小鼠脾淋巴细胞转化试验最佳条件的测定

淋巴细胞转化试验是检测T细胞免疫功能的方法,本文讨论小鼠脾淋巴细胞转化试验的最适条件。1材料与方法1.1试验小鼠8～10周龄健康昆明鼠。1.2试剂和仪器RPMI1640培养基,GIBCOBRL公司产品;ConA,华美产品;Brdu-ELISA试剂盒,Roche公司产品;淋巴细胞分离液,上海试剂二厂产品;318MC型酶标仪,上海三科仪器有限公司;GS-15R型离心机,BECKMAN产品;96孔细胞板,FALCON公司产品。1.3小鼠脾淋巴细胞悬液的制备将小鼠拉颈处死,无菌取出脾脏置于含10%小牛血清的RPMI1640营养液中,用无菌弯头镊子轻轻挤压脾脏,吹打分散成脾细胞悬液,将悬液…     

60Co-γ射线辐射对早熟禾种子发芽及种子内酶活性的影响

利用^60Co-γ射线辐射处理草地早熟禾的三个品种解放者、新哥来德和奖品的干种子，观测不同辐射剂量（OGy、50Gy、100Gy、150Gy、200Gy）的^60Co-γ射线对种子发芽的影响及种子萌发过程中的SOD和POD酶的活性。结果表明。低剂量（50Gy）的辐射有促进作用，高剂量的辐射对草地早熟禾种子的萌发有抑制作用，且随着辐射剂量的加大，抑制作用增强。在这五种剂量的辐射下，两种酶的活性都是先升高后降低。     

CSFV,SIV,PCV2,PRV和PRRSV多重PCR检测方法的建立及初步应用

参照GenBank中的猪瘟病毒(CSFV)、猪流感病毒(SIV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合病毒(PRRSV)基因序列,设计了5对引物分别用于扩增CSFVE2、SIV、PCV2ORF2、PRVgB、PRRSVN基因的目的片段。通过对反应条件进行优化,建立了检测CSFV、SIV、PCV2、PRV和PRRSV的多重PCR(mPCR)诊断方法。敏感性和特异性结果显示,该mPCR对5种病毒的最低核酸检测量为10pg。而对大肠杆菌、葡萄球菌、链球菌、猪细小病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡新城疫病毒、猪传染性胃肠炎病毒的多重PCR的扩增结果均为阴性。临床样品的多重PCR检测结果表明,建立的多重PCR方法能够对SIV、CSFV、PCV2、PRV、PRRSV单个或混合感染的临床样品进行快速鉴别诊断。     

稻田养蟹日常管理技术要点

正稻田养蟹是一种生态种养殖技术,水稻田为河蟹提供了优良安全的生长与栖息环境,稻田中施肥可直接或间接为河蟹培育天然饵料。同时,河蟹在稻田中觅食活动,可起到松土、除草、灭虫、防病、增温、增肥、增氧等作用,促进水稻生长,免用或少用除草剂、化肥。由此形成了一个良性生态循环系统,达到了蟹稻共生、互利双赢的目的。这样既促进了水稻增产,减少了农药、除草剂、化肥的使用,降低了生产成本,又生产出了无公害、绿色和有机     

鸭副粘病毒弱毒株的选育

应用SPF鸡胚成纤维细胞(CEF)连续传代培育出鸭副粘病毒弱毒疫苗株,并测定该弱毒株的部分生物学特性.结果显示:该弱毒株已失去对无母源抗体番鸭的致病性,在雏番鸭体内连续肓传5代,未见毒力返强现象;对CEF的TCID50稳定在10-6.0～10-6.5·(0.1 mL)-1;无母源抗体的番鸭免疫不同代次弱毒后7 d攻击鸭副粘病毒强毒,保护率均在90％以上.结果表明该弱毒株安全性好、遗传性稳定、免疫原性强,可用于制备鸭副粘病毒病疫苗.     

