双低油菜稀植栽培的生育性状及其配套技术

油菜稀植栽培是近几年兴起的一种“小、壮、高”栽培形式。它既发挥了油菜个体的生长潜力,又为优良群体的建立提供了良好的空间环境。１９９８年秋播,丹阳市农技推广站等单位承担了镇江市下达的双低油菜稀植生产试验及肥料运筹试验。旨在分析稀植栽培条件下双低油菜的生育性状,筛选最佳施肥方法,探索其栽培要点,为大面积推广提供依据。１　材料和方法１１　大区生产试验　在丹阳市陵口农技站实施,面积１３３４ｍ２,品种８５１８,４０００株／６６７ｍ２。以常规密度６７００株／６６７ｍ２作对照。总用纯Ｎ１５５ｋｇ,Ｐ２Ｏ５…     

稻瘟病菌单克隆抗体的研究(英文)

Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅｇｒｉｓｅａ（Ｔ．Ｔ．Ｈｅｂｅｒｔ）Ｙａｅｇａｓｈｉ＆Ｕｄａｇａｗａ［ａｎａｍｏｒｐｈ：Ｐｙｒｉｃｕｌａｒｉａｇｒｉｓｅａ（Ｃｏｏｋｅ）Ｓａｃｃ．］ｉｓａｔｙｐｉｃａｌｈｅｒｍａｐｈｒｏｄｉｔｉｃｆｉｌａｍｅｎｔｏｕｓａｓｃｏｍ...     

耕牛喘气病(暂定名)初探

1978年以来,我县耕牛出现了一种临床上以发热、喘气、流鼻液、臌胀、水肿、肺水肿(气肿)、肺与胸膜粘连、胸、腹腔积液为主的疾病。据初步统计,6个乡、镇49个村委共有491头耕牛发病,死亡221头。从中分离出一株肺炎克雷伯氏杆菌菌株(象82菌株)。特将情况报告如下。     

水稻机械插秧密度对水稻产量的影响

为了探索水稻机械化育秧、插秧技术,降低水稻种植成本,以机代劳让劳动密集型向轻简化、集约化、标准化方向转变,降低劳动强度,减少用工,提高水稻种植效益,结合水稻高产创建工作,2013年在协税镇枣林村一组特设水稻机育插秧密度试验。     

齿兰环斑病毒外壳蛋白的原核表达、抗体制备及检测应用

齿兰环斑病毒(Odontoglossumringspot virus,ORSV)是感染兰花的主要病毒之一.用RT-PCR方法从感染ORSV兰花中克隆到该病毒的477 bp外壳蛋白基因(CP),外壳蛋白基因再亚克隆到原核表达载体pET-32a中构建重组原核表达载体pET-32a-CP;将重组表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,Ni2+-NTA亲和柱纯化获得分子量约为37 ku含硫氧还蛋白的融合蛋白.以纯化的重组蛋白为抗原免疫新西兰大白兔制备ORSV外壳蛋白的多克隆抗体,并用制备的多抗建立了可靠、灵敏、特异的检测ORSV的免疫捕获RT-PCR及dot-blot ELISA方法,为该兰花病毒病的诊断、兰花抗病育种和脱毒苗的建立打下了基础.     

免疫斑点法和免疫捕获RT-PCR检测黄瓜绿斑驳花叶病毒

黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)是葫芦科作物上重要的病毒之一.用提纯的黄瓜绿斑驳花叶病毒免疫新西兰大白兔制备CGMMV的多克隆抗体.该多克隆抗体的间接ELISA效价达1∶512 000,与CGMMV17.5 ku外壳蛋白有特异性反应,而与烟草花叶病毒、齿兰环斑病毒和健康植物没有任何反应.用ACP-ELISA分析多抗灵敏度表明多抗检测1∶40 960倍稀释的CGMMV病叶时仍呈阳性反应.用该多抗建立了检测CGMMV的免疫斑点法(dot-ELISA)和免疫捕获RT-PCR方法(IC-RT-PCR).病叶汁液可被dot-ELISA检出的最大稀释度为1∶10 240.IC-RT-PCR从感染CGMMV的病叶组织中扩增到与预期大小相同的480 bp DNA条带,且当CGMMV病叶稀释1∶163 840倍时检测仍呈阳性.检测CGMMV的dot-ELISA和IC-RT-PCR方法的建立为该病毒病的诊断和控制提供了技术支撑.     

