卵黄抗体在防治仔猪腹泻病中的应用

卵黄抗体(IgY)是使用抗原免疫禽类后,从禽蛋中提取出来的针对特定抗原的抗体,是具有较强免疫功能的蛋白质。由于卵黄抗体具有性质稳定、高产量、低成本等优势,目前已广泛应用于畜禽疾病的治疗中。本文主要介绍了卵黄抗体在仔猪细菌性腹泻和病毒性腹泻等疾病防治中的应用。     

上海市某奶牛场结核病现场流行病学调查

2015年7月,上海市奉贤区某奶牛场报告发现25头奶牛结核病阳性病例。为了解疫病来源及风险因素,对该奶牛场开展了现场流行病学调查。结果显示,该场4~6月龄犊牛的结核病流行率为9.41%,6~10月龄发育牛的结核病流行率为6.25%;4个阳性棚舍均接近生活区,其中22号棚舍最接近办公区,暴露在其内的牛确诊为结核的风险最高,是21号棚舍牛的10.67倍(95%CI:3,37.91)。调查认为,该奶牛场结核病传入的主要风险因素是引进动物以及人员流动。根据调查结果,建议将该奶牛场所有结核病检测阳性牛扑杀并进行无害化处理,饲养员定期进行结核病检测,降低人员流动频率,对进出本场的车辆、器具冲洗干净后彻底消毒,防止疫情散播。     

上海市沪淮批发市场从某省引进感染H7N9流感病毒活鸡的定量风险分析

2013年3月底,上海市报道了全国首例人H7N9流感确诊病例。随后全国其他地区又有多例病例被确诊,而且多被证实有活禽接触史。根据调查,上海市市场售卖的活禽大多来自外省(市),其中沪淮批发市场的活禽全部来源于某省大型养殖公司,主要是黄羽肉鸡。本研究利用定量风险分析的方法,评估沪淮批发市场在2015年12月从该省引进至少1羽感染H7N9流感病毒活鸡的可能性。根据情景树,建立了定量风险分析模型,并利用@RISK软件,模拟计算出2015年12月至少有1羽活鸡携带H7N9流感病毒进入批发市场混群的概率为11.9%(95%CI:6.22%~19.82%)。该结果的不确定性为中等。模型敏感性结果显示,检测技术敏感性、H7N9流感个体流行率和H7N9流感场群流行率是重要参数。评估结果提示,养殖场应提高生物安全防护意识,有效降低养殖场中病原存在的概率。建议相关部门进一步优化检测技术,提升产地检疫效能,通过多种方式减少活禽交易量,推广规范化交易模式,提高交易各环节的生物安全水平。     

鸡源和鸭源EDSV某些分子生物学特性的比较

采用差速离心法纯化鸡源和鸭源ＥＤＳＶ后,一方面用酚－氯仿抽提法分别提取两种毒株的核酸,选取Ｅｃｏ ＲⅠ,ＢａｍＨⅠ,ＢｇｌⅠ,ＢｇｌⅡ,ＫｐｎⅠ,ＰｓｔⅠ和ＨｉｎｄⅢ７种限制性内切酶对两种毒株的核酸进行酶切图谱分析;另一方面利用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ技术对两种毒株进行多肽分析。酶切结果显示：鸡源株用上述７种酶酶切后分别产生４,４,６,８,５,９,１０个片段,共计４６个;鸭源株分别产生４,４,５,７,９,     

绵羊伪狂犬病病毒的分离鉴定及其gD基因序列分析

本研究以1例疑似绵羊伪狂犬病病例为研究对象,进行了病毒分离鉴定及其g D基因分析。将病料接种BHK-21细胞,细胞出现病变,经间接免疫荧光和荧光定量PCR检测结果证实,所分离的病毒为伪狂犬病病毒,将其命名为SH1311毒株。在电镜下观察病毒,病毒粒子呈球形,囊膜表面有大量纤突。对分离株g D基因进行PCR扩增、测序和序列分析,并与国内外伪狂犬病病毒株的同源性进行比较发现,该分离株与2012年以来上海市分离的猪PRV毒株g D基因的同源性最高,为99.8%~100%,而与2010年上海市流行毒株相比,同源性只有80.5%。构建的g D基因进化树显示,SH1311分离株与上海市2012~2015年间分离的7株猪伪狂犬病病毒以及国内JS-2012、HNB、HN1201、HLJ8、BJ/RD、ZJ01毒株属于同一个进化分支,亲缘关系最近,与欧美以及韩国的流行毒株都处在不同的分支上。     

