副猪嗜血杆菌四川株生物学特性及药物敏感性研究

为了解副猪嗜血杆菌四川分离株的生物学特性及耐药性情况,本研究采用微生物及分子生物学技术对副猪嗜血杆菌(Hps)四川分离株从生物学特性、16S rRNA基因PCR扩增和耐药性方面进行了研究.结果显示,Hps四川分离株具有一定的微厌氧性,能产生"卫星现象",分离株与其他地区分离株生化特性基本一致;所有分离株均扩增出821 bp的特异性16S rRNA基因片段.药物敏感性试验结果显示,分离株对头孢拉定、氨苄西林、头孢氨苄、阿莫西林、头孢克洛、氧氟沙星、头孢噻肟、呋喃妥因具有较高的敏感性,敏感率为75.61%~87.80%;对林可霉素、羧苄青霉素、恩诺沙星、阿米卡星、磺胺甲唑均表现出较高的耐药性,且多重耐药严重,5~8种耐药占比最多,为21.95%~30.49%,有7株可耐受多达13种药物.结果表明,Hps四川分离株存在严重的耐药性现象.     

B9601-Y2溶磷解钾固氮能力及促玉米生长效果研究

为了明确淀粉芽孢杆菌B9601-Y2(Y2)的促生长机制,通过摇瓶培养,检测其溶磷解钾固氮活性;通过盆栽试验,探索Y2对玉米生长量和溶磷解钾量的影响。结果表明,在第7天时,Y2固氮量为2.9 mg/L,解钾量为13.5μg/mL;在第4天时,溶磷量达732μg/mL。与空白对照相比,Y2发酵液能增加玉米株高28.29%,根长27.21%,叶宽18.56%,鲜重80.93%,干重66.67%;提高土壤中速效氮、速效磷和速效钾含量分别为20.42%、111.01%和17.24%,提高植株氮、磷、钾含量45.46%、120.17%、68.45%。研究结果表明,Y2活化土壤中难溶性磷、钾和具有固氮能力,并能促进植株对氮、磷、钾营养的吸收利用。     

恩拉霉素人工抗原的合成与鉴定

建立酶联免疫方法以检测食品中恩拉霉素的残留,采用戊二醛法,偶联半抗原恩拉霉素(Er)和载体牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA),制备人工免疫抗原和人工包被抗原,分别为Er-BSA和Er-OVA。经紫外光谱鉴定,在紫外270～280 nm波长处得到Er-BSA和Er-OVA特征性偶联吸收峰。试验结果表明人工合成的2个人工抗原均偶联成功。人工免疫抗原和人工包被抗原的偶联比均达到26∶1,为进一步制备抗血清和酶联检测方法的建立奠定了基础。     

猪蓝耳病与猪链球菌、副猪嗜血杆菌混合感染的诊治

2017年10月份,四川省某规模化猪场育肥猪发生死亡,经临床诊断及实验室确诊为猪蓝耳病与副猪嗜血杆菌病、猪链球菌混合感染导致。发病猪群采用七清败毒散拌料、黄芪多糖饮水,肌注头孢噻呋钠,仔猪肌注倍健+倍康肽组合治疗,发病猪群很快得到有效控制。     

叶面喷施枯草芽胞杆菌XF-1防治大白菜根肿病

为了建立简易、有效的根肿病生防体系,本研究采用浇灌和喷施枯草芽胞杆菌XF-1的绿色荧光蛋白标记菌株XF-1-gfp,测定其在大白菜植株内的定殖能力,并用野生型菌株XF-1发酵液研究其防治根肿病和挽回产量效果。结果表明,叶面喷施XF-1-gfp发酵液后,标记菌在大白菜根、茎、叶等组织内的密度呈现出"先上升后下降最后趋于平稳"的趋势,最终稳定在约10~3 cfu/g组织;盆栽试验结果表明,与空白对照相比,所有处理发病率和病情指数均显著下降,喷施XF-1发酵液后最佳防治效果为56.4%,浇灌化学杀菌剂10%氰霜唑悬浮剂2 000倍液及1×10~7 cfu/mL的XF-1发酵液防效分别为78.6%与70.7%。大田试验结果表明,喷施XF-1发酵液后防治效果达52.6%,与浇灌化学杀菌剂10%氰霜唑悬浮剂(64.6%)及XF-1发酵液(74.0%)相比无显著差异。此外,与空白对照、浇灌10%氰霜唑悬浮剂及XF-1发酵液相比,喷施XF-1发酵液后大白菜单株产量分别增加了74.0%、35.1%及23.6%。试验结果表明叶面喷施XF-1发酵液是一种有效的防控大白菜根肿病及增产增收的方法。     

