猫冠状病毒S蛋白原核表达及鉴定

猫传染性腹膜炎是由猫冠状病毒(Feline coronavirus,FCoV)引起的慢性致死性疾病,以腹膜炎、大量腹水积聚为主要特征,不同年龄的猫均可感染,但老龄猫和2岁以内的猫发病率较高,纯种猫发病率高于一般品种的家猫,传染率非常高。本研究将猫冠状病毒S基因进行碱基序列优化并合成,亚克隆至PET30a,得到原核表达载体PET30a-NTU-2-S-RBD,进行大量诱导表达并纯化,最终得到的蛋白纯度可达90%,为后续疫苗的制备及诊断方法的建立奠定基础。     

上海市规模化奶牛场布鲁氏菌病和牛结核病风险评估分级体系研究

为尽快实现上海崇明奶牛布鲁氏菌病和牛结核病(以下简称"两病")区域净化示范区净化目标,通过建立奶牛场"两病"输入性风险评估和内部风险评估模型,结合奶牛场"两病"流行史,构建了上海市规模化奶牛场"两病"风险评估分级体系;应用该体系将奶牛场划分为高、中、低风险场,为实施分类管理策略奠定基础。运用该体系,对上海市崇明区奶牛场每年开展1次"两病"风险评估分级。经过连续3年的风险分级与管理,崇明区奶牛场的"两病"净化效率得到极大提高,并使崇明奶牛"两病"区域净化示范区顺利通过国家验收,表明该体系符合上海市奶牛"两病"净化工作实际。     

1株猫杯状病毒的分离鉴定及其ORF2序列的遗传演化分析

为了解猫杯状病毒形态特征及遗传演化情况,采用F81细胞从患病宠物猫的鼻拭子样品中分离获得1株猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV),命名为SH1。经电镜观察,病毒粒子呈球形,无囊膜,符合FCV的形态特征。采用RT-PCR方法扩增了该毒株的全基因组,并进行了序列测定和衣壳蛋白基因(ORF2)序列的分析。结果显示:分离株与国内外参考株的ORF2序列的核苷酸和氨基酸同源性分别为74.1%~79.7%和84.5%~90.9%;ORF2基因的遗传演化分析显示,30株FCV毒株形成两大分支,即基因群Ⅰ和Ⅱ,分离株属于基因群Ⅰ;进一步分析发现,基因群Ⅰ和Ⅱ主要在377、539和557氨基酸位点存在差异,基因群Ⅰ和Ⅱ分别为N、A、G和K、V、S。研究结果为FCV感染的防控提供科学依据。     

猪δ冠状病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与应用

为灵敏、快速检测猪δ冠状病毒（porcine deltacoronavirus,PDCoV）,根据PDCoV M基因保守区域设计引物和探针,建立了一种PDCoV实时荧光RT-PCR检测方法,并评价了该方法的特异性、灵敏性和重复性。结果显示,该方法的拷贝数对数值与Ct值在1.3×103~1.3×107 copies/μL拷贝数浓度范围内呈现良好的线性关系,R2 = 0.994;最低检出限为13 copies/μL,且无非特异性扩增;批内和批间重复性试验变异系数（CV）为0.24%~2.15%,均小于3%。利用该方法和普通RT-PCR对42份临床样品同时进行检测,发现本方法比普通RT-PCR灵敏性更高,二者符合率为95.2%。以上结果表明,本试验建立的实时荧光RT-PCR方法灵敏、特异、可靠,可用于PDCoV的临床检测和流行病学调查。     

实验室检测畜禽主要病毒性疾病样品的采集、运输及选择

<正>混合感染已经成为当前畜禽传染性疾病流行的最主要特征之一,导致发病率和死亡率的显著上升,带来巨大的经济损失,同时也造成了临床症状的不典型,给诊断带来了极大的难度。临床上,我们很难简单地将几个症状组合起来就能判定是什么疾病。而正确判断畜禽疫病需根据流行情况、临床症状、剖检和实验室病原检测来确诊。病原检测是确诊的主要依据,而要做好实验室检测,采、送样品是关键。规范的采集、保存和运送样品,是实现     

堆钠乡萨木村以绵、山羊为主的幼畜断牙病病因与防治研究

在亚东县堆钠乡萨木村发病的幼畜断牙病，早在1809年已有记载，该病主要侵害幼畜，是一种危害十分严重的地方性疾病，直接给地方畜牧业发展和农牧民增产、增收造成极大的经济损失。因此，针对这一热点问题我所科技人员从1998年到2000年进行了调查研究，在病区和无病区分别采集样品，进行实验室分析测定，同时作了动物试验、药物防治等，目前基本摸清了该病的病因，并提出了具体有效的防治措施。     

三种藏药成分复方抗ORFV体内外药效学实验研究

将岩青、轮叶棘豆等3种藏药材成分按一定比例配成复方,采用水提醇沉法提取,将浓缩药液用细胞维持液配制成1g·L-1的药液,并根据对兔肾细胞(PRK)安全浓度的测定结果,稀释成不同梯度浓度,分别将脓疱皮炎病毒(ORFV)加入到已培养24h的单层PRK中,通过MTT法测定OD值,分析其对ORFV病毒增殖的影响;并通过复制ORFV感染小鼠建立动物模型,观察药液对ORFV感染小鼠的保护作用。结果表明:复方药液的浓度在7.81mg·mL-1～62.5mg·mL-1范围内,经回归分析,药物浓度与活细胞存在线性关系,P<0.05,对病毒增势有显著的抑制作用;复方药液可明显延长ORFV感染小鼠存活天数和存活率,与阳性对照组比较具有显著性差异(P<0.05)。说明藏药材复方药液具有抗脓疱皮炎病毒感染的作用,为临床试验提供理论依据。     

强痛定治疗大家畜牙疼

大家畜牙疼症在临床上发生不多,有则多以中药治疗,西药治疗家畜牙疼报道很少。牙疼症状:家畜突然发生,采食与咀嚼很小心,吃进食草咀嚼1—2下就随即吐出,表现疼痛,食草有牙痕迹易湿但不成草团状,吐出后又采食咀嚼1—2下又复吐出。一日后由于饥饿而大口采食咀嚼,但又完全吐