选出绿道选线基础指标因子,从游憩资源和游径两个层面构建评价矩阵并进行权重计算。     

山药不同处理方式的保存效果

运用涂抹草木灰、石蜡及自然干燥、吹风机干燥等方法对山药茎段切口进行处理,研究不同切口处理方式对山药外观及品质的影响;比较不同浓度壳聚糖与15%柠檬酸组合对切片的保鲜影响,进行山药茎段切口处理方法及切片表面处理方法的筛选。结果表明:室温下涂抹草木灰对鲜切山药茎段的贮藏效果最好;4℃条件下,15%柠檬酸+0.5%壳聚糖处理对山药切片的保鲜效果最好。     

外源ABA对低温胁迫下小豆幼苗生理及产量的影响

在盆栽条件下，以耐冷性不同的2个小豆(Vigna angularis）品种龙小豆4号（耐冷型）和天津红（冷敏型）为材料，于苗期在人工气候室进行低温（4℃，持续12 h）及预喷施外源脱落酸（abscisic acid，ABA）处理，旨在研究苗期低温胁迫下外源ABA对小豆叶片逆境生理指标（H₂2O₂2、丙二醛（MDA）、抗氧化酶活性、可溶性物质）和产量因子的调控效应。结果表明：幼苗期低温处理12 h后，龙小豆4号和天津红小豆叶片H₂2O₂2含量分别提高34.82%和27.10%；MDA含量分别提高65.56%和83.79%；SOD和POD活性分别提高6.67%和18.48%、45.53%和102.44%；脯氨酸含量分别提高33.12%和24.41%。低温处理导致龙小豆4号百粒重下降2.58%，与喷施清水相比，低温处理12 h后天津红的单株荚数和百粒重分别下降18.55%和10.61%(P＜0.05）。喷施外源ABA具有抵御低温的作用，外源ABA促进龙小豆4号和天津红叶片脯氨酸含量提高9.13%和19.76%；H₂2O₂2含量降低7.63%和8.36%；MDA含量降低10.18%和20.27%；SOD和POD活性分别提高9.06%和13.57%、8.26%和28.51%，同时百粒重分别提高8.56%和8.92%。低温胁迫下，不同品种小豆的生理应激存在显著差异；喷施外源ABA能够有效缓解低温胁迫对小豆的伤害。