猪圆环病毒研究进展

猪圆环病毒Ⅱ型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)与猪群中发生的许多新传染病密切相关,主要引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(Porcine multisysten wasting syndrome,PM-WS)等疾病.猪圆环病毒病是继PRRS(蓝耳病)后又一被发现的猪的主要免疫抑制性疾病.     

贵州山羊关节炎脑炎调查研究——山羊关节炎脑炎病理组织学及超微结构的研究

本研究采用光镜和透视电镜研究,关节炎脑炎(CAE)病的病理学特征,其证病性的病理变化特征,主要表现:消瘦拉稀,跛行或瘫痪、精神不振、关节膜增厚质硬、关节囊内有多量混浊或淡色液体。脑膜充血、出血。病理组织学变化,主要表现在,大小脑内血管充血、出血,淋巴细胞浸润呈结节状、脑实质具有筛状软化,胶质细胞、呈弥慢性或灶性分布,可见卫星现象。神经细胞肿胀、变性、坏死、或消灭。关节囊间质及结缔组织增生。超微结构变化:大,小脑:分子层的星形细胞,水平细胞以及多形细胞层的细胞和大、小锥体细胞、哺金野氏细胞浆中,线粒体肿胀变成圆形或不规则形,渐进变性、坏死、溶解,形成空腔。核膜结构消失,核孔扩大,染色质边移,或团块状。电子密度中度或较高。     

贵州省猪繁殖与呼吸综合征的血清学调查

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是猪的主要疫病之一,可引发妊娠母猪晚期流产、早产和产死胎,以及仔猪与育肥猪的呼吸道疾病〔1〕。1987年该病首先发现于美国,随后暴发和流行于北美和欧洲各养猪国家,并相继蔓延到亚洲及其他地区,给养     

检测PRV野毒株、PCV-2及PPV多重PCR方法的建立及初步应用

根据GenBank中的猪伪狂犬病病毒(PRV)gE、猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2、猪细小病毒(PPV)VP2基因序列,设计了3对引物,成功建立了检测PRV野毒株、PCV-2和PPV的多重PCR诊断方法,扩增产物分别为288 bp、419 bp、681 bp。敏感性、特异性试验结果显示,该PCR对3种病毒的最低核酸检测量分别为PRV 48.2 pg/L、PCV-2 36.7 pg/L、PPV 0.25 ng/L,而PRV(gE基因缺失株)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、大肠杆菌的扩增结果均为阴性。对87份自然感染病猪样品的检测结果表明,该多重PCR检测结果与单一PCR检测结果完全符合。结果表明,该多重PCR方法具有很好的特异性和敏感性,可用于临床PRV野毒株和gE基因缺失疫苗株、PCV-2和PPV的检测。     

奶牛乙型肝炎PCR快速诊断试剂盒的研发及应用

根据乙型肝炎S基因序列,设计套式PCR引物,通过优化建立了以PCR为基础,高效快速检测奶牛乙型肝炎的PCR试剂盒。该试剂盒扩增的阳性条带为500bp、250bp的特异性DNA片段,建立的奶牛HBV病毒套式PCR能检测到初始模板69.8个拷贝的病毒,在-20℃至少可保存12个月,重复性良好,快速、准确、特异。应用奶牛乙型肝炎PCR快速诊断试剂盒对100份奶牛血清样本进行了检测,结果显示,其中的9个样本奶牛乙型肝炎病毒DNA阳性。     

贵州奶牛传染病检测和预防的研究

2006—2008年对贵州省内610份奶牛血清进行检测,其中有116份血清为乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性,平均阳性率19%;534份牛血清样品中,检出奶牛传染性鼻气管炎阳性血清29份,阳性率为5.4%,而运用血清补体结合反应(CFT)检测奶牛传染性胸膜肺炎,均为阴性。将HBsAg、HBeAg双阳性奶牛肝组织做电镜观察,发现肝组织中有密集的HBV颗粒。结果表明,贵州省奶牛可能存在乙型肝炎、传染性鼻气管炎的感染,应当引起奶牛养殖者的高度重视。     

贵州规模化猪场主要传染病免疫程序的设计

规模化养猪场的主要传染病传播迅速,发病率高,使规模化猪场疾病控制和净化越来越困难。由于猪的疫病种类不断增加,导致大小猪的死亡,更重要的是使生产性能下降。做好猪群免疫接种工作,是预防猪场疫病流行的重要措施,建立一套科学合理的免疫程序是防止疫病流行的最重要的一个环节。对养猪场猪群进行疫苗接种,在免疫预防中,疫苗质量和相应的免疫程序是最重要的两个方面。     

羊传染性脓疱病毒PCR检测方法的建立及CBP基因的序列分析

根据GenBank中的羊传染性脓疱病毒(ORFV)B2L基因序列,设计合成1对引物,通过对PCR条件的优化,敏感性、特异性试验,成功建立了ORFV的PCR检测方法。敏感性与特异性结果显示,最低核酸检测量为1.2 fg/μL,对口蹄疫病毒、山羊痘病毒、丝状支原体山羊亚种的扩增结果均为阴性。同时根据GenBank中的ORFV的CBP基因的序列,设计合成1对特异性引物,以ORFV贵州分离株作为模板,成功克隆出ORFV的CBP基因。同源性分析表明,核苷酸与GenBank中ORFV的CBP基因的核苷酸序列相似性99.4%～88.8%。本研究为ORFV感染的流行病学调查和CBP基因功能研究奠定基础。     

猪繁殖与呼吸综合征和猪乙型脑炎双重一步法RT-PCR诊断试剂盒的研制

根据GenBank中的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）ORF7N基因、猪乙型脑炎病毒（JEV）NS1基因序列,设计了2对引物,通过反应条件的优化,成功研制了检测PRRSV和JEV的双重一步法RT-PCR诊断试剂盒,扩增产物分别为245、504 bp。敏感性、 特异性结果显示,该RT-PCR诊断试剂盒对2种病毒的最低核酸检测量分别为PRRSV0.2ng/L、JEV 0.4ng/L,而对猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒的扩增结果均为阴性。对52份疑似病猪样品的检测结果表明,该双重一步法RT-PCR诊断试剂盒检测结果与单一PCR检测结果完全符合。结果表明该双重一步法RT-PCR诊断试剂盒具有很好的特异性和敏感性,可用于临床猪繁殖与呼吸综合征和猪乙型脑炎的检测。     

贵州羔羊致病性大肠埃希氏菌血清型和致病因子的研究--大肠埃希氏菌的分离、血清型、致病因子和致病性试验

１９９７￣１９９９年,对贵州册亨,水城,龙里,关岭４个县的３３００头份羔羊进行调查,收集羔羊腹泻病例１１５例,初分离出肠杆菌８０株,经生化试验和致病试验初步鉴定出大肠杆菌５５株菌株,分离率为４８％。经小白鼠致病性试验,５５株菌株都能引起发病死亡;并用其中的ＣＨ９８１２、ＣＨ９８１７、ＬＬ９９３４、ＧＬ９８６ ６株菌株做家兔致病性试验,结果,６株菌株都能使羔羊、家兔发病死亡。对初分离５５株菌株做知清