法国研究添加单价盐对浓缩酪蛋白酸钠悬浮液流变学和酪蛋白酸钙溶解度的影响

法国研究了在蛋白质质量浓度40～235g／L、温度10～60℃范围内添加NaCl或KCl对浓缩酪蛋白酸钠悬浮液流变学特性的影响（拟发表于2014年7月International Dairy Journal）。     

中华绒螯蟹胃、肠及肝、胰脏蛋白酶初探

以酪蛋白为底物,研究了中华绒螯蟹胃、肠及肝、胰脏蛋白酶的最适pH值和最适底物浓度。研究结果表明:河蟹消化道蛋白酶的最适pH值在5.4～5.8和7.2～7.6;蛋白酶的最适底物酪蛋白的浓度为:胃,0.8mg/ml;肠,1.6mg/ml;肝、胰脏,1.2mg/ml。     

钙离子处理对成肌细胞μ-calpain mRNA和蛋白表达的影响

本试验利用实时定量RT—PCR、酪蛋白底物酶原分析和SDS—PAGE等方法研究不同浓度钙离子对分化的大鼠L6成肌细胞中μ-calpain mRNA蛋白水平表达以及对L6细胞内蛋白的降解程度的影响。研究表明：钙离子处理可以诱导L6进一步分化为肌管，高浓度钙离子（〉1000μM）还导致L6死亡率增大；钙离子诱导μ-calpain mRNA和蛋白水平表达增加。钙离子浓度为1000μM时，μ-calpain mRNA的表达量为对照组的3倍多，但是当钙离子浓度升至1500μM时表达量却降低。50-100斗M钙离子可以使μ-calpain酶活增加两倍，而500--1500μM钙离子增加酶活5—7倍；高浓度钙离子由于提高了μ-capaln的活性，细胞内蛋白的降解代谢增强．在SDS--PAGE凝胶电泳中发现细胞上清液中有明显的蛋白条带出现。     

碘化酪蛋白对蛋鸡产蛋性能的影响及作用机理

选取300日龄罗曼蛋鸡768羽，随机分为2组（每组设4个重复，每个重复96羽），在自由采食，饮水和16h光照条件下，分别饲喂添加0，50mg/kg碘化酪蛋白的玉米－豆粕型饲粮13周。结果表明，碘化酪蛋白使日均产蛋率和日采食食量分别提高了8．465（P＜0．01）和7．94％（P＜0．05）；蛋壳相对重和蛋壳厚度分别增加了5．89％（P＜0．05）和8．33％（P＜0．05）；血清超氧化物歧化酶（SOD）、碱性磷酸酶（AKP）活性和尿酸（UA）、钙含量分别提高了27．39％（P＞0．05）；血清三碘甲状腺原氨酸（T3）、甲状腺素（T4）、促卵泡生成素（FSH）、雌二醇（E2）和甲状旁腺素（PTH）水平分别提高了29．37％（P＜0．01），56．25％（P＜0．01），38．59％（P＜0．05），22．32％（P＜0．05）和20．67％（P＜0．05），而促黄体生成素（LH）和孕酮（P）水平均无明显改变；在脑、腺垂体中环腺苷酸（cAMP)含量分别提高了17．59％（P＜0．05）和18．52％（P＜0．05）。上述结果提示：碘化酪蛋白能促进T3，T4和FSH分泌，加强蛋白质和钙的代谢，从而提高了产蛋率，改善蛋壳质量。     

乳源活性肽对早期断奶仔猪胃泌素mRNA表达的影响

为了进一步分析新生动物胃泌素机制,24头仔公猪分对照组(正常吃奶28 d断奶)、实验Ⅰ组(添喂10μmol/Lβ-酪啡肽-7)和实验Ⅱ组(添喂2 g酪蛋白的酶解物).实验组于21 d断奶,连续添喂酪蛋白酶解物和β-酪啡肽-7液(每天2次,共20mL).断奶10d后,3组动物各随机取6头同时剖杀,取胃窦部和十二指肠置液氮.RT-PCR检测分析表明实验组胃窦和十二指肠中gastrinmRNA的表达量均高于对照组,实验Ⅰ组差异极显著(P＜0.01).提示乳源活性肽可通过上调gastrin mRNA的表达,刺激胃泌素的分泌,对仔猪胃内酸性环境的早日成熟和胃肠道发育具有促进作用.     

水牛β-酪蛋白5′启动区的克隆和序列分析

水牛β-酪蛋白是水牛奶中最重要的蛋白质之一。本实验参照奶牛、绵羊、山羊的β-酪蛋白结构基因序列设计了一对引物P1、P2，以本地水牛基因组为模板，采用高保真Ex Taq酶，LA—PCR扩增得到水牛β-酪蛋白基因的5′启动区序列，克隆到pMD18一T上，测序后得到长4．4kb的序列。与牛、山羊和绵羊同区段基因序列进行多重序列比较，并根据多重序列比较结果预测了该区中包含的核心启动子序列TATA盒、5′-LUTR(非翻译区)、乳腺组织特异性转录因子(MGF)等重要元件。以该区序列构建的部分反刍动物的进化树与实际的进化关系保持了很好的一致。     

