水貂阿留申病病毒猫肾传代细胞对流免疫电泳诊断抗原现场检疫结果初报

阿留申病是水貂的一种慢性病毒性传染病,每年给养貂业造成重大经济损失,是水貂的三大传染病之一,本病至今缺乏特异性防治方法。自1972年以来,国际上已普遍推广使用对流免疫电泳试验(CIEP)逐年检测貂群,早期检出病貂,严格淘汰,保留阴性健康貂,用作繁殖。这是目前世界上控制和净化阿留申病的唯一有效手段。我国是世界上中低档貂皮的主要生产国之一。全国现养有水貂约300—400万只左右。每年要花费大量外汇从国外引进5000—8000头种貂。但是,我国对于水貂阿留申病的检疫手段十分落后。在口岸检疫上,至今仍沿袭非特异性的碘凝集反应,使许多阳性病貂漏检,不断流入国内,以至国内各貂场阿留申病流行情况十分严重,这是我同貂业生产水平低下的主要原因之一。     

用异源抗体免疫荧光技术检测禽脑脊髓炎病毒和抗体

用禽脑脊髓炎病毒免疫的鼠阳性血清作为诊断抗体,对21份待检禽血清和10份病料进行检测,其结果如下:抗体阻断荧光试验(ABET)检测21份血清中,阳性血清11份,阴性血清10份,中和试验测得,阳性血清11份(NI＞1.17),阴性血清10份;琼扩试验测得阳性血清5份。间接免疫荧光试验测得10份病料中有7份阳性,2份可疑,1份阴性,用这些可疑病料脑内接种1日龄雏鸡,成功     

非洲猪瘟间接ELISA诊断试剂盒的研究

用带有编码非洲猪瘟病毒衣壳蛋白Ｐ７２ 基因的重组杆状病毒（Ｂａｃｐ７２）作载体,在ｓｆ９细胞中表达并得到重组Ｐ７２蛋白,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ可得到分子量在 ７２ｋＤａ左右的电泳带。用标准阳性非洲猪瘟血清对 Ｐ７２蛋白进行 ＥＬＩＳＡ检测,证明该蛋白具有生物学活性。用Ｐ７２作为间接法的包被抗原,对ＥＬＩＳＡ反应条件进行了优化。确定最佳包被液为ＰＢＳ（ｐＨ７．２）、最佳封闭液为１％ＰＣＴ、最佳血清稀释液为４％ＰＥＧ６０００／ＰＢＳ、最佳冲洗液为０．５Ｍ ＮａＣｌ／０．５％Ｔｗｅｅｎ－２０／ＰＢＳ（ｐＨ７．２）。本实验反应体系采用５０μｌ的微量法,可节约试剂及抗原。反应在２小时内即可完成,达到了快速诊断的目的。包被了抗原并用封闭液封闭后的酶标板密封后保存于－２０℃的冰箱中,至少可以保存５个月。阻断试验和交叉试验表明ＥＬＩＳＡ法有良好的特异性。间接ＥＬＩＳＡ比Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法具有更高的灵敏性。血清学调查没有得到阳性结果,与我国实际情况相符。用Ｂａｃｐ７２表达的非洲猪瘟病毒Ｐ７２蛋白抗原作为间接ＥＬＩＳＡ的检测抗原来检测非洲猪瘟血清具有快速、简单、无感染的特点。本实验为非洲猪瘟ＥＬＩＳＡ检测试剂盒的最终组装提供了实验依据。     

矮杆和半矮杆大豆突变体植株生长对外源GA3的响应

矮杆和半矮杆突变体是研究植物基因功能和培育高产作物新品种的重要材料。本研究以矮杆和半矮杆大豆突变体与各自野生型品种为材料, 利用外源赤霉素(GA₃)处理不同发育时期植株, 研究植株生长速率和成熟期株高性状发育对外源GA₃的响应及主茎纵向细胞的形态学变化, 分析两类突变体与各自野生型之间的内源赤霉素含量差异。结果表明, 外源GA₃(40 mg L^-1)对半矮杆和矮杆突变体的作用效果明显不同, GA₃处理后半矮杆突变体植株在不同测定时段的平均生长速率达到2.76 cm d^-1, 而矮杆突变体的平均生长速率仅为0.92 cm d^-1, 而且成熟期半矮杆突变体植株的平均高度、主茎平均节间长度与节间纵向细胞长度均显著超过对照, 外源GA₃能够恢复其正常的野生型株高表型; 而矮杆突变体较对照的上述3项增幅均明显小于半矮杆型, 外源GA₃不能恢复其正常的野生型株高表型。说明半矮杆突变体的植株生长对外源GA₃有明显响应, 为GA₃敏感型突变体; 而矮杆突变体仅在生育前期对外源GA₃有一定程度响应, 为GA₃钝感型突变体。半矮杆和矮杆突变体成熟期植株的内源GA₃₊₁含量均显著低于各自野生型品种, 这可能是二者表型矮化的生理原因。     