中国番茄黄化曲叶病毒编码的RNA沉默抑制子AC4蛋白的核酸结合特性

农杆菌共浸润试验结果表明:中国番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)Y10分离物编码AC4蛋白是RNA沉默抑制子.为了研究RNA沉默抑制子AC4蛋白的作用机制,将TYLCCNV-Y10的AC4基因插入到原核表达载体pET-32a的多克隆位点上,构建重组原核表达载体pET32a-YIOACA.将重组载体导入BL21(DE3)pLysS进行ACA蛋白表达,并在自然条件下纯化蛋白.利用原核表达的ACA蛋白进行电泳迁移率变动试验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA),分析ACA蛋白分别与单、双链siRNA和单、双链长RNA的结合情况.试验结果表明:TYLCCNV-Y10编码的ACA蛋白具有结合单链siRNA和单链长RNA特性,而不与双链siRNA和双链长RNA结合.     

南方水稻黑条矮缩病毒和水稻黑条矮缩病毒的单抗制备及其检测应用

 用与牛血清白蛋白偶联的南方水稻黑条矮缩病毒（Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV）衣壳蛋白的C端12个氨基酸多肽为抗原免疫BALB/c小鼠,经细胞融合、筛选、克隆,获得2株能稳定传代并分泌抗SRBSDV和水稻黑条矮缩病毒（Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV）单克隆抗体（MAb）的杂交瘤细胞株3F1、5G1。3F1、5G1单克隆抗体腹水间接ELISA效价达10^-6,抗体类型及亚类均为IgG1, kappa链。 Western blot分析表明,2株单克隆抗体均与SRBSDV和RBSDV的外壳蛋白亚基有特异反应。利用单克隆抗体3F1建立的dot-ELISA检测方法能准确、特异、灵敏地检测田间稻飞虱及水稻样品中的SRBSDV和RBSDV。SRBSDV和RBSDV单克隆抗体的制备及检测方法的建立为水稻黑条矮缩病的诊断、预测预报及科学防控提供了技术支撑。     

水稻黑条矮缩病病毒外壳蛋白基因S10的原核表达、多克隆抗体制备及应用

用RT-PCR方法从感染水稻黑条矮缩病毒(rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)水稻中克隆该病毒的外壳蛋白基因S10,然后将此外壳蛋白基因再亚克隆到原核表达载体PET-32a中构建成重组原核表达载体pET32a-CP。将重组表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,Ni+ NTA亲和柱纯化获得分子量约为76kD含硫氧还蛋白的融合蛋白。以纯化的重组蛋白为抗原免疫兔子制备RBSDV外壳蛋白的多克隆抗体,并用制备的多克隆抗体建立了可靠、灵敏、特异的检测RBSDV的免疫捕获RT-PCR及Dot-blot ELISA方法,为该水稻病毒病的诊断提供技术支持。     

与烟草曲茎病毒相伴随的DNAβ的βC1基因原核表达及蛋白的单抗制备

    将PCR扩增的烟草曲茎病毒(Tobacco curly shoot virus,TbCSV)Y35分离物βC1基因克隆到pET-32a原核表达载体,构建原核表达重组载体pET32a-Y35βC1重组载体导入大肠杆菌BL21(DE3),经过IPTG诱导、Ni2+NTA亲和柱纯化获得与硫氧还蛋白融合的重组蛋白Y35βC1以Y35βC1重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤细胞技术制备了9株能够稳定传代并分泌抗Y35βCI蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别制备它们的单抗腹水9株单抗腹水的间接ELISA效价在10-5～10-6之间Y35βC1单克隆抗体的研制为该蛋白的亚细胞定位及功能研究,明确Y35βC1基因在致病过程中的作用机理奠定了基础