从江香猪IFN-β基因的序列分析及原核表达

试验旨在探明从江香猪β-干扰素(interferon-beta,IFN-β)基因编码区分子序列及原核表达产物特征。以从江香猪为研究对象,提取肝脏总RNA并反转录为cDNA,设计特异性引物扩增IFN-β基因编码区,将目的基因片段克隆至原核表达质粒pET-28a上,获得重组质粒pET28a-CJpoIFN-β,并利用生物学软件对江香猪IFN-β基因编码区进行序列分析;将鉴定正确的重组质粒pET28a-CJpoIFN-β转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达、SDS-PAGE与Western blotting分析原核表达蛋白。结果表明,从江香猪IFN-β基因编码区长为561bp,编码186个氨基酸;该蛋白为分泌性蛋白,前21个氨基酸为信号肽序列;二级结构主要以α-螺旋(77.42%)和无规则卷曲(17.74%)为主。从江香猪与其他猪源IFN-β基因核苷酸序列同源性为99.5%～100.0%,与禽的同源性最低(35.2%);从江香猪与巴马猪、梅山猪IFN-β氨基酸同源性均为100.0%,但与贵州白香猪IFN-β同源性为99.5%,存在E43Q、K73R和C161R3处氨基酸的差异。Western blotting结果显示,带His标签的重组表达蛋白能被His单抗识别,条带大小约为24ku。本试验结果为进一步研究IFN-β基因生物学活性及加快从江香猪这一品种资源的有效利用提供参考依据。     

贵州土鸡中ALV-J、REV和MDV的混合感染

<正>禽白血病、网状内皮组织增生症和马立克病是禽类最为常见的3种肿瘤病,可导致家禽出现严重的免疫抑制,继发感染其他疾病,对养禽业危害巨大。出现混合感染时,疾病的致病力和致肿瘤能力都远大于单一感染,导致的免疫抑制也更为严重。禽白血病由禽C型反转录病毒科的禽白血病病毒(ALV)引起,根据病毒囊膜糖蛋白gp85抗原性的差异,ALV可分为A～J 10个亚群,J亚型禽白血病病毒(ALV-J)是最近较为流行的外源性病毒,可引起鸡的骨髓细胞瘤。禽网状内皮组     

鸡胚孵化后期死因诊断

在孵化过程中，常遇到孵化最后几天鸡胚大批死亡，造成很大损失。通过解剖健雏、弱雏和后期死胚蛋，经比较观察和测定分析，探索鸡胚后期死因机理。结果证明，胚胎前期发育正常，而后期死胎率高是由孵化机性能不良和孵化操作技能低造成的。后期的死胎常出现心脏充血和淤血，肝脏呈上黄色，胆囊较大，新陈代谢失常，肺发育不完整，检查认为鸡胚在后期因局部高温和缺氧造成死亡。剖检还发现鸡胚剩余卵黄平均只有３－４克重。死后有的卵囊呈黄绿色属死亡后变腐或代谢失调引起。后期严防孵化机高温和缺氧是提高孵化率至关重要的技术措施。     

MBTH 法测定饲料中木聚糖酶的活性

为建立饲料中木聚糖酶的一整套测定方法,试验先采用透析或超滤的预处理方法对饲料提取液中的木聚糖酶进行分离和富集,再用MBTH法检测其木聚糖酶的活性。结果表明：该方法用于饲料中木聚糖酶活性的测定,具有灵敏度高、准确度高、重复性好且操作便捷的优势,解决了目前饲料中木聚糖酶活性难以检测的难题。     

饲用纤维素酶检测方法的研究

试验研究了现行饲用纤维素酶的两种标准检测方法:羧甲基纤维素钠(CMC)法(NY/T 912—2004)和滤纸法(GB/T 23881—2009),分析了CMC法检测纤维素酶的适应性,并对两种方法的测定结果进行了比较。结果表明:CMC法的适应性较差;纤维素酶的CMC酶活性高于滤纸酶活性。这与纤维素酶本身是多组分的复合物有很大关系。     

