牛病毒性腹泻病毒和猪瘟病毒双重RT-PCR方法的建立

参照GenBank上已发表的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和猪瘟病毒(CSFV)的全基因序列,针对瘟病毒高度保守的5'-UTR设计3条引物,特异性扩增BVDV、CSFV.经过条件优化后,建立了快速鉴别BVDV和CSFV的双重RT-PCR诊断方法,扩增两种病毒的片段,大小分别为260、200 bp.试验证明,所建立的方法具有良好的特异性和敏感性,利用双重RT-PCR对临床上60份疑似病料进行检测,双重PCR检测的结果与单重PCR检测结果总体符合率为100％,可用于临床病料检测,为防止猪瘟细胞苗的污染及进行CSFV和BVDV的鉴别诊断提供了有效方法.     

银杏叶超细粉对蛋鸡产蛋性能、血脂水平和血清酶活性的影响

旨在研究银杏叶超细粉对蛋鸡产蛋性能、血脂水平和血清酶活性的影响.选择健康的55周龄罗曼白商品蛋鸡192羽,随机分为对照组和试验组共4组,每组3个重复,每个重复16羽,对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加0.60％、0.80％、1.00％的银杏叶超细粉,预试期7d,正试期28 d.结果表明:与对照组相比,各试验组的平均蛋重、产蛋率和日产蛋数均差异不显著(P＞0.05),但添加0.80％银杏叶超微粉组能显著降低蛋鸡的日采食量和料蛋比(P＜0.05).试验组血清中总胆固醇和甘油三酯浓度显著降低(P＜0.05),LDL-C有下降趋势(P＞0.05),HDL-C呈升高趋势(P＞0.05);血清中的谷丙转氨酶活性显著降低(P＜0.05);谷草转氨酶活性呈降低的趋势.结果表明:日粮中添加银杏叶超微粉可以降低蛋鸡料蛋比、血脂水平和血清酶活性,且以0.80％银杏叶超细粉添加量的影响效果最佳.     

副猪嗜血杆菌PCR检测方法的建立与初步应用

针对副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)16 S rRNA序列设计1对特异性引物,能扩增出821 bp的特异性DNA片段,并据此建立了快速准确鉴定副猪嗜血杆菌PCR方法,临床试验证明该方法具有很好的特异性和敏感性.13份疑似病料检测结果表明,PCR检测结果与传统生化鉴定结果符合率为100％.结果表明已成功建立了副猪嗜血杆菌PCR检测方法,并可应用于临床副猪嗜血杆菌的检测.     

副猪嗜血杆菌血清型4液体发酵培养试验研究

为了研究适合副猪嗜血杆菌血清型4的液体发酵培养使用条件,试验测定了副猪嗜血杆菌血清型4在不同发酵条件下的OD600值。结果表明:最适培养条件为TSB培养基、100 mL/250 mL的装液量和0.004%烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)浓度,培养24小时时菌体生长OD600值达到最大,同时产生大量的酸,pH值降至最低。当OD600值小于1时,测得的副猪嗜血杆菌活菌数和OD600值呈良好的线性关系;OD600值越大,偏离的趋势越明显。     

银杏叶提取物对肉仔鸡淋巴细胞增殖及细胞因子水平的影响

为了研究银杏叶提取物(EGB)对肉仔鸡淋巴细胞增殖及细胞因子水平的影响。将360只1日龄健康AA肉用母雏鸡随机分成5组,每组6个重复,其中一组为对照组,饲喂基础日粮;其余4组分别饲喂添加0.009%金霉素及0.15%、0.20%和0.25% EGB的日粮,试验期为42天。测定肉仔鸡外周血和脾脏淋巴细胞转化率以及血清中细胞因子IL-1、IL-2、IFN-γ、TNF-α的含量。结果显示,日粮中添加不同水平EGB可促进肉仔鸡外周血和脾脏淋巴细胞增殖转化,提高血清中细胞因子IL-1、IL-2、IFN-γ、TNF-α的水平,并且在日粮中添加EGB的作用效果比添加金霉素的作用效果好。表明日粮中添加EGB可增强肉仔鸡的免疫功能。     