干扰HSD17B4基因对水牛乳腺上皮细胞乳脂和酪蛋白的影响

通过将小干扰-17β-羟基固醇脱氢酶Ⅳ（si-HSD17B4）基因转染水牛乳腺上皮细胞,检测酪蛋白、甘油三酯含量及脂肪酸相关基因的表达变化,从而揭示干扰HSD17B4基因对水牛乳腺上皮细胞中乳脂和酪蛋白的影响。采用实时荧光定量PCR检测HSD17B4 mRNA在水牛各个组织中的相对表达量。合成3条水牛HSD17B4小干扰RNA （siRNA）和1条对照si-HSD17B4-nc （si-nc）,并筛选干扰效果最佳的片段和时间。si-HSD17B4转染水牛乳腺上皮细胞后,通过酪蛋白试剂盒检测酪蛋白的表达情况,通过甘油三酯测定和油红O染色检测甘油三酯含量,通过实时荧光定量PCR检测干扰HSD17B4基因对甘油三酯、脂肪酸合成以及氧化相关基因表达的影响。结果表明,HSD17B4基因在水牛心脏和卵巢中相对高表达,且显著高于其他组织（P<0.05）。3条HSD17B4 siRNA片段均能有效地抑制HSD17B4基因的表达,其中si-HSD17B4-1干扰效果最佳,HSD17B4 mRNA表达量极显著低于对照组（P<0.01）;最佳干扰时间为24 h。酪蛋白检测结果显示,干扰HSD17B4基因对水牛乳腺上皮细胞中酪蛋白合成无影响。甘油三酯测定结果显示,干扰HSD17B4基因后细胞中甘油三酯含量上升,差异显著（P<0.05）。油红O染色结果显示,干扰HSD17B4基因后细胞中的脂滴明显增多。实时荧光定量PCR检测结果显示,干扰HSD17B4基因会使FABP3、ACSL1、DGAT1、DGAT2、PLIN2、BTN1A1基因表达量上调,分别上调9.28（P<0.01）、1.36（P<0.05）、1.17（P<0.05）、1.83（P<0.01）、1.60（P<0.01）和2.17（P<0.01）倍;同时使PPARA、SREBP1C、SCD、ACSS2、ACACA、AGPAT6、LPIN1、XDH、ABCD1、ACOX2、EHHADH、SCP2基因表达量下降,分别下调至50.55%（P>0.05）、61.15%（P<0.01）、84.91%（P<0.01）、89.34%（P<0.01）、21.88%（P<0.01）、86.48%（P<0.01）、25.35%（P<0.01）、27.24%（P<0.01）、41.74%（P<0.01）、22.17%（P<0.01）、62.70%（P<0.01）和70.33%（P<0.01）。结果表明,HSD17B4基因在水牛组织中广泛表达;si-HSD17B4高效抑制HSD17B4基因在水牛乳腺上皮细胞中的表达,未检测到干扰HSD17B4基因对乳腺上皮细胞酪蛋白的影响,干扰HSD17B4基因上调了FABP3、ACSL1、DGAT1、DGAT2基因的表达,从而促进甘油三酯的合成,同时降低ABCD1、ACOX2、EHHADH、SCP2基因的表达,减少脂肪酸β-氧化。     

新疆双峰驼乳酪蛋白血管紧张素转化酶抑制肽的酶法制备和抑制特性

对新疆双峰驼乳酪蛋白分别进行胃蛋白酶和胰蛋白酶的单酶和双酶联合水解,用反相高效液相色谱外标法,对产生的马尿酸含量进行检测,测定水解产物血管紧张素转化酶（angiotensin converting enzyme,ACE）抑制活性。通过米式方程对比水解产物与卡托普利之间的竞争关系,并用50、10、3 kDa的超滤膜对水解液进行超滤,测定截留液ACE抑制活性。结果表明：驼乳酪蛋白单酶水解12 h过程中,胰蛋白酶水解4 h,水解度达到3.7%,胃蛋白酶水解4 h,水解度达到16.58%,胰蛋白酶水解2 h,水解     

酪蛋白磷酸肽(CPP)的研究进展

酪蛋白磷酸肽是一种含有磷酸丝氨酸簇的生物活性肽,具促进矿物质吸收和利用等多种生物学功能,已经被认为是一种新型的饲料添加剂.本文就酪蛋白磷酸肽的分子结构及生理功能进行综述,并展望其在动物营养与禽畜生产中的应用.     

牦牛乳酪蛋白酶解产物抗氧化活性研究

为了研究藏区牦牛乳源抗氧化肽活性,对复合蛋白酶优化工艺制取的牦牛乳酪蛋白酶解液进行体内、体外抗氧化试验。以1,1-二苯-2-苦肼基自由基(DPPH·)、超氧阴离子自由基(O₂^-·)、羟自由基(·OH)清除率及还原力为体外评价指标,以小鼠体重、脾脏质量、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSG-Px)活力为动物试验评价指标。结果表明:当酶解液蛋白浓度在0~50.0 mg/mL时,对DPPH·、O₂^-·、·OH均具有一定的清除能力,在0~30.0 mg/mL时,DPPH·清除率和·OH清除率均随着蛋白浓度的升高而提高,酶解液蛋白浓度为50.0 mg/mL时对DPPH·、O₂^-·和·OH的清除率分别达到66.45%±1.59%、60.40%±1.96%和46.02%±2.26%,另外还原能力也达到了1.775±0.004,具有较强的抗氧化活性,但都始终低于VC。小鼠试验结果表明,小鼠的体重及脾脏指数与对照组相比,中剂量组和高剂量组均有显著增加,其中脾脏指数最高增加了17.01%。与对照组相比,低、中及高剂量组小鼠血清中SOD活力与GSH-Px活力均有提升,MDA含量有一定程度的下降。因此说明牦牛乳酪蛋白酶解产物具有一定的抗氧化活性。