鸡源和鸭源EDS病毒的某些生物学特性比较

对 Ｅ Ｄ Ｓ 病毒鸡源株 （ Ｎ Ｅ４） 和鸭源株 （ Ｊ Ｅ１） 在繁殖动态、毒价、免疫原性、核酸酶切图谱、多肽组成等５ 个方面进行比较研究。结果表明, ２ 株相同血清型、不同宿主来源的 Ｅ Ｄ Ｓ 病毒在普通生物学特性方面基本相同, 但在核酸酶切图谱和多肽组成等分子生物学水平上存在明显差异。     

上海地区一株猪伪狂犬病毒的分离与鉴定

上海地区某猪场发生疑似伪狂犬病毒感染,采集其内脏样品进行伪狂犬病毒的分离,并采用细胞病变观察和荧光PCR方法进行鉴定。结果表明采用BHK-21细胞能够从该发病猪体内分离到猪伪狂犬病毒,其分离株能够引起BHK-21细胞产生典型的细胞病变。该猪场发生猪伪狂犬后,已连续造成2头成年猪的死亡,全群发病率高达50%,这与以往伪狂犬病并不造成成年猪的死亡不同,需要对该分离株进行进一步病原特性的研究。     

上海市猪群中猪流感病毒优势亚型的血清学调查

为了解当前本市猪群中猪流感病毒的优势亚型,摸清病毒感染现状和规律,对2011年上海市46个场户的723份猪血清应用血凝抑制试验(HI)和酶联免疫吸附试验(ELISA)进行了检测。结果显示:本地猪群中猪流感病毒的H1亚型为优势亚型,H3亚型病毒感染率较低,被检场户流感病毒抗体的场阳性率为1.25%～100%,样品阳性率为1.3%～74.7%。提示:猪群对H1、H3亚型流感易感,种猪的感染程度明显高于肉猪,未检测到H5、H9亚型流感病毒抗体。     

鸡源和鸭源EDSV某些分子生物学特性的比较

采用差速高心法纯化鸡源（NE_4株）和鸭源（JE_1株）EDSV后,一方面用酚—氯仿抽提法分别提取两种毒株的核酸,选取EcoR、BamH、I、Bgl I、Bgl、Ⅱ、Kpn、I、Pst I和Hind Ⅲ 7种限制性内切酶对两种毒株的核酸进行酶切图谱分析;另一方面利用SDS—PAGE技术对两种毒株进行多肽分析。酶切结果显示:鸡源株用上述7种酶酶切后分别产生4、4、6、8、5、9、10个片段,共计46个;鸭源株分别产生4、4、5、7、9、10、8个片段,共计47个。两者的酶切结果除EcoR I 的酶切片段数和酶切图形完全相同外其余均存在不同程度的差异。凝胶染色及染色凝胶扫描结果均显示:NE_4株有13条多肽,JE_1株有16条多肽,其中有8条多肽的分子量两者相同。Western Blotting结果显示:NE_4株和JE_1株均有 8条具有免疫原性的多肽,其中2条分子量两者差异明显,其余6条分子量相同。     

上海地区猪伪狂犬病例浅析

近年来上海地区猪场出现猪伪狂犬频发的现象,并导致一些猪场猪群的死亡,笔者对上海地区发生伪狂犬的病例进行流行病学调查,并进行病毒分离和细菌分离,共分离伪狂犬病毒23株,细菌分离以大肠杆菌为主.初步推断上海地区近年来PRV感染频发的可能原因,包括：未注射伪狂犬疫苗、购买时未进行隔离就进行混群饲养及饲养环境较差等.初步提出防控建议：（1）养殖户应当选择大型牧场或者免疫措施做得比较好的猪场购买仔猪; （2）在猪群入猪棚时,应当做好棚舍的消毒工作,以及一个月的隔离饲养;（3）对买回的猪群应当尽快做好主要疫病的免疫; （4）消灭猪场内啮齿类动物,加强抗体监测.     

