中草药复方对畜禽肠道病原菌的体外抑菌试验

[目的]为应用中草药复方治疗畜禽肠道病提供参考数据。[方法]用改良试管二倍稀释法测定15组中草药复方对8种畜禽肠道病原菌的最小抑菌浓度（MIC）。[结果]乌梅和五倍子、诃子分别配伍对大肠杆菌Q8的MIC高迭15．6mg／ml,五倍子和大黄、诃子和黄连、黄苓和大黄配伍的MIC为31．25mg／ml。五倍子和大黄、诃子和乌梅配伍对大肠杆菌0m的MIC为31．25mg／ml。五倍子和黄连、黄芩和大黄配伍对鸡白痢沙门氏菌的MIC高达3．9mg／ml,诃子和大黄配伍的MIC达7．8mg／ml,诃子和艾叶配伍的MIC达15．6mg／ml．五倍子和乌梅、五倍子和黄柏、诃子和乌梅、黄芩和乌梅、黄芩和艾叶配伍的MIC为31．25mg／ml。乌梅和五倍子、诃子分别配伍对鼠伤寒沙门氏菌的MIC为31．25mg／ml。五倍子和乌梅、艾叶分别配伍对猪伤寒沙门氏茵的MIC达31．25mg／ml。黄芩和大黄、艾叶分剐配伍对猪霍乱沙门氏菌的MIC高达15．6mg／ml,五倍子和乌梅、诃子和大黄配伍的MIC为31．25mg／ml。[结论]本试验所选15组中草药复方,大部分表现出协同作用。     

O型口蹄疫病毒OA58株3C基因的克隆与真核表达

利用RT-PCR技术扩增获得了长度约640bp的口蹄疫缡毒目的基因，回收片段后与pMD18-T载体进行连接，测序结果表明获得了口蹄疫病毒3C基因。将重组质粒pMD18-3C与表达载体pEGFP-N1分别用BarnH I＋XhoI双酶切后，进行定向亚克隆，对重组表达质粒pEGFP-3C进行PCR、酶切鉴定及DNA测序，结果表明重组表达质粒所含的3C基时读码框正确。用pEGFP-3C转染BHK-21细胞，荧光显示目的基因EGFP发出绿色荧光；对3C转录的mRNA进行RT-PCR鉴定，证实3C基因在BHK-21细胞中得到了表达。     

口蹄疫病毒非结构蛋白3C真核表达载体的构建及表达

口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起,属于小RNA病毒科口蹄疫病毒属[1 2],为单链正股RNA[3]。T racey认为3C蛋白酶具有病毒加工、宿主蛋白裂解的作用[4]。H ata认为在感染FMDV的宿主细胞内翻译的一条多肽链,11个蛋白酶裂解位点中,9个位点由3C蛋白酶完成裂解过程[5]。目前,对同     

基于网络药理学方法研究阿司匹林丁香酚酯防治犬心血管疾病的作用机制

试验旨在采用网络药理学方法探讨阿司匹林和丁香酚的靶点、基因富集和通路来推测阿司匹林丁香酚酯(AEE)防治犬心血管疾病的作用机制。首先从DrugBank数据库检索阿司匹林、丁香酚获得其作用靶点,进而构建化合物-靶点网络,再将其靶点上传至STRING数据库,物种选择犬,得到作用于犬蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络图,最后将作用于犬的靶点上传至DAVID数据库,物种选择犬,筛选出错误率<0.01的基因富集和KEGG通路,从而构建靶点-通路网络图,用以推测AEE防治犬心血管疾病的作用机制。通过检索分析可知,阿司匹林和丁香酚已知的相应靶点有15个,其中8个靶点可作用于犬,关键靶点涉及TP53基因、NF-κB、雄激素受体、前列腺素G/H合成酶1;基因功能富集(GO)条目4个,其中分子功能2个,涉及甾体结合和转录因子活性、序列特异性DNA结合,生物过程2个,涉及到DNA转录模板和DNA模板转录的正向调节;KEGG通路2条,涉及前列腺癌和癌症信号通路。综上所述,推测AEE可能通过调控TP53基因、NF-κB、雄激素受体、前列腺素G/H合成酶1等靶点,基因功能富集于DNA转录模板、甾体结合、转录因子活性、序列特异性DNA结合、DNA模板转录的正向调控,通过前列腺癌及其他癌症信号通路来治疗犬心血管疾病。     