共表达AsiaⅠ型口蹄疫病毒P1-2A和3C基因重组山羊痘病毒的构建及鉴定

将口蹄疫病毒（FMDV）衣壳蛋白前体P1-2A基因和蛋白酶3C基因与启动绿色荧光蛋白双向串连痘苗病毒启动子相连,以KpnⅠ为插入位点,将整体基因片段插入山羊痘病毒转移载体骨架pUC119-TK之中,构建共表达重组山羊痘病毒转移载体pTK-P7.5-GFP-P12A3C。与疫苗弱毒株山羊痘病毒共转染BHK21细胞,经绿色荧光筛选,RT-PCR检测,成功获得能正确表达目的蛋白的重组山羊痘病毒株vTK-3CP1-GFP。     

上海地区猪群中戊型肝炎病毒的流行情况

猪戊型肝炎是一种人畜共患病,为了弄清上海地区猪群中戊型肝炎的流行情况,评估其感染人的风险,于不同季节调查上海地区不同区(县)规模化猪场中不同月龄猪戊型肝炎病毒的感染状况.试验应用逆转录-巢式聚合酶链法fRT-nPCR)对9个区(县)51个猪场(次)的猪粪便标本和1个生猪屠宰中心的127份猪胆汁标本进行HEV RNA检测,结果为51个猪场次中31场次为阳性,阳性率为60.78%.1 699份猪粪便标本中201份为HEV RNA阳性,阳性率为11.83%;阳性标本季节分布明显,以夏秋季为主,平均阳性率为14.63%,而冬春季平均阳性率为5.91%;1月龄以内的仔猪感染率低于10%,为8.60%,其他均在10%～15%左右;9个养猪的区(县)中均存在戊型肝炎病毒的感染,但差异也较大,最高为18.30%,而低的只有0.61%.127份猪胆汁标本中有9份为阳性,阳性率为7.09%.结果说明上海地区的猪群中存在着较为广泛的猪戊型肝炎病毒的感染,提示密切接触者存在感染的风险.     

猫传染性鼻气管炎病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

猫传染性鼻气管炎(FIR)病毒是引起猫传染性鼻气管炎的病原,属于猫疱疹病毒1型(FHV-1)。选择FHV-1gD基因设计1对引物FHV-1F、FHV-1R和探针FHV-1Probe,建立FHV-1实时荧光定量PCR检测方法。结果表明,该方法可以特异地检测出FHV-1的DNA,敏感性达到75fg/μL,反应效率达到107%,R²值为0.9965,Ct值的变异系数低于2%。FHV-1实时荧光定量PCR检测方法敏感性高于普通PCR,特异性好、稳定性好,适用于FHV-1的临床诊断、检测和流行病学调查。利用该方法对上海地区宠物门诊送检的疑似FHV-1感染的样品进行检测,其阳性率达到27.78％,表明上海地区宠物猫FHV-1的发病率处于较高水平。     

PRRSV的分离及与疫苗毒细胞病变的比较

本研究利用Marc-145细胞在临床上分离到的一株猪繁殖-呼吸综合症病毒(PRRSV),命名为J株,井将其与另外两株疫苗株A和B进行细胞培养特性和致病性进行比较,发现其相对于疫苗毒来讲,出现细胞病变的时间长.细胞病变各异,细胞液浑浊,并且其半数细胞感染量比疫苗毒要高1000倍左右.研究表明该临床野毒对Marc-145细胞的感染力较强,培养的毒力也较高,同时两株疫苗株的TCID50明显低于J株,因此笔者建议应当在PRRSV疫苗生产过程中时刻监控疫苗的毒力和病毒含量,一方面防止病毒毒力返强,造成人为的散毒,另一方面要保证疫苗中病毒的含量,防止生产的疫苗的病毒量达不到免疫要求,从而导致免疫失败.     

猪圆环病毒2型PCR检测方法的建立及其在临床检测中的应用

选择猪圆环病毒2型(PCV-2)基因保守区设计1对引物P1和P2,扩增536 bp的片段,该方法可以特异地检测出PCV-2的DNA,而对猪细小病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒及未接PCV-2的PK-15细胞均呈阴性;该法能检测出29 ng/L的病毒DNA。对扩增片段进行测序,结果表明扩增片段属于PCV-2。应用该方法对2008年度上海及周边地区送检的91份临床样本进行了PCV-2的检测,结果表明,阳性样本为52份,阳性率为57.14%。研究结果表明,建立的PCR方法检测PCV-2具有较好的敏感性和特异性,可用于PCV-2感染疑似病例的诊断及其分子流行病学调查。