HPLC法测定玉郎伞中水黄皮素的含量

目的 建立高效液相色谱法(HPLC)测定玉郎伞中水黄皮素含量的方法.方法 以CLC-ODS(6.0mm×150mm,5μm)为色谱柱,[0.05mol/L庚烷磺酸钠-0.05mol/L磷酸二氢钾(3∶5)]-乙腈(1∶1)用磷酸调pH至3.0为流动相,流速1.0ml/min,检测波长261nm,柱温30℃.结果 水黄皮素的线性范围为0.099～0.998μg,平均回收率为100.3％(RSD=1.2％).结论 所建立的HPLC法可用于玉郎伞中水黄皮素含量测定及其质量控制.     

携带Apoptin及hTERT启动子的双重特异性重组腺病毒的构建及鉴定

从质粒pMT-E1a和pIRES-neo中获得目的基因E1a和PolyA并连接入质粒pKS-hTERTp,用XhoⅠ和SpeⅠ双酶切后连接入线性化的pAd-Apoptin,获得穿梭载体pAd-apoptin-PolyA-hTERTp-E1a。穿梭载体pAd-ApoptinPolyA-hTERTp-E1a和腺病毒骨架质粒(pAd5)共转染HEK293细胞,获得重组腺病毒Ad-Apoptin-hTERTp-E1a,采用RT-PCR和Western blot对重组腺病毒进行鉴定,MTS法检测病毒对A549细胞的抑制作用;绘制重组腺病毒生长曲线,监测重组腺病毒在细胞内的复制能力。结果显示:构建出的重组腺病毒中包含有了目的基因Apoptin和E1a,并且目的基因在细胞中正确的表达;MTS结果显示重组腺病毒对A549具有抑制作用,且抑制作用具有一定的时效及剂效关系;重组腺病毒具有在A549细胞中正常复制的能力。结果表明:成功的构建出了具有特异性杀伤和特异性复制能力的双重特异性重组腺病毒Ad-Apoptin-hTERTp-E1a。     

NaCl胁迫对高粱幼苗生理生化特性的影响

以河农16高粱的3叶期幼苗为材料,在不同浓度的NaC l溶液中胁迫处理,分别在处理1h、2h、3h和4h后取幼苗,研究不同NaC l浓度和不同胁迫时间对高粱幼苗渗透调节物质(可溶性蛋白、脯氨酸含量、可溶性糖含量)和抗氧化保护酶系统活性(POD、SOD、CAT)的影响。结果表明,在一定范围内,随NaC l浓度的升高和胁迫时间的延长,河农16幼苗的渗透调节物质含量增加,超过最大耐受范围后含量下降。抗氧化保护酶系活性变化与渗透调节物质变化相似,呈现先升后降的趋势。河农16幼苗在NaC l胁迫下,渗透调节物质和抗氧化酶系统对NaC l溶液的有效调节浓度为0.9%。     

浑河冲洪积扇浅层地下水资源评价与可开采潜力分析

浑河冲洪积扇是沈阳城市供水的主要赋水水文地质单元,而浅层地下水在沈阳市地下水资源开采中的利用程度最高。因此,为了对目前赖以生存的浑河扇地浅层地下水资源量有清醒的认识,明确水资源目前所面临的形势,督促社会及民众珍惜水资源,充分运用地下水资源评价方法中的水均衡法和解析法,建立浑河冲洪积扇地浅层地下水水均衡方程,利用解析法求各类水文地质参数,通过水均衡方程计算出区域地下水资源量;同时利用开采系数法,计算区域的可开采资源量,与实际开采量对比分析目前的可开采潜力。分析结果是:扇地浅层地下水动态类型属于复合型;计算区地下水总补给量为60 338.20万m3,总排泄量为66 286.95万m3,扇地目前的水均衡形式属于负均衡,潜水水位年变幅为-0.27m,承压水水位年变幅为-0.33m;利用开采系数法计算各条件下浅层地下水的可开采量情况,多年平均降水条件下的可开采量为57 321.29万m3,2010年扇地地下水实际开采量为59 049万m3,两者进行对比,实际开采系数为1.030,略大于1,故计算区目前处于轻微超采状态。     