猪增生性肠炎黏膜免疫相关细胞数量研究

为了揭示猪增生性肠炎黏膜免疫相关细胞数量的变化情况.采用组织学方法,比较PCR检验阳性猪(获得胞内劳森氏菌特异性扩增产物)与阴性猪(无胞内劳森氏菌特异性扩增产物)的十二指肠、空肠、回肠黏膜淋巴细胞、杯状细胞、肥大细胞的数量和分布变化.结果表明,阳性猪十二指肠、空肠黏膜上皮内每100个柱状细胞间淋巴细胞的数量同比阴性猪稍...     

猪繁殖与呼吸综合征病毒类NADC30毒株FJZ03的致病性分析

为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒新流行毒株——类NADC30毒株的生物学特性和致病特征,将类NADC30PRRSV FJZ03毒株和HP-PRRSV FJLYDX毒株分别接种30日龄PRRSV和PCV2阴性仔猪,观察、记录和对比各试验组感染猪的临床症状、体温变化、体外排毒情况、病毒血症及组织病变等情况。试验结果显示,FJZ03株能在猪体内快速复制,引起仔猪较高滴度的病毒血症,体温升高和体外排毒时间均早于高致病性毒株FJLYDX,并且引起严重的间质性肺炎和脾萎缩。细胞因子检测结果表明FJZ03组仔猪细胞因子的浓度都有不同程度的升高,与FJLYDX组相比最明显的是产生较高水平的TNF-α和IL~(-1)0。综上表明FJZ03对仔猪具有较强的致病性。     

福建省一株猪瘟病毒流行毒株全基因组序列测定与分析

根据GenBank公布的猪瘟病毒(CSFV)标准参考毒株全基因组序列,设计11对引物,应用RTPCR方法分别对11个片段进行福建流行毒株CN-FJLY的全基因组扩增,与参考毒株进行序列分析比较。结果表明,福建流行毒株CN-FJLY基因组全长为12 296bp,与参考毒株SXCDK、HEBZ、GXWZ02、HNLY-2011和Zj0801的全基因组核苷酸同源性为93.0%～97.0%,而与1.1亚群的中国强毒Shimen、疫苗株HCLV全基因组核苷酸同源性为84.4%～85.3%。基于全基因组及E2基因构建的遗传进化树分析结果表明福建流行毒株CN-FJLY属于2.1b亚群,与Shimen株、HCLV疫苗株亲缘关系较远。与HCLV相比较CN-FJLY基因组变异较大的是5′UTR、Ems、E2、p7、NS2、NS5A、NS5B和3′UTR。综上说明福建省猪瘟病毒流行毒株正在向远离疫苗株的方向变异。     

黑土区水土保持林对表层土壤微生物群落碳代谢多样性的影响

采用Biolog-ECO 微平板检测法,以典型黑土区美青杨林、水曲柳林、落叶松林和樟子松林土壤为对象,研究了 不同类型水土保持林表层土壤(0 ~10 cm)微生物群落碳代谢多样性的变化特征。结果表明:1)培养144 h 时,4 种 林地土壤碳源平均颜色变化率(AWCD)的变化范围为0.11 ~ 0.62,且表现为美青杨林最高,依次分别为水曲柳林 和落叶松林,樟子松林最低;2)土壤微生物群落碳代谢多样性丰富度指数、Shannon-Winner 指数、Simpson 指数和 McIntosh 指数的变化范围分别为4 ~22、1.37 ~3.00、0.62 ~0.94 和1.46 ~5.21,同样表现为美青杨林最高、其他依 次分别为水曲柳林、落叶松林和樟子松林的规律;3)4 种林地土壤微生物均以多聚物类为主要利用碳源,除此之外, 阔叶林土壤微生物主要利用的碳源类型还包括氨基酸类和羧酸类;4)土壤微生物群落碳代谢多样性指标与土壤理 化性质相关性极为密切。可以认为,阔叶林提高土壤微生物群落碳代谢多样性的作用优于针叶林,研究结果可为 典型黑土区水土保持林的构建提供参考。