加味四君子汤对脾气虚犬血清细胞因子水平、肠道免疫球蛋白水平以及脾脏组织形态及功能的影响

【目的】研究加味四君子汤对脾气虚犬免疫机能的影响.【方法】将24只1岁龄健康‘比格犬’随机均分为对照组、脾气虚组、自然恢复组和加味四君子汤组,用番泻叶药液复制犬脾气虚模型.第7 d造模成功,脾气虚组犬处死采样,对照组和自然恢复组犬饲喂基础日粮,加味四君子汤组犬在基础日粮中添加2%加味四君子汤.试验期14 d.第0、7、14天,采集血液,采用酶联免疫吸附法测定血清中干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-6水平;在第14天,全部试验犬处死采样,计算脾脏指数,测定脾脏组织中促吞噬肽(Tuftsin)水平,观察脾脏显微和超微结构的变化;免疫组织化学(IHC)检测小肠各段分泌型免疫球蛋白A(sIgA)蛋白阳性表达水平,荧光定量PCR检测小肠各段免疫球蛋白A(IgA)、IgG、IgM mRNA相对表达量.【结果】与对照组犬相比,脾气虚犬血清细胞因子IL-4、IL-6水平显著升高(P0.05),IFN-γ、IL-2水平显著降低(P0.05);脾脏指数、脾脏Tuftsin水平、小肠sIgA蛋白阳性表达水平以及IgA、IgG、IgM mRNA的相对表达量均显著或极显著降低(P0.05,P0.01).经加味四君子汤治疗后,脾气虚犬上述指标和脾脏组织结构恢复正常.【结论】脾气虚犬免疫功能低于对照组犬,饲粮中添加加味四君子汤可以显著改善脾气虚症状,增强机体免疫机能.     

饲喂高蛋白饲粮对雏鹅盲肠微生物菌群的影响

【目的】研究饲喂不同蛋白质质量分数的饲粮对雏鹅盲肠微生物菌群结构和数量的影响。【方法】选取1日龄雁鹅72只,随机分成3组:A、B和C组分别饲喂质量分数为16%、20%和24%的粗蛋白。在第14天每组取6只雁鹅盲肠内容物,进行细菌培养、分离和计数;另每组取3只雁鹅盲肠内容物,根据细菌16S rDNA的保守性设计引物,采用IlluminaHiSeq测序平台对细菌16S rDNA的V4区基因进行测序,根据序列进行微生物物种多样性分析。【结果】A、B和C组共获得1 066 175条高质量的细菌16S rDNA序列,3组共有操作分类单元(OTU)数目为1 013个,主成分1(PC1)对检测到的总微生物的贡献率为46.64%,主成分2(PC2)的贡献率为16.46%。门水平上的优势菌群为放线菌门Actinobacteria、拟杆菌Bacteroidetes、厚壁菌门Firmicutes、变形菌门Proteobacteria和疣微菌门Verrucomicrobia等;科水平上的优势菌群为拟杆菌科Bacteroidaceae、肠杆菌科Enterobacteriaceae、毛螺菌科Lachnospiraceae、疣微菌科Ruminococcacea和理研菌科Rikenellaceae;属水平上的优势菌群为艾克曼菌属Akkermansia、拟杆菌属Bacteroides、棒状杆菌Corynebacterium和乳酸菌属Lactococcus。与A组相比,C组双歧杆菌Bifidobacterium的数量显著降低(P0.05),C组大肠埃希菌Escherichia coli和沙门氏菌Salmonella数量显著升高(P0.05)。【结论】饲喂高蛋白饲粮使雏鹅盲肠微生物菌群多样性和丰度发生变化,使双歧杆菌和乳酸杆菌的数量减少,使大肠埃希菌和沙门氏菌数量增加。     

DON暴露对断奶仔猪抗氧化水平、血清生化指标及小肠黏膜形态的影响

旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)暴露对断奶仔猪抗氧化水平、血清生化指标及小肠黏膜形态的影响。选择健康的“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪30头,随机分成3组,对照组饲喂基础饲粮,低剂量组和高剂量组分别饲喂1和2 mg·kg^-1的DON饲粮,试验期为60 d。试验结束时,所有仔猪采集血液样本,用于检测抗氧化性能、血清生化指标及肠道通透性。每组选5头仔猪进行剖杀,取小肠组织观察病理变化。结果显示,与对照组相比,DON显著降低了断奶仔猪血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性(P<0.05),提高了一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)水平(P<0.05),并引起碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GGT)、肌酐(CREA)、α-淀粉酶(α-AMY)、脂肪酶(LIP)、肌酸激酶(CK)活性显著升高(P<0.05),谷草转氨酶(AST)活性显著降低(P<0.05),血清二胺氧化酶(DAO)及D-乳酸(D-LA)含量随DON剂量的增加而显著升高(P<0.05)。低剂量DON可使小肠黏膜发生部分形态改变,而高剂量DON使小肠组织严重受损。试验结果表明,DON暴露可改变断奶仔猪机体抗氧化反应,引起部分生化指标异常,造成肠道黏膜损伤,增加肠道通透性,对仔猪具有一定的毒性作用。     