重组腺病毒Ad－HP对肝癌细胞及肝癌肺转移模型的抑制效应

为探讨重组腺病毒Ad－HP对人肝癌细胞BEL－7402的影响及其对鼠肝癌肺转移模型的抑制作用,本研究利用MTT染色法进行了Ad－HP的体外抑瘤研究,并应用AnnexinV检测、Caspase活性检测、AO／EB染色和DAPI染色等方法分析了Ad－HP的抑瘤方式。另外,本研究利用鼠肝癌细胞H22,建立了肝癌肺转移动物模型,并检测了Ad－HP对肝癌肺转移的抑制作用及其对模型动物免疫的影响。结果表明,Ad－HP能够有效抑制BEL－7402细胞的生长,且其作用具有一定时效和剂效关系趋势;Ad－HP感染导致BEL7402细胞呈现磷脂膜外翻、细胞核皱缩、细胞膜通透性增加和Caspase酶活性增强等典型凋亡特征;应用Ad－HP治疗肿瘤模型能够有效延长模型动物平均生存期,控制转移灶形成,增强NK和CTL活性,上调Thl类细胞因子水平。总之,Ad－HT能够通过诱导细胞凋亡抑制BEL－7402肿瘤细胞增殖,并且能够有效控制肝癌肺转移灶形成,延长模型动物平均生存期。     

蒙药漏芦花总黄酮提取和纯化工艺研究

[目的]优化漏芦花总黄酮提取工艺和纯化工艺,为漏芦花抗炎药效部位的开发奠定基础。[方法]以总黄酮为指标,采用UV测定方法,在检测波长413 nm下,测定总黄酮含量,确定纯化漏芦花总黄酮纯化大孔树脂型号;并采用正交试验分别考察乙醇浓度、回流次数、回流时间和乙醇用量对漏芦花总黄酮提取工艺的影响及乙醇体积分数、上样液质量浓度、p H和上样液流速对总黄酮纯化工艺的影响。[结果]确定漏芦花总黄酮提取工艺的最优方案为采用75%乙醇溶液,回流2次,每次回流时间45 min,乙醇用量12倍,影响因素的顺序从大到小依次为乙醇浓度、回流时间、乙醇用量、回流次数。纯化工艺试验中,最优纯化工艺条件为上样液浓度0.05 g/m L,上样液p H为5,上样液流速为3 m L/min,径高比为1∶9,最佳上样量为药材量与树脂用量比2∶1,乙醇体积分数50%,洗脱液用量5 BV;纯化后干膏里漏芦花抗炎有效部位总黄酮含量为42.3%。[结论]AB-8型大孔树脂可有效富集、纯化漏芦花总黄酮,优选的提取和纯化工艺稳定可行。     

玉泰苦瓜及其周年栽培

山东省苍山县常年种植苦瓜3 000 hm2,2003年苍山县农业技术推广中心从汕头市金韩种业有限公司引进玉泰苦瓜新品种,试种后发现其具有丰产、优质、抗病抗逆性强的特点,非常适合我地种植.2004年开始示范并进行良种良法配套技术研究,2005年种植800 hm2,每667 m2产量达4 500～5 500 kg,深受菜农和销售商的欢迎.     

夏玉米超高产（900kg／亩）耦合技术规程

近年来,从中央到地方非常重视粮食生产,各级政府纷纷下达粮食高产创建任务。针对当前玉米生产中存在的产量低、效益低和品质差的问题,苍山县农业技术推广中心积极响应玉米高产创建号召,2008年圆满完成了夏玉米超900kg高产创建任务,并总结出一套夏玉米900kg超高产耦合技术规程。     

气候变暖及土地利用变化下浙江水安全适应研究

指出了气候变暖对经济增长、人类的健康等存在重要影响,除减少废气排放、改善环境以外,对土地及水资源等自然资源影响也日益显著。且气候、水资源、土地3种自然资源相互影响与制约。在结合气候变暖与土地利用改变所带来的因素基础上,集成了内外部多方面的信息,提出了适应不断变化的平衡策略,以实现水资源管理系统反应灵活性和可持续性的提升。