大豆球蛋白对仔猪小肠上皮细胞Occludin mRNA表达的影响

旨在研究纯化的大豆球蛋白对离体培养的仔猪空肠上皮细胞(IPEC细胞)通透性以及对细胞间紧密连接蛋白Occludin mRNA表达的影响。将不同浓度的大豆球蛋白(0～5.0mg·mL-1)与肠上皮细胞共同培养24h后,检测跨上皮细胞电阻值并用实时荧光定量PCR方法研究Occludin mRNA表达的变化规律。结果表明,与对照组相比,除大豆球蛋白浓度为0.5mg·mL-1时无明显变化,其他各浓度跨上皮细胞电阻值和Occludin mRNA相对表达量均呈显著下降趋势(P<0.001)。由此可知,大豆球蛋白使仔猪小肠上皮细胞通透性增加并使OccludinmRNA表达量下降,进一步明确了大豆球蛋白影响细胞增殖且对肠上皮细胞造成直接损伤,并破坏了肠上皮细胞完整性。     

PCI—Ghrelin-28aa质粒对仔猪生长性能的影响

提取并纯化了大量的PCI-Ghrelin-28aa质粒,选取了同日龄的断奶仔猪8只(雌雄各4只),按体质量、性别等分到质粒及生理盐水2个处理组中,进行对比试验,试验期为63 d,分别在0、7、21、35、49、63 d采样并测定相应的指标.结果表明,PCI-Ghrelin-28aa质粒对猪具有明显的促生长作用,作用时间至少可达1个月;PCI-Ghrelin-28aa质粒可提高猪对粗蛋白质的消化率,降低料重比;PCI-Ghrelin-28aa质粒具有增强猪机体免疫力的趋势.     

Glycinin在不同食性鱼类肠道分布规律的比较

以草鱼(Cyprinus idellus)、鲤鱼(C.carpio)和埃及胡子鲇(C.lazera)幼鱼为试验对象,添加鱼粉组为对照组,添加6%提纯的大豆球蛋白(Glycinin)组为试验组,设计成2种等氮(草鱼30.06%,鲤鱼36.02%,埃及胡子鲇40.05%)、等能(草鱼16.15 MJ/kg,鲤鱼15.26 MJ/kg,埃及胡子鲇15.86 MJ/kg)的半精制饲料。饲养6周后,解剖鱼体,迅速固定肠道的前、中、后段,制作肠道组织切片。用免疫组织化学方法染色、Olympus显微镜采集图像、Image pro-plus 6.0分析图像中的累积光密度。结果表明:Glycinin在草鱼前肠累积光密度显著高于中肠(P<0.05),与后肠差异不显著(P>0.05);鲤鱼前肠累积光密度显著高于中肠(P<0.05),后肠累积光密度极显著高于中肠(P<0.01),前肠与后肠差异不显著(P>0.05);埃及胡子鲇中肠累积光密度显著高于前肠(P<0.05),后肠与前肠、中肠差异均不显著(P>0.05)。Glycinin在草食性和杂食性鱼类前、中、后肠分布规律呈先下降后上升的趋势,肉食性鱼类前、中、后肠分布规律呈先上升后下降的趋势;草食性、杂食性、肉食性鱼类同一部位的Glycinin的含量呈现逐渐升高的趋势。     

体外培养猪小肠上皮细胞大豆凝集素结合位点的标记

本研究旨在获得体外培养状态下的猪小肠上皮细胞,研究猪小肠上皮细胞与大豆凝集素的结合情况.选取新生未哺乳健康仔猪,取小肠组织对小肠上皮细胞进行分离培养,并进行纯化.纯化后的细胞以角蛋白抗体-8为—抗进行细胞免疫化学试验鉴定,鉴定后的猪小肠上皮细胞以FITC-SBA为探针进行细胞凝集素荧光标记化学试验,对猪小肠上皮细胞大豆凝集素结合位点进行标记.结果表明:试验分离纯化的细胞经角蛋白抗体-8鉴定为阳性,所分离纯化的细胞为猪小肠上皮细胞,经检测其纯度达90％以上,猪小肠上皮细胞FITC-SBA标记结果为阳性.体外培养的猪小肠上皮细胞表面存在大量的大豆凝集素结合位点,进一步明确了猪小肠上皮细胞是大豆凝集素结合的主要细胞类型之一,为单胃动物大豆凝集索抗营养机制研究提供理论依据.     

