松辽白鹅PRLR基因5′调控区多态性研究

[目的]通过研究催乳素受体（PRLR）基因多态性,为松辽白鹅的选种与选育提供理论依据。[方法]参照鹅PRLR基因5′调控区序列设计引物,运用PCR-SSCP技术进行多态性分析。[结果]扩增片段存在多态性,得到AA、AB和BB 3种基因型,AA为优势基因型,等位基因A占主要优势;在PRLR基因5′调控区80处发生了单碱基突变（A→G）。[结论]PRLR基因5′调控区存在突变位点。     

猪瘟活疫苗(种毒)鉴别检验阳性血清制备

为制备猪瘟活疫苗(种毒)鉴别检验阳性血清,本实验将4头非免疫健康猪进行猪瘟活疫苗基础免疫和猪瘟石门强毒株反复强化免疫后,采血分离血清,过滤、分装、冻干、熔封,获得4批产品,并进行了检验和验证。结果显示:物理性状、无菌检验、安全检验、均一性检验、支原体检验、真空度测定均合格;剩余水分均小于4%;特异性检验表明,口蹄疫病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒、牛病毒性腹泻/粘膜病病毒抗体均为阴性;残余猪瘟病毒免疫荧光和套式RT-PCR核酸检测结果均为阴性;兔体中和效价分别为1∶800、1∶800、1∶800和1∶1 600;对猪瘟兔化弱毒种毒和5种猪瘟活疫苗的验证结果均良好。该4批血清可以用于猪瘟活疫苗(种毒)鉴别检验。     

延边黄牛骨骼肌特异性钙蛋白酶基因多态性及其与肉质性状关系的研究

Calpain3(CAPN3)在肌肉组织中特异表达,其多态位点与畜禽诸多生产性状相关。本研究采用PCR-SSCP方法,设计2对基因特异性引物CAPN3-1、CAPN3-3,对96头延边黄牛CAPN3基因进行了SNPs检测,并将其与部分肉质性状进行了方差分析。试验结果显示,分别在CAPN3基因54982bp处发现A→G突变,56094bp处发现G→A突变。方差分析结果表明,2个位点中各个基因型与肉质嫩度、蒸煮损失均无显著相关性,CAPN3-3片段BB基因型仅在第3天时的pH显著高于AA纯合型个体(P0.05)。2个位点与肉质色度方差分析结果显示,2个位点中各个基因型黄色度呈显著相关(P0.05),与肉色中其他色度无相关性。CAPN3-1位点处,BB基因型较AA、AB基因型具有更高的黄色度值,此规律并不随时间的延续而改变,而在CAPN3-3位点处则无此规律。     

一株日本乙型脑炎病毒的分离与鉴定

吉林省某猪场送检一例病猪,经诊断疑似为日本脑炎病毒感染,对病猪的脏器以及全血进行BHK21细胞接种,对细胞培养物进行PCR检测和间接免疫荧光试验。结果显示,荧光显微镜下细胞浆内可见绿色荧光信号;PCR检测为日本脑炎病毒阳性,成功分离到一株日本乙型脑炎病毒。     

ACSL1基因对绵羊脂肪代谢的影响

为了深入了解绵羊长链脂酰辅酶A合成酶1(long-chain fatty acyl-CoA 1,ACSL1)对脂肪代谢的调控机制,本研究利用脂质体介导转染ACSL1基因过表达载体及干扰载体到前体脂肪细胞中,经过G418筛选获得转基因细胞,利用荧光定量PCR检测绵羊ACSL1mRNA水平变化,结果发现过表达载体和RNA干涉载体Ⅰ可有效对ACSL1基因进行转录和调控。检测过表达、沉默ACSL1基因后以及未转染的细胞中甘油三酯含量的变化,结果 ACSL1基因过表达后可显著提高绵羊前脂肪细胞的甘油三酯的含量,抑制ACSL1表达后也显著降低了甘油三酯的含量;表明ACSL1基因可能在调节动物脂肪代谢中起关键作用。     

浅谈漾濞县林地管理的现状及对策

<正>在《中华人民共和国森林法》伐迹地、火烧迹地、未成林造林中,对林地所作的解释是:"林地地、苗圃地和县级以上人民政府规包括郁闭度0.2以上的乔木林地以划的宜林地。"服务于林业生产及竹林地、灌木林地、疏林地、采的地块统称为林地。林地是森林资     

在农田水利工程管护中常见问题及相应措施

水利是农业生产的命脉,几千年来,农民基本上谁靠天吃饭,改革开放30多年来,农村的农田水利工程得到发展．在我省得到发展,为了充分发挥农田水利设施的作用．使农田水利工程为农业的增产、增效发挥作用,使农民的生活富裕起来,是水务工作者义不容辞的责任。为了加强农业生产的基础设,加强水利工程的建设和维护,使农田水利工程更好地为农业生产服务。因此,完善农田水利工程的基础设施,充分用好现有的农田水利工程的基础设施,可以收到事半功倍的成果,这也是现代农业化对可持续发展务实的具体体现。因此,作为水务管理人员,如何管好、用好当地的小型农田水利工程设施,尽力使当地农田水利工程与国家大型水利工程的建设形成互动,增强抗击自然灾害的能力,这是水务工作者认真研究的问题。文中以小型农田水利工程项目为例,就乡镇小型水利工程管护中常见问题及相应措施进行探讨。     

猪繁殖与呼吸综合症病毒ORF6基因的克隆

猪繁殖与呼吸综合症是由猪繁殖与呼吸综合症病毒（PRRSV）引起的一种严重危害养猪业的病毒性传染病，该病毒0RF6基因编码的膜基质蛋白又称M蛋白。根据Gen—bank上公布的PRRSVVR2332M基因核苷酸序列设计了一对特异性引物．并应用RT—PCR方法扩增出M蛋白的目标基因。将PCR产物克隆到pMDl8－T载体，筛选获得重组质粒PMD—M，并将其转入受体菌DH5a感受态细胞中，通过电泳检测分析获得PRRSVM基因。该研究对于PRRS的流行病学调查、病原学研究及诊断均具有重要意义。     

草原红牛胎儿成纤维细胞的分离培养及性别鉴定

为了获得高质量的草原红牛胎儿成纤维细胞,试验以发育40 d的草原红牛胎儿为材料,采用组织块贴壁法及胶原酶消化法分离纯化草原红牛胎儿成纤维细胞,并绘制生长曲线,再以SRY基因为模板设计性别鉴定引物,通过对已知性别草原红牛血液基因组PCR扩增检验所设计引物的性别特异性,最后采用基因组PCR方法鉴定分离得到的成纤维细胞的性别。结果表明:成功分离纯化出草原红牛胚胎成纤维细胞,经基因组PCR检验该细胞株性别为雄性。     

转Fat-1基因体细胞克隆草原红牛研究

Fat-1基因的转基因动物克隆,为研究ω-3多不饱和脂肪酸的功能提供了高效、准确的医学、营养学动物模型。试验成功建立了草原红牛耳部成纤维细胞系,将Fat-1基因转染到草原红牛成纤维细胞,获得转基因阳性细胞克隆。以转基因细胞为核供体,体外成熟牛卵母细胞为核受体构建转基因克隆囊胚,比较未转基因与转基因克隆胚胎的体外发育情况。结果表明,体细胞重构胚体外囊胚率分别为26.04%和26.04%,两者之间无显差异著(P>0.05)。转Fat-1基因的草原红牛重构桑葚胚或早期胚胎移植到延边黄牛子宫内,有7头妊娠,但没能够获得妊娠足月个体。