产单核细胞李斯特菌溶血素O单克隆抗体的制备与鉴定

【目的】制备抗产单核细胞李斯特菌溶血素O(LLO)的特异性单克隆抗体。【方法】用LLO重折叠的原核表达产物LLO-his免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞,与骨髓瘤细胞在PEG4000作用下融合,经间接ELISA法筛选、多克隆及单克隆分离出阳性细胞株后,再用体内诱生腹水法大量制备单克隆抗体。用辛酸-硫酸铵沉淀法纯化单克隆抗体,间接ELISA法测定其效价及相对亲和常数;用HBT单克隆抗体亚类鉴定试剂盒鉴定抗体亚型;常规方法制备染色体,观察细胞株染色体数目及标志染色体;Western blot检测抗体的特异性。【结果】获得了2株稳定分泌抗LLO单克隆抗体的杂交瘤细胞系,分别命名为3F5-G3和2B4-C8,其腹水效价分别为1∶(1×105)和1∶(1×107);染色体分别为97±5和93±8条,且观察到标志染色体;相对亲和常数分别为0.49和0.26μg/mL;抗体亚类均为IgG1,轻链均为κ链。特异性鉴定结果表明,2种单克隆抗体均可与LLO蛋白发生特异性反应,而与载体蛋白不发生反应。【结论】获得了抗LLO的特异性单克隆抗体。     

市售禽肉产品中沙门氏菌污染状况调查

<正>沙门氏菌是引起人类食物中毒的主要致病菌,该病菌可通过食物传播,禽肉等动物产品是引起人类感染该病菌的主要来源之一。据资料统计,在我国细菌性食物中毒中,有     

24种药物的抑菌效果和临床实验总结报告

从１９９９年１１月至２００２年９月农业部动物检疫所质检中心共进行鸡、猪、鸽、鸵鸟、鹅、牛、鹿、水貂、兔等细菌样品检测１２３例，其中大肠杆菌１１１例，猪链球菌４例，猪副伤寒沙门氏菌１例，鸡沙门氏菌２例，鸡葡萄球菌１例，牛乳酸杆菌１例、猪魏氏梭菌１例、羊魏氏梭菌１例、兔巴氏杆菌１例。在大肠杆菌病例中，鸡占８７例，猪占１３例，鸵鸟４例，鹿２例，兔、鸽、鹅、羊各１例、水貂２例、。根据药敏试验可知，当前对鸡大肠杆菌比较敏感的药物有头孢类抗菌素如先锋Ⅴ号、先锋Ⅵ号、菌必治（头孢三嗪、头孢曲松钠）、先锋必（头…     

汛区家畜传染性疾病与防治

1家畜传染性疾病传播途径1．1经空气传播是经飞沫传播的呼吸道疾病以及一些由吸附于空气尘埃表面的病原微生物引起的疾病．1．2经污染饲料和饮水传播主要是一些以消化道为主要侵入门户的疾病1．3经污染的土还传播是由一些能形成芽胞或对外界不良环境抵抗性较强的病原菌引起的疾病．1．4经活媒介物传播是一些由昆虫、野生动物和人类传播的疾病．在一个较大的自然区域里．由于卫生管理、医疗、流通、意识形成、自然环境、历史等诸多方面的原因．在这一地区总会存在着一定的病原，可以说这一地区就是一个广义的经源地．当疫源地的病原微生物通…     

基层兽医机构防控非洲猪瘟效能评估与分析

为加强基层动物防疫体系建设,客观评估基层兽医机构防控非洲猪瘟能力和非洲猪瘟防控政策执行情况,组织开展了10个养猪大省的20个县基层兽医机构防控非洲猪瘟效能评估。结果显示：当前基层兽医机构具备防控非洲猪瘟的基本能力,但已不适应新时期动物疫病防控需要,部分关键能力存在不足;发生疫情县的防控能力普遍低于未发生疫情县,说明“人财物”资源配置好的地区防控非洲猪瘟等重大动物疫病的能力较强;政策落实情况与兽医机构效能总体上呈正相关性,技术性政策落实情况明显优于资源性政策落实情况。此次效能评估工作引起了地方政府重视,切实发挥了评估“指挥棒”作用,为各地加强基层动物防疫体系建设发挥了示范带动作用。     

浅议吸收国际标准应重视标准的经济和贸易属性

我国是畜牧业生产大国,畜禽饲养总量已连续多年稳居世界前列,如何将这种生产优势尽快转化为贸易优势和经济优势是我国加入WTO之后畜牧业发展面临的重要问题。我国近年来参与国际贸易竞争的情况表明,以卫生质量标准为表现形式的技术性贸易壁垒是制约畜产品出口的主要障碍。根据WTO相关规则,采用国际标准是突破这种障碍的基本途径之一。本文通过介绍畜产品贸易中的国际标准及我国的采标情况,从标准的经济和贸易属性出发,对采用国际标准的问题进行探讨,以期对我国今后的采标工作有所帮助。1畜产品贸易中的国际标准在畜产品国际贸易协调中发…     

应用套入式聚合酶链反应(Nested-PCR)检测蓝舌病病毒的研究

本实验建立了一种Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ方法。应用方法检测５株标准株蓝舌病病毒（Ｔ４、Ｔ１０、Ｔ１１、Ｔ１６、Ｔ２０）和５株国内蓝舌病病毒分离株（ＣＦ４、ＡＦ６、Ｚ１、Ｈ１、Ｇ１４）,检测结果均为阳性,而检测相关环状病毒（ＥＨＤ２、ＥＨＤ６、Ｉｂｒａｋｉ）,检测结果均生。研究证明,此方法可检测到３．５ｆｇ的ＢＴＶ－ＲＮＡ,灵敏度较高。该方法成功区分了蓝病病毒和相关环状病毒,比血清学方法更加优势,在临床     

RT-PCR结合限制性内切酶分析法区分NDV强弱毒株

通过设计的特异引物，采用RT-PCR对1996年以来分离的45株国内新城疫病毒分离株进行鉴定和分析，并与其MDT实验结果进行比较，建立了RT-PCR结合BglⅠ内切酶分析区分新城疫强弱毒的方法。此方法操作简便、迅速，不仅能区分新城疫的强弱毒株，还可诊断AMPV-1引起的其他禽类的感染。     

鸡传染性支气管炎病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与初步应用

为建立一种快速准确检测鸡传染性支气管炎病毒的方法,根据鸡传染性支气管炎病毒的核衣壳蛋白基因进行引物和探针设计,建立了一种能够检测鸡传染性支气管炎病毒的实时荧光RT-PCR方法,并对该方法进行特异性和灵敏度检测,同时与国家标准检测方法进行对比。结果显示,本检测方法特异性好,不与其他相关病毒发生交叉反应,灵敏度可达到10-4 ng/μL,与国标检测方法的符合率达100%。结果表明,本研究建立的检测方法可以准确鉴定鸡传染性支气管炎病毒,具有良好的应用前景。