2017年上海市活禽市场H9N2亚型禽流感病毒全基因进化分析

为了解上海市活禽市场H9N2亚型禽流感病毒(AIV)分离株的遗传变异情况,本研究对2017年分离的6株H9N2 AIV的8个基因片段进行RT-PCR扩增、克隆和测序,并对获得的HA基因序列进行同源性和关键位点分析.结果显示:6个分离株的HA裂解位点均为RSSR↓GLF,符合低致病性AIV的分子特征;6株分离株均有8处糖基化位点;受体结合位点除198位和202位有变异外,其它位点均保守,226位氨基酸均为L,228位氨基酸均为G,因此具有与哺乳动物唾液酸α2-6受体结合的特征;所有分离株HA基因核苷酸同源性为93.4%~99.9%,氨基酸同源性为93.8%~99.5%,HA基因进化树显示上述6株分离株均属于近几年在中国鸡群中流行的h9.4.2.5分支;从8个基因片段组成方式分析这6个毒株属于G57基因型.本研究结果为H9N2亚型AIV的防控和疫苗研制提供了科学参考.     

上海市规模化猪场猪流感的血清学调查

采用HI和EHSA方法，于1999—2002年间对上海市规模化猪场猪群进行了猪流感的血清学调查，通过对猪血清HI、ELISA试验的同步检测，表明本市规模化猪场猪血清仅对流感病毒的H3、H1亚型易感，能产生特异性血凝抑制现象或显色反应，表明存有针对H3、H1亚型流感病毒的血清抗体，阳性率31．8％至94．9％不等，而且种猪的阳性率及抗体滴度明显高于肉猪和保育猪。     

上海市三株H9N2鸭禽流感病毒全基因遗传进化分析

为了解上海市鸭群中H9N2亚型禽流感病毒（Avian influenza virus,AIV）的遗传变异特征,以及与疫苗株A/Chicken/Shan dong/6/1996和A/Chicken/Shanghai/F/1998之间的遗传距离,对2007年和2009年分离自上海市鸭气管和泄殖腔样品采用荧光RT-PCR检测,将H9亚型禽流感病毒核酸阳性样品处理后,经鸡胚尿囊腔接种分离病毒,HI进一步确定血凝素（haemagglutin,HA）亚型,随后进行了全基因测序,并结合GenBank中的相关序列进行遗传进化分析。结果表明：3株分离毒株为H9N2亚型鸭禽流感病毒,HA蛋白裂解位点的氨基酸组成为PARSSRGLF,符合低致病性禽流感病毒特征,均属于经典的H9N2 Ck/Bei群系;NA基因均属于Y280系;NP、PA基因和A/Goose/Guangdong/1/1996（H5亚型）归为一群;PB2和M基因属于Qa/HK/G1/97系;NS基因仍为Ck/Bei系;2007年的分离株和2009年的分离株在PB1基因上分属不同亚群。3株病毒的HA1基因与疫苗株A/Chicken/Shandong/6/1996和A/Chicken/Shanghai/F/1998之间的遗传距离均大于7%。由此可见,3株鸭H9N2亚型毒株可能是由不同禽流感病毒基因亚群间发生自然重排的产物,现有疫苗对分离株的保护性需要进一步评估。     

鸡源和鸭源EDS病毒的毒价测定

减蛋综合征（EDS）是产蛋母鸡以产蛋量减少。产软壳蛋和无壳蛋为特征的一种病毒性传染病。目前世界上许多国家和地区都有本病流行。我国从80年代后期检测到本病的存在[1]，19用年李刚等[2]首次分离到本病病毒，至今已分离到鸡源[3]、鸭源[4]和鹅源[5]不同宿主的EDS病毒。各毒株     

2株弱血凝活性H9N2亚型禽流感病毒特性的研究

试验旨在对2株血凝活性较弱的H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)进行病毒特性的研究。采用HA/HI、电镜观察、HA和NA测序等方法对2株分离株进行了病毒的鉴定;采用形态学、化学和生物学方法对这2株分离株进行研究。2株病毒被确定为A型H9N2亚型AIV;病毒粒子在透射电镜下为圆形、椭圆形、杆状并呈多型性,大小为80~120 nm;血凝素(HA)均为中等耐热型;病毒50 ℃均耐热;均能凝集公鸡和人O型红细胞,但凝集作用开始并未出现,而是随着病毒的传代逐渐恢复;均不凝集猪、牛、羊、兔和马红细胞;2株病毒均对乙醚、氯仿不敏感,只有1株病毒对酸敏感;病毒对鸡胚无致死性,EID₅₀均为1×10^-7/0.2 mL;经鼻腔途径感染小白鼠,均未导致小鼠出现症状和死亡,接种后第14天在小鼠血清中可检出相应病毒的抗体。研究结果表明,上海地区活禽交易市场存在对环境条件具有较强耐受性的H9N2亚型AIV。