猪细小病毒疫苗株NS1基因克隆及生物信息学分析

为进一步开展猪细小病毒（porcine parvovirus,PPV）NS1蛋白功能研究,根据GenBank登录的PPV参考株NADL-2（登录号：NC001718）的NS1基因序列设计1对特异性引物,采用PCR技术扩增PPV疫苗株NS1基因,将PCR扩增产物克隆入pTA2载体构建重组质粒pTA2-NS1,并进行测序鉴定。测序结果显示,构建的pTA2-NS1质粒含有一个开放阅读框（ORF）,全长1989 bp,共编码662个氨基酸,与GenBank登录的PPV参考株NADL-2、Kresse株的NS1基因的核苷酸同源性分别为99.85%和99.65%,氨基酸同源性分别为99.70%和99.70%。上述结果表明试验成功构建了含有PPV NS1基因的重组质粒pTA2-NS1。应用DNAStar软件及在线ProtScale、SignalP 4.1、TMHMM、Scansite、PSORTⅡ等生物信息学软件对NS1基因及其编码蛋白进行生物信息学分析,结果显示NS1蛋白分子质量为75.7 ku,等电点PI为6.82,是弱酸性蛋白;NS1蛋白不含信号肽序列,无跨膜区,为可溶性蛋白,主要定位于细胞核内,T199、Y309、T338、T512、S631、T635为其潜在磷酸化位点。以上研究为进行PPV NS1蛋白表达,进一步开展NS1蛋白功能研究奠定了基础。     

大肠杆菌磺胺类抗生素耐药基因二重PCR技术的建立

为建立一种一次性检测多个磺胺类抗生素耐药基因的检测方法,用磺胺类抗生素耐药大肠杆菌作为受试生物,根据磺胺类抗生素耐药基因Sul1和dfrA1设计一对引物进行二重PCR检测。结果发现:本方法能有效检测出大肠杆菌Sul1和dfrA1两种磺胺类抗生素耐药基因,检出限为4.5 cfu/μL,对于Sul1和dfrA1两种磺胺类抗生素耐药基因具有较强的检出特异性。此方法对检测大肠杆菌磺胺类抗生素耐药基因提供了有力的技术支撑。     

猪繁殖与呼吸综合征疫苗研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是一种引起母猪繁殖障碍和新生仔猪呼吸道症状及高死亡率的传染病,该病在全球广泛流行,并造成严重经济损失。疫苗免疫是防控该病的重要措施之一,国内外学者高度重视PRRS疫苗的研究,并取得了较大的进展。对PRRS的灭活疫苗、弱毒疫苗和基因工程疫苗的研究概况,及当前疫苗免疫的实施等内容进行了阐述。     

成年珍禽禽流感免疫抗体消长规律及免疫程序的研究

为了弄清动物园成年珍禽的禽流感免疫抗体消长规律,用禽流感(H5+H9)二价灭活疫苗免疫接种动物园的8种珍禽,分别在免疫接种前后不同时间无菌采血,检测血清中H5和H9亚型禽流感病毒血凝抑制(HI)抗体。结果表明,大部分珍禽首次免疫接种后都能产生H5和H9亚型禽流感病毒HI抗体,但不同种类免疫反应不同。孔雀等4种珍禽在首次免疫接种后400d,H5、H9亚型禽流感病毒的抗体仍能维持较高的水平;白冠长尾雉等4种珍禽首次免疫后,H5、H9亚型禽流感病毒抗体水平不高,且维持时间很短,在进行H5+H9二价灭活苗加强免疫后,能有效提高H5、H9亚型禽流感病毒免疫抗体,免疫抗体均能维持7个月。通过对免疫抗体的监测,对两种不同剂量的比较研究,并结合动物园珍禽的实际情况,本研究初步建立了成年珍禽的禽流感的免疫程序。     

元宝枫黄酮、大豆黄酮和金霉素对肉鸡生长性能和免疫机能影响的比较研究

选择300只1日龄AA雏公鸡随机分为4组,即基础日粮组(对照组)、添加5mg/kg金霉素组、添加10mg/kg大豆黄酮组和添加10mg/kg元宝枫黄酮组。与对照相比,各添加组在3周龄时对耗料量、体增重、料肉比无显著影响(P>0.05),七周龄时对体增重无显著影响(P>0.05),能显著降低耗料量(P<0.01)和改善料肉比(P<0.05)。添加元宝枫黄酮能显著提高T淋巴细胞的转化率(P<0.01)。与对照相比,添加大豆黄酮组和添加元宝枫黄酮组能显著提高红细胞C3b受体花环率。