山东地区樱桃绿环斑驳病毒(CGRMV)的RT-PCR检测及外壳蛋白基因的克隆

为调查我省甜樱桃感染樱桃绿环斑驳病毒(Cherry Green Ring Mottle Virus,CGRMV)情况,本研究以甜樱桃(Prunus avium L.)品种"红灯"叶片总RNA为模板,根据CGRMV基因组序列设计特异引物,对山东地区37份甜樱桃"红灯"样品进行RT-PCR检测,共检测出19份阳性样品。利用CGRMV外壳蛋白基因序列引物,从阳性植物样本中分离到约800 bp的目的片段,克隆测序,序列分析显示该片段全长807 bp,编码268个氨基酸,与GenBank中已登录的CGRMV分离物的外壳蛋白基因序列一致性为87%～97%,氨基酸序列相似性为95%～99%。该结果表明山东地区甜樱桃生产园中感染CGRMV的病例较为普遍。     

菜豆优良种质综合鉴定评价

对`七五 、`八五 期间入国家种质库菜豆资源性状鉴定中表现优良的3 8份菜豆资源进行了两年3试点田间综合鉴定评价,获得了4份矮生、2份蔓生优异材料可供菜豆生产和科研利用.     

赖氨酸修饰对梯棱羊肚菌黑色素结构和理化特性的影响

为了进一步提高梯棱羊肚菌黑色素的提取率及溶解性,本试验采用单因素、Plackett-Burman试验、响应面试验对纤维素酶-超声波协同提取梯棱羊肚菌黑色素的提取工艺进行优化研究。通过赖氨酸修饰,并对修饰前后的梯棱羊肚菌黑色素进行结构表征、理化性质及稳定性研究。结果表明,在NaOH浓度为1.54 mol/L,纤维素酶添加量为20 mg/g,纤维素酶酶解时间为78.6 min,料液比为1:30,酶解温度为40 ℃,超声时间为80 min条件下提取的梯棱羊肚菌黑色素最优。未修饰的梯棱羊肚菌黑色素不溶于水,色价值为480.24,修饰后的黑色素溶解度为1 016 g/L,色价值为1 771.18,比未修饰的黑色素在溶解性、色价值方面均有所提高。此外,在不同的温度、光照、pH条件下,修饰前后的梯棱羊肚菌黑色素均比较稳定。以上研究结果为梯棱羊肚菌黑色素的高效提取及其产品的开发利用奠定了理论基础。     

佛手的薄层色谱鉴别

为鉴别福建、广东、四川、浙江金华4种不同产地佛手果化学成分的异同，应用薄层色谱分别对其佛手醇的提取物和挥发油进行了定性分析。结果表明，在环己烷－乙酸乙酯（75：25）的展开系统，4种佛手醇的薄层色谱显示斑点不相一致；在苯－乙酸乙酯（9．6：0．4）的展开系统，佛手挥发油的薄层色谱显示4种佛手挥发油的成发也不相一致。     

新济洲国家湿地公园土壤养分特征及其肥力评价

为了解南京市新济洲国家湿地公园的土壤肥力状况,采集了该湿地公园65个土壤样本,分析其pH、电导率、有机质、碱解氮、有效磷、速效钾、全氮、全磷和全钾含量,并利用综合评价方法评价其肥力水平。结果表明,新济洲国家湿地公园土壤pH平均为8.45,为碱性土壤;土壤电导率平均为128.88μS/cm,为非盐化土壤;土壤有机质、碱解氮和全氮平均含量分别为17.05 g/kg、71.00 mg/kg和0.81 g/kg,都为中下水平;速效钾和全钾平均含量分别为107.89 mg/kg和16.51 g/kg,均为中上水平;而有效磷和全磷平均含量分别为27.13 mg/kg和1.60 g/kg,分别为高水平和极高水平。综合评价结果显示,该湿地公园土壤综合肥力水平主要集中于三级和四级,总体上属于中等偏上水平。在此次调查的4个岛屿中,新生洲和子母洲土壤的养分条件较好,土壤综合肥力水平较高,其次是再生洲,新济洲土壤综合肥力最差。综上可知,新济洲国家湿地公园的土壤养分总体处于中等及偏上水平,应根据各岛屿的具体情况,采取一定措施以改善土壤肥力状况。