猪瘟活疫苗(种毒)鉴别检验阳性血清制备

为制备猪瘟活疫苗(种毒)鉴别检验阳性血清,本实验将4头非免疫健康猪进行猪瘟活疫苗基础免疫和猪瘟石门强毒株反复强化免疫后,采血分离血清,过滤、分装、冻干、熔封,获得4批产品,并进行了检验和验证。结果显示:物理性状、无菌检验、安全检验、均一性检验、支原体检验、真空度测定均合格;剩余水分均小于4%;特异性检验表明,口蹄疫病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒、牛病毒性腹泻/粘膜病病毒抗体均为阴性;残余猪瘟病毒免疫荧光和套式RT-PCR核酸检测结果均为阴性;兔体中和效价分别为1∶800、1∶800、1∶800和1∶1 600;对猪瘟兔化弱毒种毒和5种猪瘟活疫苗的验证结果均良好。该4批血清可以用于猪瘟活疫苗(种毒)鉴别检验。     

美国兽药不良反应报告体系

兽药(注:本文兽药如非特别指明,均特指化学药品)不良反应报告体系是兽药风险管理的重要组成内容,对兽药不良反应事件的分析、汇总和评价有利于指导和规范兽药产品临床合理用药、有利于鼓励创新兽药的研究与开发,并且为兽药再评价和兽药使用说明书修订等提供科学依据.本文主要从管理机构、评价体系、评价流程等几方面对美国兽药不良反应报告体系进行介绍,以期对我国建立兽药不良反应报告体系有所借鉴和帮助.     

猪瘟病毒猪细小病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒猪伪狂犬病病毒多重PCR方法的建立以及初步应用

猪瘟病毒、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒及猪伪狂犬病病毒均能导致猪繁殖障碍,对养猪生产影响很大。本研究通过设计4对针对这4种病毒的特异引物建立了多重PCR方法,分别对其最佳反应条件、特异性及敏感性进行了测定,结果表明:其敏感性可达到CSFV 10 TCID50,PPV 10TCID50,PRRSV 1 TCID50,PRV 100 TCID50 CSFV 10TCID50,PPV 10TCID50,PRRSV 1 TCID50,PRV 100 TCID50。同时具有较好的特异性,对猪瘟病毒石门株、猪瘟病毒兔化弱毒株、PRV闽南A株、PPV弱毒疫苗株、PRRSV KY 35株及PRRSV B13株6个毒株均能扩增出相应的片段,而BVDV、BDV均未扩增出相应的片段。本方法的建立对于这4种病毒病的早期快速检测具有十分重要的意义。     

高效液相色谱法测定提纯结核菌素效价的研究

为探讨高效液相色谱法测定牛型提纯结核菌素(PPD)效价的可行性,本研究根据PPD中蛋白成分的紫外光吸收波长,采用专用聚苯乙烯/二乙烯苯树脂色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm,300 nm),流动相为乙腈-水-三氟乙酸(25∶75∶0.1),检测波长为271 nm,建立了灵敏、快速的PPD效价的高效液相色谱测定法。在0.4×104 IU/mL～1.1×104 IU/mL的浓度范围内,效价与峰面积呈良好的线性关系,线性回归方程为y=2×106x-6783.6,相关系数R=1.000。将PPD样品用灭菌水稀释后,注入液相色谱仪,测得效价为2.59×104 IU/mg,与传统豚鼠标定法的测定结果(2.91×104 IU/mg)基本一致。该方法简便,灵敏度高,检测速度快,可以较好地控制PPD的质量。     

新常态下蔬菜规模园区发展对策研究——基于十堰市蔬菜园区实证研究

新常态下,在"创新、协调、绿色、开放、共享"五大发展理念引领下,供给侧改革和消费理念提升,现代农业发展和扶贫攻坚的推进,催生和激发了蔬菜园区(家庭农场)极大的生命力和发展空间。本文在实例调查的基础上,剖析了成因、问题,提出提素质、明导向、降成本、补短板、去杠杆、保安全的发展对策,以期为蔬菜规模园区(家庭农场)发展提供参考。     