以能力培养为核心的动物医学专业实践教学研究

按照动物医学（兽医）专业培养双创型人才的要求和卓越兽医师的需求，建设以开放性实训（实验）中心为特色的动物医学专业实践教学，以强化学生创新素质和实践能力的培养核心，构建动物医学专业实践教育新体系，以期为培养不同行业需要的兽医人才提供强有力的保障。     

真菌毒素的污染、危害及其检测技术

真菌毒素是农产品及饲料的主要污染源之一,本文阐述了常见真菌毒素的种类,包括黄曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、玉米赤霉烯酮、伏马菌素以及赭曲霉毒素等;分析了它们在农产品及饲料中的污染情况以及对人和动物的危害性;并对真菌毒素检测技术进行了简要介绍。     

醋酸甲孕酮单克隆抗体的制备与鉴定

用人工合成的醋酸甲孕酮-牛血清白蛋白(MPA-BSA)作为抗原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术筛选得到1株稳定分泌醋酸甲孕酮单克隆抗体的杂交瘤细胞株4C11A3B6,该细胞株经体外传代和冻存复苏后抗体分泌稳定。间接ELISA测定培养上清效价为1∶640,诱生腹水效价为1∶2.56×106。经鉴定:杂交瘤细胞分泌的抗体亚型为IgG2а。竞争抑制ELISA(ciELISA)检测显示其IC50为22 ng/mL,与常见抗生素及结构类似物的交叉反应小,表明该单抗具有较好的敏感性和特异性。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)抗原化分子设计及其检测

利用琥珀酸酐法对DON分子进行结构修饰,采用高效液相色谱法和薄层层析法进行检测,并将衍生物与载体蛋白牛血清白蛋白进行偶联,设计人工抗原,通过紫外分光光度法、SDS-PAGE和ELISA试剂盒分析偶联结果。结果显示,成功得到了DON-BSA,偶联物中DON浓度为0.797μg/μL。     

高铜日粮对早期断奶应激仔猪生长性能和抗氧化酶活性的影响

选用"长大定"三元杂交断奶仔猪研究高铜日粮对早期断奶应激仔猪生长性能和抗氧化酶活性的影响,于断奶后称重并计算采食量,观察断奶后腹泻情况,同时于前腔静脉采血,测定血清铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)和血清铜蓝蛋白(CP)活性.结果表明,高铜日粮能显著提高断奶应激仔猪体重、日增重和日采食量,降低料重比和断奶后腹泻率,提高血清超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)和血清铜蓝蛋白(CP)活性.     

脂肪间充质干细胞对CCl4致犬急性肝损伤的临床疗效

为了研究脂肪间充质干细胞（adipose mesenchymal stem cells, ADMSCs）对四氯化碳（CCl4）致犬急性肝损伤的治疗效果,探索治疗犬肝脏损伤性疾病的新药物。选取20只健康犬平均分成A、B、C、D共4组,用50 %的CCl₄花生油溶液,按照0、0.5、1.0和1.5 mL·kg^-1的剂量连续7 d腹腔给药,观察临床症状,并检测生化指标,于第3天和第7 天每组随机选择2只犬解剖取肝脏组织检测病理变化。用最佳造模剂量造模15只犬,分成E、F和G 3组,每组5只。E组不治疗,F组经尾静脉移植犬脂肪间充斥干细胞（adipose mesenchymal stem cells, ADMSCs）治疗,G组普通治疗,均连续治疗10 d,监测各组临床症状、生化指标并在治疗第5和第10 天肝脏组织病理学对比治疗效果。结果显示：（1）造模期间：A组各项指标无明显变化;B组各项指标改变后又恢复正常;C组临床症状恶化,在1 ~ 6 d谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）的活性显著上升,肝脏组织有明显病变,无犬只死亡;D组临床症状恶化,ALT和AST活性一直显著上升,肝脏组织有明显病变,并死亡2只。（2）治疗期间：E组各项指标不断恶化,死亡4只;F组5只犬各项指标均好转,无死亡;G组临床症状、生化指标改善,组织病理学未见好转,无死亡。试验表明,连续7 d腹腔注射1 mL·kg^-1 50 % CCl₄花生油溶液可以建立稳定可靠的犬急性肝损伤模型,尾静脉途径移植的ADMSCs对CCl₄所致犬急性肝损伤有治疗效果,且比普通对症治疗效果更佳。