杀虫真菌与苏云金芽胞杆菌对草地贪夜蛾的联合室内杀虫活性研究

草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda（J.E.Smith）是一种迁飞性重大害虫。为了弄清不同微生物联合使用对草地贪夜蛾的生防潜力，在室内条件下采用直接喷雾方法，测定了金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae CQMa421、球孢白僵菌Beauveria bassiana ZJU435和苏云金芽胞杆菌（Baci1lus thuringiensis，Bt）G033A两两之间对草地贪夜蛾幼虫的室内联合杀虫活性。结果表明：金龟子绿僵菌CQMa421与球孢白僵菌ZJU435悬浮液联合接种10 d后，1～3龄草地贪夜蛾幼虫校正死亡率分别为65.6%、58.8%和35.4%，都显著高于CQMa421和ZJU435单剂处理组。CQMa421与Bt联合接种5 d后，2龄草地贪夜蛾幼虫校正死亡率为82.6%，显著高于CQMa421（21.1%）和Bt（65.5%）单剂处理；ZJU435与Bt联合接种5 d后，2龄和4龄草地贪夜蛾幼虫校正死亡率为80.4%和68.6%，显著高于Bt和ZJU435单剂处理组。上述试验结果表明：不同杀虫真菌联合使用、杀虫真菌与Bt联合使用能有效提高对草地贪夜蛾幼虫的杀虫活性，为田间利用不同微生物农药有效防控草地贪夜蛾提供了依据。     

苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白Cry1D新基因的克隆与特性

为扩充鳞翅目害虫杀虫基因资源，本研究从苏云金芽胞杆菌BN23-5中克隆得到一个新的cry基因，并对其进行鉴定和分析。该基因为一个完整的cry1D基因，全长3501 bp，编码1166个氨基酸残基。该氨基酸序列是一个新的Cry氨基酸序列，与Cry1Db1的同源性最高，为86%，命名为Cry1Dd1（登录号为KJ728844）。将该基因插入穿梭表达载体pSTK中，转入BT无晶体突变株HD73^-中进行表达。结果表明，cry1Dd1基因能在BT无晶体突变株中表达，并形成菱形伴孢晶体。SDS-PAGE验证其分子量为132.2 kD，与预测的大小相符。生物活性测定表明，Cry1Dd1晶体蛋白对小菜蛾的幼虫具有杀虫活性，LC₅₀为13.1 μg/mL；能明显抑制甜菜夜蛾幼虫的生长；但对棉铃虫幼虫没有杀虫活性。对cry1Dd1基因序列进行分析，cry1Dd1包含8个block保守区域，这和目前其他的cry基因相似；Cry1Dd1蛋白的活性区域为N端的37~593位氨基酸残基。     

牛布氏杆菌病的防控

牛布氏杆菌病是由布鲁氏杆菌感染引发牛生殖障碍的人畜共患病,发生后难以短时间内进行控制,影响人畜健康,制约行业发展,应采用综合防控措施进行预防。     

海带多糖对断奶仔猪粪便中双歧杆菌的影响

为了研究日粮中添加海带多糖对断奶仔猪粪便中双歧杆菌的影响.试验选取体重接近的21日龄断奶仔猪160头,随机分为4组,每组5个重复,每个重复8头,在基础日粮中分别添加0、100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg的海带多糖,饲喂21 d后,每个重复随机挑选1只仔猪收集新鲜粪便,测定数量.结果表明:添加100 mg/kg、200 mg/kg海带多糖组的双歧杆菌数量与对照组相比有所增长,但差异不显著(P>0.05),而400 mg/kg海带多糖组的双歧杆菌数量显著增加,与对照组相比差异显著(P<0.05).因此,日粮中添加一定水平的海带多糖能提高断奶仔猪粪便中双歧杆菌的数量,可能会促进断奶仔猪肠道中有益菌双歧杆菌的增殖,改善断奶仔猪肠道菌群结构.     

