全文获取类型
收费全文 | 310篇 |
免费 | 8篇 |
国内免费 | 9篇 |
专业分类
林业 | 23篇 |
农学 | 8篇 |
基础科学 | 38篇 |
17篇 | |
综合类 | 126篇 |
农作物 | 17篇 |
水产渔业 | 8篇 |
畜牧兽医 | 84篇 |
园艺 | 4篇 |
植物保护 | 2篇 |
出版年
2024年 | 2篇 |
2023年 | 15篇 |
2022年 | 7篇 |
2021年 | 7篇 |
2020年 | 14篇 |
2019年 | 15篇 |
2018年 | 15篇 |
2017年 | 9篇 |
2016年 | 7篇 |
2015年 | 6篇 |
2014年 | 26篇 |
2013年 | 21篇 |
2012年 | 22篇 |
2011年 | 27篇 |
2010年 | 30篇 |
2009年 | 11篇 |
2008年 | 31篇 |
2007年 | 13篇 |
2006年 | 10篇 |
2005年 | 10篇 |
2004年 | 3篇 |
2003年 | 12篇 |
2002年 | 2篇 |
2001年 | 7篇 |
1995年 | 1篇 |
1990年 | 1篇 |
1987年 | 2篇 |
1986年 | 1篇 |
排序方式: 共有327条查询结果,搜索用时 15 毫秒
41.
42.
为对送检的发病藏香猪病死因进行确诊,本试验采用常规PCR、RT-PCR及荧光定量PCR方法,并结合流行病学调查、临床诊断及病理剖检等实验室检测对送检病料进行诊断,结果显示病死猪心脏、肺脏充血出血,肺脏肉变,气管内充满白色泡沫,全身淋巴结出血;荧光定量PCR方法检测猪圆环病毒呈阳性,PCR方法检出猪伪狂犬病病毒特异性条带,未见猪传染性胸膜肺炎放线杆菌、猪肺炎支原体条带,RT-PCR方法未扩增出猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒特异性条带;血液涂片染色镜检可见猪附红细胞体。结果表明病死猪为猪伪狂犬病、猪圆环病毒病与猪附红细胞体病混合感染,采用经实验室诊断给出的综合防治方案治疗后,疫情得到控制。本次病例的诊治为养猪业可能发生的猪伪狂犬病、猪圆环病毒病、猪附红细胞体病的混合感染提供了有效的防治方法和借鉴经验。 相似文献
43.
44.
45.
云南省作为中国西南边疆重要的生态大省,2014年被列为首批国家主体功能区建设示范区,建立合理完善的区域生态补偿机制对保证区域协调发展具有重要意义。该文利用生态足迹效率指标,结合2007—2015年云南生态足迹账户,对云南禁止开发区生态补偿标准进行了研究,是对西部生态脆弱地区构建生态补偿机制并开展实践的一种创新尝试。 相似文献
46.
根据乙型肝炎S基因序列,设计套式PCR引物,通过优化建立了以PCR为基础,高效快速检测奶牛乙型肝炎的PCR试剂盒。该试剂盒扩增的阳性条带为500bp、250bp的特异性DNA片段,建立的奶牛HBV病毒套式PCR能检测到初始模板69.8个拷贝的病毒,在-20℃至少可保存12个月,重复性良好,快速、准确、特异。应用奶牛乙型肝炎PCR快速诊断试剂盒对100份奶牛血清样本进行了检测,结果显示,其中的9个样本奶牛乙型肝炎病毒DNA阳性。 相似文献
47.
根据GenBank中的猪伪狂犬病病毒(PRV)gE、猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2、猪细小病毒(PPV)VP2基因序列,设计了3对引物,成功建立了检测PRV野毒株、PCV-2和PPV的多重PCR诊断方法,扩增产物分别为288 bp、419 bp、681 bp。敏感性、特异性试验结果显示,该PCR对3种病毒的最低核酸检测量分别为PRV 48.2 pg/L、PCV-2 36.7 pg/L、PPV 0.25 ng/L,而PRV(gE基因缺失株)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、大肠杆菌的扩增结果均为阴性。对87份自然感染病猪样品的检测结果表明,该多重PCR检测结果与单一PCR检测结果完全符合。结果表明,该多重PCR方法具有很好的特异性和敏感性,可用于临床PRV野毒株和gE基因缺失疫苗株、PCV-2和PPV的检测。 相似文献
48.
对鸭瘟病毒(DPV)UL51基因在感染宿主细胞内的定位和转录时相进行分析,为进一步研究该基因的特性和功能提供有用的试验数据和材料。构建pET32a-UL51原核表达载体,将其转化至E.coliBL21(DE3)中进行IPTG诱导表达后,用Ni2+-NTA琼脂糖凝胶柱层析法纯化该表达产物。以纯化的重组蛋白为抗原免疫兔子,制备兔抗UL51多克隆抗血清,通过间接免疫荧光和RT-PCR法检测该基因在DPV感染的鸭胚成纤维细胞(DEF)内的定位和转录情况。间接免疫荧光结果显示,最早可在感染后8h的胞浆中检测到特异性荧光点,24~36h有大量绿色荧光团块聚集于近核区域,之后随着细胞病变的增强,胞浆中的绿色荧光开始减弱,且在感染晚期的胞核中也出现了少量弥散的绿色荧光。RT-PCR结果显示,DPVU L51基因从感染后4h开始转录,其后转录量不断增大,从6~48h一直保持在较高水平,之后又降低。DPVU L51蛋白主要定位于感染的宿主细胞的胞浆中特别是近核区域,与其在α-疱疹病毒中的同源物的定位结果一致;并且与其他几种α-疱疹病毒的转录情况对比后,可认为该基因是一个晚期(γ类)基因。 相似文献
49.
提出了3次收敛的循环约化算法来求解一类来自于过阻尼系统的二次矩阵方程,讨论了算法的收敛性及其在临界状态下以常数1/3线性收敛的性质. 数值试验验证了本文的结果. 相似文献
50.
根据GenBank中致病性嗜水气单胞菌特异性的气溶素基因序列,设计1对引物,利用普通PCR技术扩增获得hlyA基因片段,并克隆到pMD-18T载体上作为阳性标准品。通过对SYBR GreenⅠ荧光定量PCR反应条件的优化,建立了快速检测致病性嗜水气单胞菌的SYBR GreenⅠ荧光定量诊断方法,以此为基础研制出试剂盒。试剂盒扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,对非致病性嗜水气单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌、迟缓爱德华菌、柱状黄杆菌均无阳性信号扩增,重复性好,灵敏度可达1.0x101拷贝/uL。结果表明研制的致病性嗜水气单胞菌SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR试剂盒具有特异、灵敏、快速、重复性好等特点,适合于大鲵临床样品的检测。 相似文献