猪瘟阴、阳性血清国家参照品候选物的均匀性考察

为了研制猪瘟阴、阳性血清国家参考品,对猪瘟病毒阴、阳性血清国家参考品候选物的均匀性进行检验。每亚批随机抽取16支样品,其中1支样品取样10次,其余样品取样1次,用猪瘟ELISA抗体检测试剂盒测定其OD450值,用t检验和F检验进行统计分析。结果显示,各组测定数据的均值与方差无显著差异。该批候选物是均匀的。     

猪瘟病毒阳性血清的热加速稳定性试验

采用热加速稳定性试验,以ELISA抗体效价为考察指标,确定猪瘟病毒阳性血清的贮存有效期,并拟合抗体效价随时间失活的线性回归方程及不同温度下失活速率常数k值的线性回归方程.从较高温度下的k值估算较低温度下的k值,由k值计算该血清在-20℃下的贮存有效期.结果表明,该血清在-20 ℃下的有效期约为16.8年.1年的持续稳定性监测结果也与热加速稳定性试验预期一致.该阳性血清可以用于制备猪瘟病毒阴性、阳性血清国家参考品.     

模式识别受体及其相关分子佐剂研究进展

综述了模式识别受体（Pattern recognition receptors,PRRs）及其相关分子佐剂的研究进展。PRRs是一类表达于固有免疫细胞并可识别病原体相关分子模式的识别分子。PRRs主要包括Toll样受体、NOD样受体、RIG—I样受体、清道夫受体、甘露糖受体和髓系细胞触发受体等。与PRRs直接相关的分子佐剂主要包括TLR激动剂、NLR激动剂、RIG—I和MDA5激动剂及CD40和肿瘤坏死因子受体超家族（TNFRSF）激动剂等。     

十堰地区薯尖菜绿色高产栽培技术

甘薯为旋花科甘薯属蔓生草本植物,经多年的品种改良,形成了以鲜嫩茎叶供食用的甘薯新品种,称为菜用甘薯、薯尖菜.薯尖菜富含各种维生素、胡萝卜素、膳食纤维和多种矿物质,营养丰富,食口感独特,可炒食、凉拌,深受消费者喜爱[1]. 薯尖菜采收期长,出产快、产量高,大棚种植于3月中下旬扦插,4月底开始采收,6～8月产量达到顶峰,10月清园换茬,可以填补早春和晚秋叶菜不足的淡期供应,逐渐成为市民日常生活中喜欢的特色蔬菜品种.与其他青菜相比,薯尖菜极少发生病虫害,全生长期几乎不用农药,能提升蔬菜产品质量安全,每330 m2的大棚1季能采收9～12茬,产值约1.4万元,经济效益可观.     

氮气用于兽用疫苗制品的保存试验

为达到延长兽用弱毒冻干疫苗保存期的目的,进行了用安瓿分装冻干疫苗并充氮气后熔封的试验.将鸡新城疫低毒力活疫苗和猪瘟活疫苗用安瓿分装冻干,安瓿拉丝灌封机充盈氮气后熔封.同等条件冻干的疫苗,分别对充氮气安瓿和抽真空安瓿进行了病毒含量测定,结果显示:鸡新城疫低毒力活疫苗(La Sota株)25℃放置14 d,检测病毒含量(EID50),抽真空的安瓿病毒含量为106.545,充氮气的安瓿病毒含量为106.625;2℃～8℃放置17 d,抽真空的安瓿病毒含量107.68,充氮气的安瓿病毒含量107.5.猪瘟活疫苗(Ⅰ)在25℃和37℃最长放置7 d,抽真空和充氮气安瓿均能达到合格的判定标准.说明在较高温度条件下,抽真空与充氮气保存的样品病毒含量基本一致,充氮气对兽用活疫苗冻干保存效果与真空保存的效果基本相同.使用充氮气方法保存疫苗,不仅避开了兽用疫苗管制玻璃瓶由于保存几年后部分胶塞变形造成失真空的问题,而且使用机械对安瓿充氮气和熔封,免去人工熔封安瓿的麻烦.