全文获取类型
收费全文 | 602篇 |
免费 | 16篇 |
国内免费 | 47篇 |
专业分类
农学 | 9篇 |
6篇 | |
综合类 | 181篇 |
水产渔业 | 6篇 |
畜牧兽医 | 463篇 |
出版年
2023年 | 5篇 |
2022年 | 9篇 |
2021年 | 14篇 |
2020年 | 11篇 |
2019年 | 19篇 |
2018年 | 6篇 |
2017年 | 18篇 |
2016年 | 34篇 |
2015年 | 21篇 |
2014年 | 34篇 |
2013年 | 26篇 |
2012年 | 71篇 |
2011年 | 70篇 |
2010年 | 73篇 |
2009年 | 79篇 |
2008年 | 34篇 |
2007年 | 42篇 |
2006年 | 29篇 |
2005年 | 19篇 |
2004年 | 9篇 |
2003年 | 10篇 |
2002年 | 9篇 |
2001年 | 5篇 |
2000年 | 8篇 |
1999年 | 7篇 |
1998年 | 3篇 |
排序方式: 共有665条查询结果,搜索用时 15 毫秒
31.
32.
根据GenBank中已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF3基因序列,设计合成了1对特异性引物,扩增出病毒ORF3结构基因。将该基因克隆到pMD18-T,构建了重组质粒pMD18-ORF3,并对筛选出的阳性质粒进行测序。应用序列分析软件对测序结果分析可知,克隆得到的ORF3基因组全长812 bp。通过DNAman对所测ORF3基因核苷酸序列与GenBank中登录的国内外PRRSV毒株核苷酸序列进行同源性比较。序列分析结果显示,XJPRRSV1/03与参考毒株VR2332、LV、CH-1a的核苷酸同源性分别为95.8%,89.8%,92.7%,氨基酸同源性分别为96.6%,88.5%,93.2%。XJPRRSV1/03与VR2332同源性最高。 相似文献
33.
应用建立的两个多重PCR方法,对无锡及周边地区的151份猪高热病病料进行检测,病毒检测结果中阳性率最高的为PRRSV,阳性率为58.3%;其次是PCV2,阳性率为39.7%,CSFV排第三,阳性率为20.5%,PRV、PPV的阳性率分别为1.3%和2.0%。在细菌检测结果中阳性率最高的为猪链球菌,阳性率为27.2%;其次是副猪嗜血杆菌,阳性率为18.5%,致病性大肠杆菌排第三,阳性率为11.3%,猪巴氏杆菌排第四,阳性率为6.0%,猪肺炎支原体、传染性胸膜肺炎放线杆菌和猪附红细胞体的阳性率分别为0.7%、2.0%和2.6%。通过流行病学调查,表明PRRSV、PCV2、CSFV、SS、HPs、E.col i和Pm在无锡地区猪无名高热病中呈流行趋势,混合感染严重,应采取有效的综合防制措施。 相似文献
34.
35.
36.
37.
猪呼吸与繁殖综合症病毒RT-LAMP检测方法的建立 总被引:6,自引:2,他引:4
【目的】建立一种适用于猪繁殖与呼吸综合症病毒的快速、灵敏、特异性检测方法,即一步反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP)。【方法】设计3对针对PRRSVN基因的8个位点的特异性引物,用优化后的反应体系检测RT-LAMP的特异性、灵敏性并对临床样本进行检测。【结果】RT-LAMP检测方法从核酸抽提到检测仅需要70min,肉眼即可观察检测结果,该方法具有良好的特异性,灵敏度是RT-PCR的10000倍,在对50份猪血液样本RNA的检测中,该方法与传统的RT-PCR检测方法具有很好的统一性(κ=0.83)。【结论】RT-LAMP检测方法可快速、灵敏、特异的检测PRRSV,并适用基层和现场检测。 相似文献
38.
为掌握广西猪主要病毒性传染病流行情况,为猪传染病预防方案提供依据,本研究于2013年1月1日至2014年12月31日从广西省共收集410份样品,运用PCR及RT-PCR方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、传染性胃肠炎病毒(TGEV)、轮状病毒(PORV)、猪流感病毒(SIV)的感染情况。检测结果表明,PRRSV、PCV-2、CSFV、PRV、PEDV、TGEV、 PORV和SIV的平均感染率分别为35.12%、18.54%、1.17%、0.98%、10.00%、2.44%、0和1.22%;PRRSV和PCV-2混合感染率为6.83%;PRRSV在秋、冬季节呈现高感染率为36.67%、45.31%和63.64%、48.78%,而PCV-2在春、夏、冬季节呈现高感染率为44.44%、25.00%,11.29%、19.35%和39.39%、14.63%。PRRSV和PCV-2是混合感染的主要病原,它们互相之间或是与CSFV、PEDV、PRV、SIV及副猪嗜血杆菌、链球菌等混合感染,PRRSV和PCV-2将是今后广西地区猪病防控的重点。 相似文献
39.
试验旨在验证Nsp9基因是否影响猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的复制。构建含有Nsp9全长基因的质粒pIRES2-EGFP-Nsp9,并转染到Marc-145细胞中,接毒之后分别通过实时荧光定量PCR和Western blotting方法测定PRRSV N蛋白在mRNA和蛋白水平的表达。结果显示,转染Nsp9基因的Marc-145细胞上PRRSV的N蛋白在mRNA水平上显著高于未转染Nsp9基因的对照组(P<0.05),是对照组的1.5倍,同时转染Nsp9基因后的Marc-145上PRRSV N蛋白水平也明显高于对照组。随着剂量的增加,N蛋白的表达量在mRNA和蛋白水平都有所增加。由以上结果初步可知,Nsp9基因可以在Marc-145细胞上促进PRRSV的复制,Nsp9基因与其复制密切相关。 相似文献
40.
试验旨在建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)Nsp9基因的实时荧光定量PCR检测方法,并探究其在感染细胞过程中表达量的变化。根据PPRSVNsp9基因序列设计引物,建立基于SYBR Green Ⅰ检测模式的实时荧光定量PCR。结果显示,PRRSV Nsp9基因在1×104~1×108拷贝/μL范围内有很好的线性关系,扩增产物的熔解曲线只有1个单特异峰,无引物二聚体。该方法与猪戊肝病毒(HEV)、猪流感病毒(SIV)、伪狂犬病病毒(PRV)基因组均无交叉反应,可重复性好,组内变异系数小,可用于临床PRRSV检测。在病毒感染细胞过程中,Nsp9基因表达量逐步升高,36 h达到最高。本研究为探究病毒复制规律与临床疫苗生产奠定了理论基础。 相似文献