复配抑菌剂对青椒细菌性软腐病防治及保鲜效果研究

为研发适用于青椒细菌性软腐病防治及青椒保鲜的复配抑菌剂,分别研究了ε-聚赖氨酸、乳酸链球菌素、曲酸对细菌性软腐病的抑制效果,基于单因素抑菌试验结果,运用响应面试验优化复配抑菌剂配方,并将所得最佳复配抑菌剂用于青椒保鲜试验。结果表明,复配抑菌剂的最佳配方为:ε-聚赖氨酸161.50 mg/L,曲酸13.34 g/L,乳酸链球菌素181.00 mg/L,其对胡萝卜软腐果胶杆菌的实际抑菌率可达95.33%,与预测值95.50%相近。青椒保鲜试验发现,复配抑菌剂能有效维持青椒叶绿素、VC及可溶性固形物含量,降低失重率和抑制相对电导率的上升,有助于维持青椒感官品质。     

短小芽孢杆菌HB-3的分离鉴定及其淀粉酶的纯化特性研究

从湖北省襄阳市三九酿酒厂下水道污泥分离筛选得到产淀粉酶菌株HB-3,根据菌株生长形态和生理生化特征分析,初步鉴定为短小芽孢杆菌。短小芽孢杆菌HB-3在淀粉培养基上培养72 h后,淀粉酶活力达到120.0 U/mL。然后使用DEAE-52和CM-52阴阳离子交换层析柱对短小芽孢杆菌HB-3产生的淀粉酶进行了部分纯化。结果表明,短小芽孢杆菌HB-3中淀粉酶经过部分纯化后,纯化倍数为5.9,酶活力回收率为90.9%。纯化后的淀粉酶使用SDS-PAGE凝胶电泳研究,以标准蛋白为对照,计算出短小芽孢杆菌HB-3中淀粉酶分子量为56.5 kDa。同时对短小芽孢杆菌HB-3的淀粉酶进行了纯化特性研究,结果表明,该酶的酶促反应最适温度为50℃,40～60℃热稳定性良好;该酶的酶促反应最适pH为5.0,pH 4.0～6.0酸碱稳定性良好,该酶对底物淀粉的反应动力学米氏常数K_m为0.062 mmol/L,最大反应速率V_(max)为3.019 mmol/(L·min)。     

芽孢杆菌微生态制剂对京红1号蛋鸡产蛋性能和蛋品质的影响

试验旨在研究芽孢杆菌微生态制剂对京红1号蛋鸡产蛋性能和蛋品质的影响。选择健康、体况良好的404日龄京红1号蛋鸡960只,随机分为4组,每组6个重复,每个重复40只。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ组饲喂基础日粮+益倍佳(凝结芽孢杆菌),试验Ⅱ组饲喂基础日粮+赐尔健(纳豆芽孢杆菌),试验Ⅲ组饲喂添加地衣芽孢杆菌+枯草芽孢杆菌(1∶1)混合制剂的日粮,试验组微生态制剂的添加量均为300 mg/kg。试验期25 d,其中预饲期5 d。结果显示,与对照组相比,试验组蛋鸡产蛋率均显著提高(P<0.05),破、软蛋率均显著降低(P<0.05),试验Ⅰ、Ⅱ组料蛋比显著降低(P<0.05)。与对照组相比,Ⅱ组鸡蛋平均蛋重显著提高了2.25%(P<0.05);试验组Ⅰ、Ⅱ的蛋黄相对重、蛋壳相对重、哈氏单位均无显著影响(P>0.05);试验Ⅲ组蛋壳颜色为1~3级的鸡蛋比例明显增多,差异显著(P<0.05)。综上所述,添加微生态制剂赐尔健(纳豆芽孢杆菌)可显著提高京红1号产蛋率和平均蛋重,显著降低料蛋比和破、软蛋率;添加枯草芽孢杆菌+地衣芽孢杆菌(1∶1)混合制剂可使蛋壳颜色加深的鸡蛋比例显著增多。