连翘提取物对常见致病菌的体内外抑菌活性测定

为观察连翘提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌的抑菌活性,试验采用试管二倍稀释法,测定连翘提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌活性;采用相同浓度致病菌灌胃小鼠后,分别用连翘提取物灌胃治疗,测定小鼠十二指肠、空肠、回肠和盲肠中肠道菌群数量。结果表明,无论是在体外还是在体内,连翘提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌均具有抑制作用,且对金黄色葡萄球菌抑制性最强,对沙门氏菌抑制性最弱;通过灌注连翘提取物,显著降低了各致病菌致病后小鼠的死亡率。通过研究得出以下结论,连翘提取物对常见的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌具有较明显的体内外抑菌作用。     

金黄色葡萄球菌IsdD基因的克隆与表达

金黄色葡萄球菌是一种重要的人畜致病菌,IsdD属于金黄色葡萄球菌Isd系统中的重要成员。本研究根据GenBank报道的金黄色葡萄球菌IsdD基因序列设计一对特异性引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板扩增出目的片段IsdD,将其用NcoⅠ和XhoⅠ双酶切后连接到载体pET32a(+)上,构建重组质粒pET32a(+)-IsdD。序列分析结果显示,目的基因序列与网上的IsdD序列相比核苷酸序列和氨基酸序列同源性均在98%以上。将鉴定正确的重组质粒转化到大肠杆菌E.coli BL21中并成功诱导表达出大小为61.3 ku的蛋白,这为下一步研究IsdD蛋白的结构和功能奠定了良好基础。     

绵羊似问号钩端螺旋体的分离及PCR鉴定

钩端螺旋体病(Leptospirosis)是由致病性钩端螺旋体引起的一种急性传染病[1],同时也是重要的人畜共患病之一[2-3].钩端螺旋体(Leptospira)属革兰阴性需氧菌,该菌呈纤细、螺旋致密型,一端或两端     

青蒿素与牛病毒性腹泻病毒NS5B蛋白的分子对接预测及其抗病毒作用

【目的】 采用分子对接以及体外试验确定青蒿素对牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus,BVDV）复制的抑制作用,为抗病毒药物和制剂开发提供新思路。【方法】 以BVDV-NS5B蛋白为作用靶点,通过PDB数据库检索蛋白三维晶体结构,并对其结构进行适当修饰处理;检索TCMSP数据库中的青蒿素结构,应用Autodock软件将两者进行分子对接及结合能打分。随后采用CCK-8试剂盒测定青蒿素对MDBK细胞的最大安全浓度;将选定浓度的青蒿素进行梯度稀释,采用先加病毒后加药物、先加药物后加病毒、中药和病毒同时作用的3种不同加药方式进行药物抗病毒试验,确定对病毒的最佳药物抑制浓度、预防浓度和杀灭浓度。应用实时荧光定量PCR法检测3种药物作用方式下BVDV的拷贝数,进一步明确药物对BVDV复制的作用。【结果】 分子对接数据表明青蒿素与BVDV-NS5B存在相互作用,结合自由能为-28.6748 kJ/mol。青蒿素在MDBK细胞上的最佳药物安全浓度为100 μmol/L。3种作用方式下青蒿素浓度为100 μmol/L时均可有效影响BVDV的复制,青蒿素对BVDV的抑制作用最为明显。【结论】 青蒿素可与BVDV-NS5B蛋白靶点互作,并能在MDBK细胞上有效抑制BVDV的复制,本研究为抗BVDV中药筛选奠定了基础。     

鸡肾型传染性支气管炎地方株分离鉴定

自黑龙江省牡丹江、密山两地自然发病鸡场分离到２株病毒。经鸡胚连续盲传至第５代时出现胚体蜷缩成团状、暗淡无光，头、翅、肢有出血点。经理化测定试验、气管环感染试验、回归试验等检测，鉴定分离的２株病毒为鸡肾型传染性支气管炎病毒株，暂定名为ＭＫ、Ｍ２。     

肉兔多杀性巴氏杆菌病的诊断与防治

1997年12月，鸡西地区某养兔户饲养的家兔突然爆发了一种以发病迅速、死亡快为特征的传染病，该兔群虽注射了兔病毒性出血症、巴氏杆菌、魏氏梭菌、波氏杆菌四联灭活苗，仍陆续发病24只，死亡兔13只，经病原分离鉴定，确诊为兔多杀性巴氏杆菌病。现报告如下：1 发病情况 该养兔户饲养兔85只，均为肉兔，断乳兔均注射过四联苗，剂量为1mL／只。发病兔精神不振，体温升高（40．6～41．7℃），呼吸迫促，到下午死亡3只，第2d死亡6只，第3d又死亡4只，死亡兔均无明显的临床症状，有的兔精神、食欲虽未见大异常，可次日已死于兔笼中；死亡兔以青…     

"黄白散"对家兔接种兔病毒性出血症疫苗后免疫功能的影响

在注射兔病毒性出血症（ＲＨＤ）疫苗后，３０只家兔随机分为两组，试验组家兔饲喂含１．５％黄白散的饲料。从接种到第１８０ｄ每组取兔８只，每隔１５ｄ采血１次，检测血凝抑制（ＨＩ）抗体；在接种前１ｄ及接种后５，１０，１７，２４，３１，４１，５１ｄ，每组取兔１０只，采血检测ＡＮＡＥ＾＋淋巴细胞百分率；在１８０，２４０，３００ｄ时，每组分别取兔５只做攻毒保护试验。结果表明：两组家兔ＨＩ抗体峰值分别为７．３Ｌｏ     

不同凝固酶基因型牛源金黄色葡萄球菌主要致病因子的检测及分析

采用PCR的方法对不同凝固酶基因型的30株奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的主要致病因子进行检测，包括α溶血素（α-hemolysin）、β溶血素（β-hemolysin）、白细胞毒素F（LukF）、白细胞毒素S（LukS），结果显示：在28株分离株中检测到LukF和LukS；在8株和3株分离株中检测到β、和α溶血素，其分别占分离株的93％、26．7％和10％。这些致病因子在各基因型菌株间的分布并不表现出相关性，而是广泛的分布在各个基因型菌株间。     

奶牛腐蹄病的治疗与预防

奶牛腐蹄病是一种以蹄部角质腐败，趾间皮肤和组织腐败、化脓为特征的局部化脓性、坏死性炎症。它能引起牛蹄真皮坏死、化脓，角质溶解及蹄间肉芽增生。反刍动物特别是牛、羊较常见，北方地区的春季和夏季，在某些牛群中可引起地方性流行，其发病率高，一般约为8％～20％，有的高达30％-50％。     

牛源金黄色葡萄球菌凝固酶基因的分型

为了了解我国不同地区奶牛场金黄色葡萄球菌基因型的分布情况,采用凝固酶基因（Coa）扩增的分型方法,对在奶牛乳房炎奶样中所分离到的26株金黄色葡萄球菌进行了分型。结果显示,26株金黄色葡萄球菌共分为5个基因型,黑龙江省分离株以PCR 3型为主（10/16）。发现在同一牛群中的分离株可以存在相同的基因型,也可以存在不同的基因型;而不同牛群中的分离株也可属于同一基因型。这种结果提示,在某个或某些牛群中存在某一金黄色葡萄球菌的流行型,但也可能存在多个金黄色葡萄球菌的克隆。