非洲猪瘟病毒K205R蛋白基因原核表达的研究

本研究合成非洲猪瘟的K205R基因,将K205R基因克隆至pET-30c(+)质粒,构建重组原核表达质粒pET30C-K205R。该重组质粒的阅读框架正确,表达的融合蛋白的N端和C端均带6×组氨酸。pET30C-K205R-BL21菌株经培养和诱导表达后,可生产K205R可溶性蛋白,K205R可溶性蛋白可用Ni柱纯化。纯化表达K205R蛋白的ELISA试验证明,表达的K205R蛋白与猪阳性非洲猪瘟血清具有较好的特异性反应。     

用ELISA检测猪细小病毒(PPV)血清抗体

采用差速离心、透析、聚乙二醇(PEG)浓缩方法纯化猪细小病毒(PPVDK7113)制备抗原。用纯化的PPV抗原包被聚苯乙烯微量反应板，建立了检测PPV血清抗体的间接ELISA。抗原最佳包被浓度为6．3μg/ml，被检血清最佳稀释度为1：200。用建立的ELISA检测山东、东北、广东等地的426份血清，结果阳性率为36．2％。与华中农大病毒室提供的猪细小病毒乳胶凝集试验试剂盒相比，其结果符合率为98．6％。通过阻断试验、交叉试验，说明本方法在特异性上达到了较为满意的结果，且易于操作，适用于血清学定性诊断、检疫和大规模的血清流行病学调查。     

对我市医疗急救中心建设的思考

医疗急救中心的运行模式应以院前急救型为主,各级政府要加大财政支持力度,加强急救网络指挥调度系统的建设,实施与110、122、119社会联动,充分发挥120的现场救治和转运救治功能。     

绿脓杆菌引起狐狸流产的临床病原学和病理学诊断

绿脓杆菌引起狐狸流产的临床病原学和病理学诊断尹燕博徐瑞李葳孙淑芳蔡丽娟（农业部动物检疫所青岛２６６０３２近两年来,山东半岛地区某乡镇狐狸养殖场每逢春季约有一半以上的母狐狸发生空怀、死胎和流产。一般在配种后２０天左右表现精神沉郁、食欲减少、尿白（个别有...     

运用RT-PCR一步法和Nested-CR法快速检测FMDV的研究

将Ｏ、Ａ型ＦＭＤＶ ＲＮＡ分离纯化，用ＲＴ－ＰＣＲ法扩增其聚合酶编码基因。可检测到Ａ型１０＾－６倍稀释、Ｏ型１０＾－４倍稀释乳鼠肌肉毒。Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ扩增该基因内部片段，进一步说明该方法准确可靠。ＲＴ－ＰＣＲ一步完成使整个检测时间不超过１２小时，可在本病的诊断和检疫中推广此法。     

关于青岛市崂山县某种貂场暴发病毒性肠炎的实验诊断报告

水貂病毒性肠炎(Viral enteritis of mink)又称泛白细胞减少症(Panleukopenia)或传染性貂肠炎(infectious enteritis of mink),是世界公认的危害水貂养殖业的主要传染病之一。其主要特征为消化道粘膜炎症和坏死,具有较高的发病率和死亡率,可引起貂场的重大经济损失。近年来,由于从国外大量引进种貂而未作严格检疫,造成国内种貂场暴发本病的事例已不属罕见,应当引起我们的高度重视。本文报道了1985年元月青岛市崂山县某种貂场由于引进美国种貂,未经隔离观察,直接进入原繁殪群混合饲养,造成病毒性肠炎流行及确定诊断的经过情况。