DAPI染色法在流式细胞术中检测BHK-21细胞周期的探讨

[目的]为规模化细胞培养的检测奠定基础。[方法]采用DAPI标记BHK-21细胞,探索简便易行的DNA检测技术,检测细胞周期中各期的DNA含量。[结果]DAPI标记法是一种可靠的DNA检测方法,且简单易行。[结论]利用DAPI标记法能够准确进行细胞周期检测。     

家畜Toll样受体的表达及在相关疾病发生中的作用

家畜的Toll样受体(TLRs)是家畜天然免疫相关分子家族中的重要组成部分。不同家畜表达的TLRs分子也各不相同,而同一种家畜的不同组织中表达的TLRs分子也不一定相同。这些TLRs分子在家畜疫病的发生、发展及治疗中也具有重要作用。目前虽然对于人和小鼠TLRs分子的研究已经较为全面,但是对于家畜TLRs的研究并不十分深入。论文主要就不同家畜TLRs分子研究的概况、不同家畜的TLRs在组织中的分布,以及TLRs在相关家畜疫病中的重要作用进行简要概述,以期对家畜TLRs分子信号转导通路的研究及家畜疫病的防控、新型疫苗和佐剂的开发提供参考。     

微小牛蜱Bm86基因的克隆与原核表达

根据已发表的Bm86基因序列,设计表达型引物,利用RT-PCR技术,从微小牛蜱饥饿幼蜱的研磨物中扩增Bm86基因,将PCR产物连入pGEM-T Easy载体,构建重组克隆载体pGEM-T easy-Bm86.测序分析表明:克隆的微小牛蜱Bm86基因序列与GenBank上登录的Bm86基因的核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为97%和95.6%.然后对重组克隆载体pGEM-T easy-Bm86进行双酶切,获得带有粘性末端的Bm86基因片段,并将此片段定向亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,构建重组原核表达载体pGEX-4T-1-Bm86,将其转化到BL21宿主菌中,用IPTG进行诱导表达.SDS-PAGE检测表明表达产物为分子量为88 Ku的融合蛋白,目的蛋白约占蛋白总量的39%,表达量约为1.08 mg/mL.Western blot分析表明此表达产物能被兔抗微小牛蜱阳性血清所识别.     

河西地区草木樨饲喂家畜最佳利用期的初探

本文以研究草木樨的饲用价值为目的,测定了河西地区不同生长期草木樨中粗蛋白和粗脂肪的含量,结果分别为:营养期20.59%,3.54%;开花期17.24%,2.14%;结实期、15.32%,2.09%.并通过与同期草木樨中香豆素,双香豆素含量的比较,建议草木樨作为饲草应在开花期之前利用较适宜。     

甘肃武威西门塔尔牛MSTN基因外显子遗传变异的研究

为分析肉牛MSTN基因的遗传多态性及变异特征,采用PCR-SSCP方法检测了60头甘肃武威西门塔尔牛MSTN基因的多态性,对群体内各等位基因进行了克隆测序。结果显示：武威西门塔尔牛MSTN基因第1外显子存在A、B两个等位基因以及AA、AB两种基因型,基因型频率分别为0.9167、0.0833;第2外显子存在A、B两个等位基因以及AA、BB、AB三种基因型,基因型频率分别为0.5、0.25、0.25。序列分析表明,武威西门塔尔牛MSTN第1外显子在269 bp发生了A→G的突变,第2外显子在41 bp发生了C→T的突变,二者均属于同义突变。统计结果表明,武威西门塔尔牛MSTN基因第1外显子呈低度多态,第2外显子呈中度多态,外显子3没有发生突变。     

猫ω干扰素和γ干扰素的可溶性原核表达及纯化

旨在克隆到猫ω干扰素和γ干扰素(FeIFN-ω和FeIFN-γ)基因的基础上,分析它们的一些生物学特性,并进行可溶性原核表达和简化纯化工艺,为后期作为抗病毒药物的开发奠定基础.根据GenBank登录的FeIFN-ω和FeIFN-γ基因序列,对其编码氨基酸的信号肽序列进行分析,设计引物用于克隆不包含信号肽的成熟蛋白基因序...