茵陈汤对饥饿鲤体质量、生物学性状、体成分及血清生化指标变化的影响

试验主要评估茵陈汤对饥饿鲤物质代谢及健康的作用,为鲤的健康高效养殖以及饲料开发提供依据。将210尾鲤(平均体质量19.90 g±2.65 g)以每箱35尾随机投放于6个室内网箱,分为对照组和茵陈汤组,饲以分别添加0%、0.9%茵陈汤的试验饲料56 d,然后每箱随机选取8尾体格健壮的鲤进行为期30 d的饥饿试验。饥饿试验前后进行鱼体生物学性状、体成分、血清指标的检测。结果表明在饲养试验中,鲤的生长性能、生物学性状、肌肉中水分、粗蛋白、粗脂肪含量、肝胰脏常规成分两组之间均无显著差异(P0.05),肌肉中粗灰分含量、血清ALT水平茵陈汤组显著低于对照组(P0.05),其他血清生化指标无显著差异(P0.05);饥饿后茵陈汤组的减量率显著低于对照组(P0.05),肥满度、肝胰脏水分含量显著高于对照组(P0.05),肌肉和肝胰脏粗蛋白、粗脂肪、粗灰分含量两组之间均无显著差异(P0.05);两阶段间,茵陈汤组鲤饥饿后脾脏指数显著高于饲喂后(P0.05),肥满度显著低于饲喂后(P0.05),其他生物学指标两组均分别显著低于饲喂后(P0.05)。肌肉中水分、粗蛋白、粗灰分含量饥饿后两组均分别显著高于饲喂后(P0.05),粗脂肪含量显著低于饲喂后(P0.05),茵陈汤组肝胰脏变化趋势与肌肉相符。饥饿后血清HDL、LDL、CHOL水平显著高于饲喂后(P0.05),其他血清指标两组均分别显著低于饲喂后(P0.05)。从饥饿前后鲤体质量、体成分及血清生化指标的变化,说明茵陈汤对鲤体内物质和能量代谢具有一定的影响,可以促进脂肪的利用,并减缓机体对营养物质的快速消耗,有利于体质量的维持。同时,茵陈汤有助于鲤的健康养殖,对鲤的肝胰脏具有一定保护作用。     

3种淡水鱼血浆中游离磷脂的有效性测定

[目的]检测鲤鱼、鲫鱼和鲶鱼3种淡水鱼血浆中游离磷脂的有无,为探索3种淡水鱼凝血现象的生理机制奠定基础。[方法]采用加热兔脑磷脂凝血有效性试验检测加热磷脂的活性,将80℃水浴加热20min后的兔脑磷脂分别加入兔的少血小板血浆、鲤鱼、鲫鱼和鲶鱼的无细胞血浆,测定各血浆加热磷脂的活化部分凝血酶原时间（APTT）。[结果]各试验动物血浆加热磷脂的APTT平均值与对照间差异不显著（P〉0.05）,说明其凝血功能未发生变化;鲤鱼、鲫鱼和鲶鱼的CFP和家兔的不同稀释倍数的PPP的混合血浆平均凝固时间与对照间存在极显著差异（P〈0.01）。[结论]鲤鱼、鲫鱼和鲶鱼的CFP中不含游离的磷脂,它们CFP在无磷脂存在的条件下也可以发生凝固。     

鲫鱼一种新型SNRPC基因的蛋白表达和抗体制备分析

本研究构建了鲫鱼卵母细胞特异表达的新型SNRPC基因的原核表达载体,表达并纯化蛋白,制备多克隆抗体,并检测抗体特异性,为进一步研究新型SNRPC基因的功能奠定基础。首先设计引物,应用RT-PCR从鲫鱼成熟卵母细胞中获得含该基因片段,重组入原核表达载体PinPoint T中,在大肠杆菌BL-21(DE3)中诱导表达,应用亲和层析法获得纯度较高的原核表达蛋白并免疫家兔制备多克隆抗体,用Western blot方法检测此抗体特异性。成功构建了新型SNRPC基因重组表达载体,表达的蛋白经纯化后免疫家兔得到了特异的多克隆抗体。鲫鱼卵母细胞的新型SNRPC基因的原核表达载体的构建、重组蛋白的表达纯化及抗体的制备为后续的研究提供了理论基础。     