热处理对不同基因型大豆喂鸡效果的影响

试验对“吉－２９”和“吉在－Ｄ１”两个基因型的全脂大豆进行了不同的压力蒸汽热处理，即１～１．５Ｉｂ加热５ｍｉｎ；１～１．５Ｉｂ加热２０ｍｉｎ和５Ｉｂ加热１ｈ，然后在４５℃恒温下烘干１０ｈ，粉碎后用于试验。试验用９种日粮，对照日粮为市售的蛋用雏鸡料，其余８种试验日粮由８０％的对照日粮和２０％不同处理（包括生大豆和以上３种处理的大豆）的两种基因型大豆组成。每种日粮喂６只１日龄雏鸡，饲喂１周，在后３天连续收集粪便，按全收粪（尿）法测定每种处理大豆的蛋白质沉积率。试验结束后测量胰脏和肝脏的重量。结果表明：饲喂生大豆可明显地降低采食量（Ｐ＜０．０５）和增重速度（Ｐ＜０．０５），蛋白质沉积率降低（Ｐ＜０．０５），胰脏的相对重量增加（Ｐ＜０．０５），且不同基因型大豆的饲喂效果有明显的差异：加热处理可有效地改善大豆的饲喂效果。     

比较动物营养学的研究进展及应用前景

比较动物营养学是动物营养学的新兴分支,是研究动物遗传和营养环境互作关系的科学,是动物营养学和动物遗传学的交叉学科。本文系统阐述了比较动物营养学的概念、内涵、研究层次、重点研究课题、研究进展。比较动物营养学具有广阔的应用前景,其研究成果是动物生产中进行精确选种、精准饲养、精细管理的参考依据。     

乌金猪种质特性及日粮适宜营养水平研究进展

乌金猪是中国优良的地方猪种,具有适应性强,耐粗饲,抗病力强、繁殖性能好,脂肪沉积能力强,肉质细嫩等优点,作者就乌金猪的种质特性和日粮适宜营养水平研究进行综述,并从营养学角度对乌金猪的研究进行了展望。     

鸡小肠上皮细胞表面大豆凝集素受体的标记

以0日龄海蓝褐蛋鸡为材料,用胶原酶结合组织块培养的方法分离培养了鸡小肠上皮细胞,通过抗角蛋白单克隆抗体对分离的细胞进行纯度鉴定,并用荧光标记大豆凝集素对已鉴定的细胞大豆凝集素结合位点进行了标记.结果表明:试验获得了鸡小肠上皮细胞原代培养物纯度＞90%,可用于后续试验,荧光标记表明细胞表面存在大量的大豆凝集素受体.     

天然大豆球蛋白亚基的分离纯化

利用变性剂脲和还原剂β-巯基乙醇解聚大豆球蛋白,在还原条件下通过DEAE琼脂糖凝胶F阴离子交换层析分离大豆球蛋白亚基,并对制备的亚基进行复性,从而建立了系统的分离纯化大豆球蛋白天然亚基的方法。对该方法分离亚基的产率和亚基的纯度进行评定,并利用大豆球蛋白免疫家兔制备的抗血清检测各种纯化亚基的免疫活性。结果表明：在还原条件下利用阴离子交换层析,可以有效的分离大豆球蛋白的碱性亚基和不同种类的酸性亚基。该方法的产率较高,以大豆球蛋白分离纯化碱性亚基及酸性亚基A1a, A2, A3, A4的产率分别为23.93%,14.95%,14.33%,12.06%,7.12%。制备的碱性亚基和酸性亚基A1a, A2 , A3, A4的纯度分别为84.39%,90.48%,92.00%,65.91%,85.00%;纯化亚基能与抗大豆球蛋白血清特异性结合,具有免疫活性。     

β-伴大豆球蛋白β亚基的纯化及免疫活性鉴定

等电点沉淀法和凝胶过滤层析提纯的β-伴大豆球蛋白经6 mol·L-1脲变性后解聚为游离亚基,利用DEAE琼脂糖凝胶F F离子交换层析分离纯化β-伴大豆球蛋自亚基,并对纯化亚基进行透析复性.同时将β-伴大豆球蛋白免疫家兔制备抗血清,利用免疫印迹方法检测纯化的亚基与β-伴大豆球蛋白抗血清是否发生免疫反应.结果表明:利用DEAE琼脂糖凝胶F F阴离子交换层析可以纯化出高纯度的β-伴大豆球蛋白β亚基,纯化的β亚基可以志抗β-伴大豆球蛋白抗体结合,具有免疫活性.