1株鸡新城疫强毒株的分离与鉴定

1998年 1 0月 ,福州郊县某鸡场的新城疫免疫鸡群发生以呼吸困难、拉黄绿色稀粪、气管出血、盲肠扁桃体出血、头颈歪曲为特征的疫病 ,发病率和病死率分别为 85%和 46 %左右 ,疑为鸡新城疫 ,但用ND I系疫苗紧急接种未能控制疫情 ,故采集病料进行病毒分离和鉴定。结果报告如下。1　材料与方法1 .1　材料　 9～ 1 0日龄鸡胚、雏鸡均来自新城疫HI抗体阴性鸡 ;新城疫标准阳性血清、标准强毒F4 8E8株和弱毒 La Sota株 ,均购自中国兽医药品监察所。1 .2　病毒分离1 .2 .1　病料处理　取病鸡的肝、脾、肾和气管 ,剪碎研磨 ,以 Hank' s液制成 1∶ …     

两种方法检测雏番鸭细小病毒抗体效价的比较

本文对检测雏番鸭细小病毒抗体效价的LPAISN两种方法进行比较,现报道如下:1材料与方法1.1病毒和血清:番鸭细小病毒福州株(MPV-F),鸭细小病毒阳性血清、阴性血清和单抗致敏的胶乳由本室提供。雏番鸭细小病毒活疫苗也由本室提供。1.2试验鸭及疫苗免疫1日龄雏番鸭45羽购自田县,分别腿部肌肉注射2001、2003和2005批号疫0.2ml。每批号疫苗注射15羽。隔离饲养15天后,心采血,分离血清。每批次随机抽取5份血清,56℃水灭活30min后供测试。1.3胶乳凝集抑制试验(LPAI):参照程由铨的方法取被检血清50μl加入第一孔(4单位抗原孔)中,混后取50μl加入…     

猪伪狂犬病病毒在几种细胞中增殖情况的比较

猪伪狂犬病（Pseudorabies，PR）是由伪狂犬病病毒（Pseudorabies Virus，PRV）引起的以发热和脑脊髓炎为主要特征的急性、发热性传染病。该病主要以成年妊娠母猪流产、死产、木乃伊胎、新生仔猪急性死亡及3周龄以内的仔猪表现神经症状为主要特征。一般幼龄仔猪发病率和死亡率可高达100％。因此对猪伪狂犬病的预防和控制，目前最根本的措施是疫苗接种，而疫苗效果好坏主要取决于抗原浓度。为了制备出浓度高的抗原，我们对猪伪狂犬病病毒在5种细胞中的增殖情况进行了试验，现报道如下：     

影响佐剂应用的因素

佐剂能够增强疫苗的免疫效果,已经在多种疫苗研究中使用佐剂。但在生产过程中,佐剂的使用受到一定的限制。限制因素包括安全性,作用机理研究相对落后,免疫途径多样化,佐剂诱导不同的免疫应答类型,效果评价方法不统一,以及自身的物理化学性状的不稳定性等问题。     

三种鸭源细小病毒的抗原相关性研究

为了明确番鸭细小病毒(MPV F株)、番鸭源鹅细小病毒(MD-GPV PT株)和鸭短喙型鹅细小病毒(SBDS-GPV M15株)的抗原相关性,本研究应用微量中和试验(NT)和胶乳凝集抑制试验(LPAI)测定了三种病毒分别与同源和异源血清的中和抗体和LPAI抗体效价,分析三者之间的抗原相关性。结果显示：3种病毒与同源抗血清的中和效价和LPAI效价均明显高于异源血清;MPV与MD-GPV和SBDS-GPV之间的中和抗体效价R值分别为0.01和0.02,LPAI抗体效价R值分别为0.03和0.04;MD-GPV和SBDS-GPV的中和抗体和LPAI抗体效价R值均为0.35。表明MPV与GPV（包括MD-GPV和SBDS-GPV）之间的抗原相关性较低;MD-GPV与SBDS-GPV抗原相关性较高,为同一血清型的不同亚型。研究结果为有效防控不同鸭源细小病毒感染提供了理论依据。