有机酸提取草鱼皮胶原蛋白的工艺研究

[目的]研究草鱼皮基本成分及鱼皮胶原蛋白的提取工艺。[方法]通过正交试验确定有机酸提取草鱼胶原蛋白的最佳提取工艺条件,并对所提取的胶原蛋白进行紫外光谱分析币口氨基酸组成分析。[结果]结果表明,采用0.5mol/L的柠檬酸,料液比为1：10,溶胀时间为24h时,可充分提取草鱼皮中的胶原蛋白,提取率可达92．88％。[结论]该研究可为开发草鱼的附产物提供科研依据。     

鲤鱼白细胞介素-1β全长cDNA的克隆·鉴定及其差异表达分析（摘要）（英文）

[目的]进行鲤鱼白细胞介素-1β（IL-1β）全长cDNA的克隆、鉴定及其差异表达分析。[方法]利用DD-RTPCR方法获得差异表达cDNA片段,对有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库进行筛选,克隆了鲤鱼IL-1β的全长cDNA,并进行了序列分析和差异表达分析。[结果]获得的阳性克隆含有1个大小为831bp编码276个氨基酸的完整开放阅读框。聚类分析表明,鲤鱼IL-1β氨基酸序列与日本鲤鱼紧密聚为一支,氨基酸序列的同源性达95%,之后聚类顺序依次为鲫鱼、斑马鱼、猪、牛、马、人和小鼠。差异表达分析表明,经有丝分裂原刺激后前期（2h）白细胞中IL-1β的表达量显著增大,但随着时间推移（12,24h）并非一直较同期大,表达量总体趋势成峰形。[结论]为进一步研究IL-1β在体内的表达方式、功能特点和调控机理以及在炎症反应、应急反应和免疫应答的作用机制奠定了基础。     

牛磺酸对黄河鲤鱼饲料消化率的影响

[目的]研究牛磺酸对黄河鲤鱼(Cyprinus carpio)饲料消化率的影响。[方法]选用体重121 g左右的黄河鲤鱼450尾,随机分为5个处理组,每组90尾,设3个重复,每个重复30尾,在日粮中添加0、400、800、1 200、1 600 mg/kg的牛磺酸,以0 mg/kg添加组为对照组,试验期56 d。[结果]牛磺酸提高了黄河鲤鱼饲料中干物质、粗蛋白和粗脂肪的消化率,但对粗纤维消化率的影响不显著;添加适宜牛磺酸(800～1 200 mg/kg)能显著提高干物质、粗蛋白和粗脂肪的消化率(P<0.05)。[结论]黄河鲤鱼饲料中牛磺酸的最适添加量为800mg/kg。     

感染鲤浮肿病毒镜鲤的组织病理变化及病毒分布规律研究

【目的】 研究感染鲤浮肿病毒（Carp edema virus，CEV）镜鲤的组织病理特征及CEV在各组织中的分布规律，以期为鲤浮肿病的诊断和防控提供参考。【方法】 利用HE染色观察发病镜鲤心脏、肝脏、皮肤、脾脏、肾脏、脑、鳃组织的病理变化情况；用免疫组织化学法检测CEV在镜鲤各组织的分布和蛋白表达情况；利用CEV P4a基因保守区域设计3条探针，于5'-端标记FAM进行原位杂交，检测CEV在镜鲤各组织的核酸分布情况；实时荧光定量PCR检测感染镜鲤各组织的病毒载量。【结果】 HE染色观察发现，患病镜鲤的鳃丝肿胀、充血，鳃丝间有脱落堆积的红细胞和炎性细胞，肝脏细胞深染萎缩，胆小管出血，脾脏组织出现明显间隙并伴有出血，肾脏组织充血明显，肾小管有明显闭合现象。免疫组织化学结果显示，在患病鱼的鳃和肝脏组织中大量表达CEV P4a蛋白，在其他组织中也有少量表达。原位杂交结果显示，CEV核酸大量存在于鳃组织中，在心脏、脾脏和肾脏中均有少量阳性信号。实时荧光定量PCR结果显示，鳃组织病毒载量极显著高于心脏、肝脏、皮肤、脾脏、肾脏、脑组织（P<0.01）。【结论】 感染CEV后，镜鲤内脏组织出现不同程度充血、出血，病毒主要分布在鳃，说明鳃是CEV增殖的最主要靶器官。